Summary

심근 국소 빈혈 및 Reperfusion의 Murine 폐쇄 가슴 모델

Published: July 17, 2012
doi:

Summary

외과 외상은 염증 반응을 유도합니다. 크린 시토킨 및 내생 리간드는 국소 빈혈과 reperfusion에 따라 심근 경색 크기를 조절하는 것으로 알려져 있습니다. 우리는 thoracotomy의 영향을 최소화하기 위해 매달려 가중치를 사용하여 murine 국소 빈혈과 reperfusion의 수정된 폐쇄 가슴 모델을 제시.

Abstract

관상 동맥 내고의 열린 가슴 모델 thoracotomy 의한 외과 외상은 국소 빈혈과 reperfusion에 관련된 다양한 메커니즘을 수정하는 면역 반응을 유도합니다. 면역 반응은 시토킨 표현과 타고난 면역 수용체의 내생 리간드의 릴리스 또는 분비를 포함합니다. 타고난 면역의 활성화 가능성이 경색 크기를 조절하실 수 있습니다. 우리는 심근 사전 및 postconditioning 및 심근 국소 빈혈과 reperfusion에 타고난 면역의 역할을 연구에 유용 될 수 매달려 가중치를 사용하여 기존의 murine 폐쇄 가슴 모델을 수정했습니다. 이 모델은 동물 심근 국소 빈혈의 발병 이전에 수술 상처로부터 복구 할 수 있습니다.

휘발성 anesthetics은 강렬한 연구되었으며 허혈성 심장에 대한 그들의 preconditioning 효과가 잘 알려져있다. 그러나이 보호 효과는 관상 동맥 내고의 열린 가슴 모델 년에 사용하는 걸로. 따라서 다른 이점은 일의 사용이 될 수도만성 폐쇄 가슴이 모델의 계측을위한 전자 제어 아니라 휘발성 anesthetics, 그들의 preconditioning 효과가 72 시간까지 지속하고 있기 때문입니다. 일시적 국소 빈혈과 여러 히트 모델 만성 심장 질환이 모델의 다른 가능한 응용 프로그램입니다.

만성 폐쇄 가슴 모델의 경우 intubated하고 통풍이 마우스는 4 늑간 공간을 통해 가로 무딘 thoracotomy을 받고있다. 끈 내림차순 왼쪽 앞부분에 따라 신분이 그릇 아래에 전달되는 두 봉합 종료는 occluder를 통해 스레드됩니다. 그런 다음, 두 봉합 종료는 루프를 형성 매듭이 가슴 벽, 통과 및 피하 조직에 남아 있습니다. 가슴 폐쇄와 5 일 동안 복구 후 생쥐가 다시 anesthetized이며, 가슴 피부가 재개되고 매달려 가중치는 ECG 통제 루프에 매여있다.

국소 빈혈 / reperfusion 프로토콜의 끝에서 마음이 경색에 대한 TTC 물들일 수사이즈 평가 또는 조직학 및 immunohistochemistry에 추가 morphometric 연구를 허용하도록 관류 고정을 받고있다.

Protocol

1. 아나스타샤의 유도 isoflurane과 유도의 경우, 3.0 권 % 및 0.5 L / 분 산소의 흐름에 증기 세트에 연결되어 유도 상자에 마우스를 놓습니다. 무의식은 응답 및 부재되는 forelimb 또는 hindlimb 페달 탈퇴 반사를 유발시키지 못하는 촉각 자극으로 달성되면, 위로 향한 자세로 온도 제어 운영 테이블에 마우스를 놓습니다. 유도 상자를 통해 증기에 연결된 비강 원추형을 통해 마취를 유지합?…

Discussion

우리는 왼쪽 측면 늑간 thoracotomy를 통해 마음을 액세스하고 왼쪽 midclavicular 라인의 가슴에 그 소년의 봉합을 선도하여 murine 폐쇄 가슴 모델을 수정했습니다. 뼈다귀 흉곽을 그대로두면, 외상을 최소화하므로 진통제, 외과 사이트 감염에 필요한, ​​회복을 촉진합니다. 왼쪽 내부 포유류 동맥을 보존함으로써 electrocautery에 대한 필요가 없습니다. 우리는 나중에 쉽게 액세스할 수 피하 조직의 봉합…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

우리는 관류 – 고정 기법에 관한 그의 조언 다니엘 Duerr 감사드립니다.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number
Vapor Drägerwerk AG Isoflo
Microscope Leica M80
Light source Schott KL 1500 LCD
Homeothermic Blanket Control Unit Harvard Apparatus  
MiniVent Type 845 Hugo Sachs Elektronik  
8-0 Prolene Ethicon BV130-5 6.5mm 3/8c
6-0 Prolene Ethicon BV-1 9.3 mm 3/8c
Kalt suture needle size 3 FST 12050-03
Triphenyltetrazolium Sigma Aldrich 93145
Phthalo blue Heucotech LTD  
PowerLab ADInstruments  

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Citazione di questo articolo
Kim, S., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., Baumgarten, G. A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion. J. Vis. Exp. (65), e3896, doi:10.3791/3896 (2012).

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