Kronisk kateterisering av blodkar i rotte er ofte nødvendig for administrasjon av stoffer, innhente blodprøve over en periode eller for direkte bevisst blodtrykksmålinger. Femoral arteriell kateterisering av rotte og tilsvarende målinger av blodtrykket i bevisst dyret vil bli demonstrert.
I flere fagfelt, adgang til sirkulasjonssystemet i laboratoriestudier er nødvendig. Farmakologiske studier på rotter med kronisk implantert katetre tillater forsker å effektivt og humant administrere stoffer, utføre gjentatte blodprøvetaking og bistår i bevisst direkte målinger av blodtrykk og hjertefrekvens. Når kateteret er implantert langsiktig sampling er mulig. Patency og kateter liv avhenger av flere faktorer, blant annet låsen løsningen brukes, flushing diett og kateter materiale. Denne videoen vil demonstrere metodikk lårarterie og venøs kateterisering av rotte. I tillegg videoen vil demonstrere bruken av femoral venøse og arterielle katetre for blodprøvetaking, narkotika administrasjon og bruk av arteriekateter i å ta målinger av blodtrykk og puls i en bevisst fritt bevegelige rotter. En snor og sele festet til en svivel system vil tillate at dyret kan hobrukt og har prøver tatt av forskeren med et minimalt avbrudd for dyret. For å opprettholde patency av kateteret, er forsiktig daglig vedlikehold av kateteret nødvendig med lock-løsning (100 U / ml heparinisert saltvann), maskin-bakken butt tupp sprøyte nåler og bruk av sprøyte filtrene til å minimere potensiell forurensning. Med forsiktig aseptisk kirurgiske teknikker, riktig kateter materialer og forsiktig kateter vedlikehold teknikker, er det mulig å opprettholde patent katetre og friske dyr over lengre tid (flere uker).
Arterielle og vene kateterisering har historisk blitt brukt til både akutt og kronisk overvåke blodtrykk, smake blod og levere stoffer i eksperimentelle rotter dyremodell 1-4. En stor fordel med disse kirurgiske besetninger er at det tillater overvåking prosedyrer, inkludert blodprøvetaking, narkotika administrasjon og blodtrykket overvåking, skal utføres med minimal forstyrrelse og / eller stress til dyret 1. Tallrike forskere har skrevet protokoller og har spesifikke metoder som deres Laboratoriet utfører den kirurgiske prosedyren 5-8. Videoen og illustrasjoner vise hva vårt laboratorium har funnet å være vellykket med hensyn til femoral arterielle og venøse kateterisering prosedyre.
Rotter blir ofte brukt i laboratoriet for en rekke vitenskapelige studier på grunn av sin lille størrelse og bekvemmelighet i håndtering. Det er flere steder hvor en kroniskkateter kan plasseres innenfor et dyr, inkludert vena jugularis, abdominal aorta, carotisar og lårarterie, for å nevne noen. Rotte femoral sted for kronisk kateterisering resulterer i økt lengde av kateter patency og hadde den raskeste gjenvinning av pre-kirurgisk dyr vekt i forhold til andre kateter steder 9.
Tallrike forskere har brukt inneliggende kateter for akutte så vel som kronisk blodprøvetaking 1-5,11-13. I mange studier flere blod trekker kreves av et dyr og eksterne cannulation / kateterisering er en metodikk som er en fordel på grunn av sin ikke-traumatisk natur, dessuten kan det gjøres mens dyret er ved bevissthet, og dermed er ikke begrenset av effekten av anestetika og også dyret kan fritt bevege 1,10. Den beste metoden som å skaffe blodprøver og måle stresshormoner hos gnagere har vært lenge debattert 6,13. Med hensyn til farmakokinetiske Studies, tillater catheterization av forskningen dyret gjentatte blodprøver med minimal tilbakeholdenhet ved bruk av en kronisk implantert kateter system. I tillegg har studier vist redusert basal konsentrasjoner av adrenalin, noradrenalin og dopamin i plasma av fritt bevegelige rotter (jugulare kateter) sammenlignet med dyr som har blitt håndtert (30 sekunder) og eller tilbakeholdne (5 minutter) 14. En ekstra metoden som å skjelne økning i stress er ved å måle plasma Corticosterone nivåer. Tidligere ble det antydet at selv etter tre til fire dager av kirurgisk utvinning ganger at plasma Corticosterone nivåer ble forhøyet i kroniske cannulated rotte 15. Imidlertid har de siste forbedringer i metodikk fastslått at det ikke er noen forskjeller i baseline plasma Corticosterone nivåer i vena jugularis cannulated rotter sammenlignet med uncannulated rotter 16 år. I tillegg HPLC metode for Corticosterone analyse viser også at corticosteren nivåer er forhøyet ved tilbakeholdenhet stresset, men stabil etter jugulare kateterisering 16.
En ytterligere bruk av kronisk catheterization er måling av blodtrykk og puls hos gnagere. Det finnes flere metoder som benyttes for å måle blodtrykk og puls hos rotter, og disse inkluderer ikke-invasive hale cuff metoder, radiotelemetry prosedyrer og direkte inneliggende katetre. Hver metode har sine fordeler og ulemper som er beskrevet i detalj i andre publikasjoner. Inneliggende væskefylte katetre kan implanteres i flere arterier i rotte. Den lårarterie er, men en arterie som kan brukes for dette tiltaket. For blodtrykk / puls tiltak, er den distale enden av kateteret kobles til en kalibrert trykkmåleomformer. Kateteret kan bli plassert i en beskyttende våren som er koblet til en svivel å tillate fri bevegelse av dyr, eller festet til en knapp oganistisk implantert til dyret. Inneliggende katetre har fordelen av å minimere den langsiktige belastningen på dyret 17,18. I tillegg materialene er billig, er kalibrering enkelt for press tiltak og kontinuerlig langsiktige tiltak kan fås under forhold med relativt lavt stress for mange uker 19. Vi ville være sannferdig om vi ikke nevne at det finnes ulemper til denne teknikken, blant annet, er det en kirurgisk invasiv teknikk, er vedlikehold av kateteret som kreves for å opprettholde patency, skade arterien grunn av implantasjon av kateteret og potensial av smitte for å nevne noen.
For kroniske tiltak av blodtrykket direkte opptak fra kronisk-implantert arteriell katetre er mer teknisk utfordrende, men er mer nøyaktig og kan gjøres fortløpende uten å forstyrre dyret. Tail-cuff målingene er mindre nøyaktige, men de ikke krever kirurgi og kan også gjentaed. Tail-cuff metoder krever håndtering samt oppvarming av dyret å strekke halen fartøyene til rette for påvisning av pulsen 20. Håndtering og den ekstra varmen stress kan påvirke blodtrykket målinger, og dermed ikke å gi helt nøyaktige mål. Dessuten gjør den ikke-direkte tail-cuff metoden ikke tillater lett samtidig blodprøvetaking eller narkotika administrasjon.
En ekstra metoden som direkte mål kan oppnås er å bruke telemetrisk metodikk. Telemetri muliggjør høykvalitets opptak av blodtrykk (og andre tiltak) kontinuerlig i lange perioder i bevisst fritt bevegelige dyr uten tvang eller anestetika 18 år. Men, telemetri enheter mens ideelle er svært kostbare. Sammenlignet med telemetri, kateterisering fordeler inkluderer: redusert "setup" og operasjonelle kostnader, muligheten til å lett administrere medisiner og enkelt ta blodprøver i bevisst fritt bevegelige dyr. Den administration av legemidler og stoffer, og innhenting av blodprøver fra forskningen dyret kan gjøres mens minimalt forstyrrende dyret, og dermed minimere stress til dyret og åpner for et mer nøyaktig mål.
The authors have nothing to disclose.
Forfatterne ønsker å erkjenne Dr. Andrew King, PhD og Katrina King for bidraget av illustrasjonene. NIH stipend: R00HL087927.
Name | Tipo | Company | Catalog Number |
Arterial Catheter | Consumable | SAI Infusion | RFA-01 |
Venous Catheter | Consumable | Scientific Commodities, Inc. | BB518-20 & BB31785-V/2 |
27g 1/2″ Blunt Needle | Equipment | Integrated Dispensing Solutions, Inc. | 9991113 |
23g 1/2″ Blunt Needle | Equipment | Integrated Dispensing Solutions, Inc. | 9991109 |
PowerLab/8SP | Equipment | ADInstruments | ML765 |
Quad Bridge | Equipment | ADInstruments | ML118 |
LabChart 7.2 | Software | ADInstruments | |
BP Transducer with stopcock & Cable | Equipment | ADInstruments | MLT844 |
Single Channel Swivel | Equipment | Instech | 375/22PS |
Single Axis-Counter Balance Swivel Mount | Equipment | Instech | CM375BP |
Covance Infusion Harness | Equipment | Instech | CIH105 |
Table Top Isoflurane Anesthesia Unit | Equipment | Protech International, Inc. | 61020 |
Rodent Anesthesia Mask | Equipment | Protech International, Inc. | RAM-02 |
Rodent Induction Chamber | Equipment | Protech International, Inc. | RIC-01 |
Anesthesia Gas Filter Canister | Equipment | Protech International, Inc. | 80120 |
Tabletop Laminar Flow Hood | Equipment | Sentry Air Systems, Inc. | SS-200-WSL |
Oster Golden A5 | Equipment | Oster Professional Products | 78005-140 |
Fiber Optic Light with Dual Gooseneck Guide | Equipment | LW Scientific, Inc. | ILL-1502-DGG1 |
Deltaphase Isothermal Pad | Equipment | BrainTree Scientific | 39DP |
Cotton-Tipped Applicators | Consumable | Solon Manufacturing Company | 36200 |
Gauze Sponges 2″x2″ | Consumable | Kendall Curity | 2146 |
5-0 Nylon Suture | Consumable | Ethicon | 661G |
4-0 Silk Suture | Consumable | Deknatel | 8-S, 136075-0208 |
Tissue Adhesive | Consumable | 3M | 1469SB |
Splinter & Fixation Forceps | Equipment | George Tiemann & Company | 160-55 |
Student Tissue Forceps | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 91121-12 |
Micro Forceps/Bracken Forceps | Equipment | George Tiemann & Company | 10-1942 |
Extra Fine Graefe Forceps | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 11152-10 |
Olsen-Hegar Needle Holder | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 12002-12 |
Student Halsted-Mosquito Hemostat | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 91308-12 |
Rochester Pean Forcep | Equipment | Biomedical Research Instruments, Inc. | 31-1640 |
Student Surgical Scissors | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 91402-12 |
Dumont Forceps | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 11251-35 |
Micro Dissecting Scissors | Equipment | George Tiemann & Company | 160-210 |
Strabismus Scissors | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 14075-11 |
Hartman Hemostat | Equipment | Fine Science Tools, Inc. | 13003-10 |
Tissue Scissors | Equipment | George Tiemann & Company | 160-150 |
Retractor | Equipment | Custom Made |