闭胸鼠心肌缺血再灌注模型
Summary
手术创伤引起的炎症反应。被称为细胞因子和内源性配体调节缺血再灌注后心肌梗死面积。我们提出了小鼠缺血及使用吊重的再灌注，以减少开胸手术的效果修改封闭胸部模型。
Abstract
开胸冠状动脉结扎模型开胸手术创伤修改不同的机制参与缺血再灌注诱导的免疫反应。免疫反应包括细胞因子的表达和释放或分泌的内源性配体的先天免疫受体。先天免疫系统的激活可能调节心肌梗死面积。我们已经修改现有的小鼠封闭胸部模型，使用吊重研究心肌预处理和后处理和先天免疫在心肌缺血再灌注损伤中的作用，这可能是有用的。这种模式使动物心肌缺血的发作前从手术创伤恢复。
挥发性麻醉药已激烈的研究和预处理缺血心脏的影响是众所周知的。然而，这种保护作用排除在开胸冠状动脉结扎模型，它的使用。因此，另一个优势是次使用Ë以及可控的挥发性麻醉药仪器在慢性闭胸模型，因为他们的预处理效果持续长达72小时。慢性心脏疾病，间歇性缺血，多打款是这种模式的其他可能的应用。
为慢性闭胸模型，气管插管和通风的小鼠接受外侧钝通过的第4肋间开胸。继左前降连字前的鉴定，通过下面的船只都缝合两端螺纹通过封堵。然后，两个缝合两端都通过胸壁，打结，形成一个循环，并留在皮下组织。胸部关闭和恢复为5天之后，老鼠再次麻醉，胸部皮肤被重新吊重迷上了心电图控制下的循环。
在缺血/再灌注协议结束时，心中可以与TTC染色的梗塞大小评估或进行灌注固定，允许除了组织学和免疫组化形态的研究。
Protocol
1。麻醉诱导异氟醚诱导，鼠标放到感应框，它是连接到蒸汽集到3.0％和0.5 L / min的氧流量。 无意识与触觉的刺激，未能诱发反应和前肢或后肢踏板撤回反射缺席实现后，放置在一个温度控制的手术台鼠标在仰卧位。鼻锥通过感应框连接到蒸汽维持麻醉。放倒头固定用5-0尼龙线的上门牙，以方便插管。 插入直肠温度探头的身体核心温度保持在37°C。用胶带固定四肢。越过较低?…
Discussion
我们已经修改通过访问通过左侧肋间开胸的心脏和领导法援署缝线，在左锁骨中线胸部封闭胸小鼠模型。保持骨左肋不变，将最大限度地减少创伤，需要止痛药物，外科手术部位感染，从而，促进恢复。通过保留左动脉内部哺乳动物有没有电灼需要。我们离开以后方便缝合皮下组织循环及使用吊重系统定义的闭塞。胸外模型使心肌缺血再灌注的所有研究方案的应用与手术创伤和随后的免疫反应<sup…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢丹尼尔迪埃尔灌注固定技术为他的意见。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
| Microscope | Leica | M80 |
| Light source | Schott | KL 1500 LCD |
| Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
| MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
| 8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
| 6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
| Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
| Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
| Phthalo blue | Heucotech LTD | |
| PowerLab | ADInstruments |
Riferimenti
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Murine Closed-chest ModelMyocardial IschemiaReperfusionSurgical TraumaThoracotomyImmune ResponseCytokine ExpressionEndogenous LigandsInnate ImmunityInfarct SizeMyocardial Pre- And PostconditioningHanging WeightsVolatile AnestheticsPreconditioning EffectChronic Closed-chest ModelIntermittent IschemiaMultiple Hit ModelsIntubated MiceVentilated MiceLateral Blunt ThoracotomyLeft Anterior Descending Ligation
Citazione di questo articolo
Kim, S., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., Baumgarten, G. A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion. J. Vis. Exp. (65), e3896, doi:10.3791/3896 (2012).