El uso de la cistometría en pequeños roedores: un estudio de la vejiga chemosensation
Summary
Cystometry es una técnica eficaz para medir la función de la vejiga de animales pequeños<em> In vivo</em>. La vejiga se infundió continuamente a velocidades controladas a través de un catéter intravesical, mientras que la uretra se deja libre para la micción. Esto permite repetitivo de llenado y vaciado de la vejiga, mientras que la presión intravesical y volumen evacuado se registran.
Abstract
<p class="jove_content"> Las tracto urinario inferior (LUT) funciona como un depósito dinámico que es capaz de almacenar la orina y para expulsar eficientemente que en un momento conveniente. Mientras que el almacenamiento de orina, sin embargo, la vejiga está expuesto durante períodos prolongados a los productos de desecho. Al actuar como una barrera apretado, el revestimiento epitelial de la LUT, el urotelio, evita la re-absorción de sustancias nocivas. Además, los productos químicos nocivos estimular inervación nociceptiva de la vejiga e iniciar la micción contracciones que expulsan los contenidos de la vejiga. Curiosamente, la sensibilidad de la vejiga para los productos químicos nocivos se ha utilizado con éxito en la práctica clínica, por vía intravesical infusión de la capsaicina TRPV1 agonista para tratar la hiperactividad de la vejiga neurogénica<sup> 1</sup>. Esto pone de relieve la ventaja de ver la vejiga como un órgano quimiosensorial y solicita investigación clínica adicional. Sin embargo, las cuestiones éticas limitan seriamente las posibilidades de llevar a cabo, en el ser humano, las mediciones invasivas que son necesarios para desentrañar las bases moleculares de la farmacología clínica LUT. Una manera de superar esta limitación es el uso de varios modelos animales<sup> 2</sup>. Aquí se describe la aplicación de la cistometría en ratas y ratones, una técnica que permite la medición de la presión intravesical en condiciones de perfusión vejiga controlada.</p><p class="jove_content"> Después de la laparotomía, un catéter se implanta en la cúpula de la vejiga y subcutáneamente en la región interescapular. A continuación, la vejiga puede ser llenado a una velocidad controlada, mientras que la uretra se deja libre para la micción. Durante los ciclos repetitivos de llenado y vaciado, la presión intravesical se puede medir a través del catéter implantado. Como tal, los cambios de presión pueden ser cuantificados y analizados. Además, la medición simultánea del volumen miccional permite distinguir contracciones de vaciado de no miccionales contracciones<sup> 3</sup>.</p><p class="jove_content"> Es importante destacar que, debido a las diferencias en el control de la micción entre roedores y humanos, las mediciones cistométricos en estos animales tienen sólo un valor limitado traslacional<sup> 4</sup>. Sin embargo, son bastante instrumental en el estudio de la fisiopatología de la vejiga y de la farmacología experimental en pre-clínicos configuración. Investigaciones recientes utilizando esta técnica ha puesto de manifiesto el papel clave de los nuevos jugadores moleculares en las propiedades mecano-y quimio-sensoriales de la vejiga.</p>
Protocol
1. Animales de Laboratorio Los animales (ratones, ratas) están alojados en una instalación de animales especializada con un 12-horas de luz-oscuridad ciclo y el acceso ad libitum al agua y pastillas estándar de alimentos. Tanto la edad y el sexo de los animales son parámetros importantes que deben ser estandarizados de acuerdo con las necesidades. Nos suelen realizar cistometría en 10 a 12 semanas de edad, las hembras 5,6. Todos los experimentos con animales se realicen de c…
Discussion
La técnica de la cistometría aquí se presenta permite realizar mediciones in vivo de la función vesical en modelos animales. Las ratas son probablemente el modelo animal más utilizado. Los ratones son más difíciles de manejar, pero ofrecen la ventaja de la utilización de animales manipulados genéticamente. Debido a la dificultad técnica de la utilización de ratones conscientes, que tienden a ser muy activo dando como resultado el aflojamiento del catéter implantado y los cambios en las presiones int…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por subvenciones del Gobierno federal belga (IUAP P6/28), la Fundación de Investigación de Flandes (FWO) (G.0565.07 y G.0686.09), la Astellas European Foundation Award 2009 y el Consejo de Investigación de la KU Leuven (GOA 2009/07, EF/95/010 y PFV/10/006). PU y NOSOTROS somos los estudiantes de doctorado de la Fundación de Investigación de Flandes (FWO). MB es una beca Marie Curie. DDR un compañero fundamental-clínica de la FWO.
Materials
| Name of the reagent | Commercial name, company, | Catalogue number | Comments |
| urethane | Urethane, Sigma-Aldrich | 315419 | group 2B carcinogen |
| isoflurane | Isoba, Schering-Plough Animal Health | ||
| polyethylene catheter | Intramedic Polyethylene tubing PE50, Becton Dickinson | 427411 | |
| surgical microscope | Op-Mi 6, Carl Zeiss | Op-Mi 6 | |
| purse-string suture | Prolene 6/0, Ethicon | 8610H | |
| fascia and skin suture | Ethilon 4/0 or 5/0, Ethicon | 662G or 661G | |
| postoperative analgesics | Temgesic, Schering-Plough Animal Health | dosage for rats: 0.05 mg/kg | |
| amplifier | 78534c monitor, Hewlett Packard | ||
| analytical balances and balance data acquisition software | FZ 300i, A&D | FZ-300i | |
| infusion pumps | pump 33, Harvard apparatus | HA33 | |
| cystometry recording system | Dataq instruments, DI-730 series and Windaq/Lite | DI-730-USB Windaq/Lite | |
| temperature registration | Fluke 52 KJ thermometer | 52 KJ | |
| pressure transducers | Edwards Lifesciences, pressure monitoring set | T322247A |
Riferimenti
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Citazione di questo articolo
Uvin, P., Everaerts, W., Pinto, S., Alpízar, Y. A., Boudes, M., Gevaert, T., Voets, T., Nilius, B., Talavera, K., De Ridder, D. The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation. J. Vis. Exp. (66), e3869, doi:10.3791/3869 (2012).