والفئران مغلقة الصدر نموذج نقص التروية القلبية وإعادة إشباع الخلايا
Summary
صدمة جراحية يدفع استجابة التهابية. ومن المعروف السيتوكينات ويغاندس الذاتية لتعديل حجم عضلة القلب بعد احتشاء الإسكيمية وضخه. نحن تقديم تعديل المغلقة الصدر نموذج من نقص التروية الفئران وضخه باستخدام أوزان شنقا للحد من آثار بضع الصدر.
Abstract
صدمة جراحية بواسطة بضع الصدر في صدره المفتوح نماذج من ربط الشرايين التاجية يدفع استجابة مناعية الذي يعدل الآليات المختلفة المشاركة في نقص التروية وضخه. استجابة جهاز المناعة ويشمل التعبير خلوى وإطلاق أو إفراز يغاندس الذاتية للمستقبلات المناعة الفطرية. ويمكن تنشيط المناعة الفطرية تعدل يحتمل حجم احتشاء. عدلت نحن موجود الفئران المغلقة الصدر نموذج باستخدام الأوزان المعلقة التي يمكن أن تكون مفيدة لدراسة عضلة القلب قبل وpostconditioning ودور المناعة الفطرية في نقص تروية عضلة القلب وضخه. هذا النموذج يسمح للحيوانات على التعافي من الصدمات الجراحية قبل ظهور نقص تروية عضلة القلب.
وقد تم تخدير متقلبة درس بشكل مكثف وكما هو معروف جيدا تأثيرها شروط مسبقة لنقص تروية القلب. ومع ذلك، هذا التأثير الوقائي يحول دون استخدامها في نماذج الصدر المفتوح للربط الشريان التاجي. وبالتالي، يمكن أن تكون ميزة أخرى لاستخدام اله التخدير المتطايرة يمكن السيطرة عليها بشكل جيد لأجهزة القياس في نموذج مغلقة الصدر المزمنة، منذ تأثيرها شروط مسبقة تستغرق ما يصل الى 72 ساعة. أمراض القلب المزمنة مع نقص التروية متقطعة ونماذج متعددة من التطبيقات ضربة محتملة أخرى من هذا الطراز.
لنموذج مغلقة الصدر المزمنة، والفئران، ومدخل أنبوب التهوية الخضوع لبضع الصدر الجانبي حادة عبر الفضاء وربي 4. يتم تمرير تحديد التالية من اليسار الأمامي النازل رباط تحت السفينة وهي الخيوط طرفي الخيط من خلال occluder. ثم، يتم تمرير طرفي الخيط من خلال جدار الصدر، معقود على شكل حلقة وغادرت في النسيج تحت الجلد. بعد إغلاق الصدر وانتعاش لمدة 5 أيام، هي تخدير الفئران مرة أخرى، يتم فتح الصدر والجلد ومدمن مخدرات شنقا أوزان تصل إلى حلقة تحت مراقبة تخطيط القلب.
في نهاية البروتوكول نقص التروية / ضخه، ويمكن ملطخة قلوب مع TTC لاحتشاءتقدير حجم أو الخضوع لتثبيت نضح للسماح للدراسات المورفومترية بالإضافة إلى الأنسجة والمناعية.
Protocol
Discussion
عدلت لدينا الفئران المغلقة الصدر نموذج عن طريق الوصول إلى قلب من خلال بضع الصدر اليسار وربي الجانبية والتي تؤدي للخروج من الغرز LAD في الصدر في خط منتصف الترقوة اليسرى. وسوف يغادر القفص الصدري عظمي سليم تقليل الصدمات النفسية، وبحاجة لعلاج الألم، وعدوى موقع الجراحية، ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نشكر دانيال Duerr لتقديم المشورة له فيما يتعلق نضح-تثبيت تقنية.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
| Microscope | Leica | M80 |
| Light source | Schott | KL 1500 LCD |
| Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
| MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
| 8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
| 6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
| Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
| Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
| Phthalo blue | Heucotech LTD | |
| PowerLab | ADInstruments |
Riferimenti
- Lim, S. Y., Davidson, S. M., Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. Preconditioning and postconditioning: the essential role of the mitochondrial permeability transition pore. Cardiovasc. Res. 75, 530-535 (2007).
- Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. Use of a Hanging Weight System for Coronary Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (50), e2526 (2011).
- Michael, L. H. Myocardial infarction and remodeling in mice: effect of reperfusion. Am. J. Physiol. 277, H660-H668 (1999).
- Nossuli, T. O. A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies 52. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 278, H1049-H1055 (2000).
- Irwin, M. W. Tissue expression and immunolocalization of tumor necrosis factor-alpha in postinfarction dysfunctional myocardium 846. Circulation. 99, 1492-1498 (1999).
- Michael, L. H. Creatine kinase and phosphorylase in cardiac lymph: coronary occlusion and reperfusion. Am. J. Physiol. 248, 350-359 (1985).
- Tonkovic-Capin, M. Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels 765. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, H61-H68 (2002).
- Tsutsumi, Y. M. Role of caveolin-3 and glucose transporter-4 in isoflurane-induced delayed cardiac protection. Anesthesiology. 112, 1136-1145 (2010).
- Benedict, P. E., Benedict, M. B., Su, T. P., Bolling, S. F. Opiate drugs and delta-receptor-mediated myocardial protection. Circulation. 100, II357-II360 (1999).
- Ren, X., Wang, Y., Jones, W. K. TNF-alpha is required for late ischemic preconditioning but not for remote preconditioning of trauma. J. Surg. Res. 121, 120-129 (2004).
- Andrassy, M. High-mobility group box-1 in ischemia-reperfusion injury of the heart. Circulation. 117, 3216-3226 (2008).
- Kim, S. C. Extracellular heat shock protein 60, cardiac myocytes, and apoptosis. Circ. Res. 105, 1186-1195 (2009).
- Lin, L. HSP60 in heart failure: abnormal distribution and role in cardiac myocyte apoptosis. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 293, 2238-2247 (2007).
