Summary

Быстрое определение тепловых Ноцицептивная порога в диабетических крыс

Published: May 17, 2012
doi:

Summary

Здесь мы рассмотрим быстрый надежный и простой процедурой, чтобы определить самую низкую температуру, при которой крыс или мышей показывают nocifensive поведения,<em> Т.е.</em><em> Ноцицептивных тепловой порог</em> (ТНТ). Этот метод применяется медленно растущих тепловых стимулов позволяет точную и воспроизводимую оценку ТНТ с минимальным, если таковые имеются, стресс для животных.

Abstract

Болезненные диабетической нейропатии (PDN) характеризуется гипералгезии т.е. повышенная чувствительность к болевые раздражители, а аллодиния например, повышенная чувствительность к обычно безобидные раздражители 1. Гипералгезии и аллодиния изучались в различных моделях грызунов больных сахарным диабетом 2. Однако, как заявил Bölcskei и др., определение "боль" на животных моделях, является сложной задачей в связи с его субъективный характер 3. Кроме того, традиционные методы используются для определения поведенческих реакций на вредное термические раздражители обычно не хватает воспроизводимости и фармакологическая 3 чувствительности. Например, с помощью горячей пластины методом Ankier 4, вздрагивать, изъятие и / или лизать либо задних и / или передних лапах количественно, как рефлекс задержки при постоянной высокой тепловой раздражитель (52-55 ° С). Тем не менее, животные, которые hyperalgesic тепловой стимул не воспроизводимо показать различия в повторнойгибкого использования этих задержек выше пороговой температуры 3,5. Как недавно описанный метод Bölcskei соавт. 6 процедур, описанных здесь, позволяет оперативно, чувствительной и воспроизводимое определение тепловых ноцицептивных пороги (ТНТ) у мышей и крыс. Метод использует медленно растущих тепловой раздражитель главным образом на кожу мышей / крыс подошвенной поверхности. Этот метод особенно чувствительны к изучению анти-ноцицепции в hyperalgesic государств, таких как PDN. Процедуры, описанные ниже, основаны на тех, опубликованной в деталях Almasi и др. 5 и Bölcskei и др. 3. Процедуры, описанные здесь, были одобрены Уход лабораторных животных и использования комитета (LACUC), Государственный университет Райта.

Protocol

ТНТ мышей и крыс, определяются с помощью дополнительных плитке обезболивания метр [iHPAM, МСДИ Инк науки о жизни (Woodland Hills, Калифорния)]. Оборудование состоит из нескольких компонентов: алюминиевая пластина (10 х 20 см) с системой отопления и под камерой наблюдения оргстекла выше; тепло управл…

Discussion

Как и в классическом горячей пластины теста количественно тепловой гипералгезии 4,13, анализ ноцицепции описанный здесь позволяет быстрый и надежный способ количественной nocifensive поведение у крыс и мышей. Однако, в отличие от классического теста, дополнительные горячие пластины м?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Эта работа финансировалась Американской Диабетической Ассоциации (ADA), Грант JF1-10-14 (MDiF). Мы хотели бы поблагодарить сотрудников лаборатории животноводства в WSU. Авторы выражают благодарность помощи статистического анализа данных Нил Патон, к.т.н.

Materials

Name Company Catalogue number
Incremental Hot-Plate Analgesia Meter IITC Inc. Life Science Part #PE34
Soft Series 8 IITC Inc. Life Science Part # Series8
Streptozotocin Calbiochem 572201

Riferimenti

  1. Baron, R. Peripheral neuropathic pain: From mechanisms to symptoms. Clin. J. Pain. 16, S12-S20 (2000).
  2. Calcutt, N. A., Jorge, M. C., Yaksh, T. L., Chaplan, S. R. Tactile allodynia and formalin hyperalgesia in streptozotocin-diabetic rats: Effects of insulin, aldose reductase inhibition and lidocaine. Pain. 68, 293-299 (1996).
  3. Bolcskei, K., Petho, G., Szolcsanyi, J. Noxious heat threshold measured with slowly increasing temperatures: Novel rat thermal hyperalgesia models. Methods Mol. Biol. 617, 57-66 (2010).
  4. Ankier, S. I. New hot plate tests to quantify antinociceptive and narcotic antagonist activities. Eur. J. Pharmacol. 27, 1-4 (1974).
  5. Almasi, R., Petho, G., Bolcskei, K., Szolcsanyi, J. Effect of resiniferatoxin on the noxious heat threshold temperature in the rat: A novel heat allodynia model sensitive to analgesics. Br. J. Pharmacol. 139, 49-58 (2003).
  6. Bolcskei, K., Horvath, D., Szolcsanyi, J., Petho, G. Heat injury-induced drop of the noxious heat threshold measured with an increasing-temperature water bath: A novel rat thermal hyperalgesia model. Eur. J. Pharmacol. 564, 80-87 (2007).
  7. Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive. Neurosci. Biobehav. Rev. 26, 907-923 (2002).
  8. Langford, D. J., Crager, S. E., Shehzad, Z., Smith, S. B., Sotocinal, S. G., Levenstadt, J. S., Chanda, M. L., Levitin, D. J., Mogil, J. S. Social modulation of pain as evidence for empathy in mice. Science. 312, 1967-1970 (2006).
  9. Hunt, S. P., Koltzenburg, M. . The neurobiology of pain. , (2005).
  10. Willis, W. D. . The pain system : The neural basis of nociceptive transmission in the mammalian nervous system. , (1985).
  11. Calcutt, N. . Modeling diabetic sensory neuropathy in rats. In: Methods in molecular medicine. Pain research: Methods and protocols. , (2004).
  12. Bars, D. L. e., Gozariu, M., Cadden, S. W. Animal models of nociception. Pharmacol. Rev. 53, 597-652 (2001).
  13. Shaikh, A. S., Somani, R. S. Animal models and biomarkers of neuropathy in diabetic rodents. Indian J. Pharmacol. 42, 129-134 (2010).
  14. Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32, 77-88 (1988).
  15. Hardy, J. D. Method for the rapid measurement of skin temperature during exposure to intense thermal radiation. J. Appl. Physiol. 5, 559-566 (1953).
  16. Sumino, R., Dubner, R., Starkman, S. Responses of small myelinated &quot;warm&quot; fibers to noxious heat stimuli applied to the monkey’s face. Brain Res. 62, 260-263 (1973).
  17. Hammond, D. L., Ruda, M. A. Developmental alterations in thermal nociceptive threshold and the distribution of immunoreactive calcitonin gene-related peptide and substance p after neonatal administration of capsaicin in the rat. Neurosci. Lett. 97, 57-62 (1989).

Play Video

Citazione di questo articolo
Alshahrani, S., Fernandez-Conti, F., Araujo, A., DiFulvio, M. Rapid Determination of the Thermal Nociceptive Threshold in Diabetic Rats. J. Vis. Exp. (63), e3785, doi:10.3791/3785 (2012).

View Video