Мышиной груди Закрытые модели ишемии миокарда и реперфузии
Summary
Хирургическая травма вызывает воспалительную реакцию. Цитокины и эндогенных лигандов, как известно, модулировать инфаркт миокарда размер после ишемии и реперфузии. Мы представляем изменение закрытой грудью модели мышей ишемии и реперфузии использованием висит весов, чтобы минимизировать последствия торакотомии.
Abstract
Хирургические травмы на торакотомия в открытой грудной модели перевязки коронарной вызывает иммунный ответ, который изменяет различные механизмы, задействованные при ишемии и реперфузии. Иммунный ответ включает в себя выражение цитокинов и освобождение или секреции эндогенных лигандов рецепторов врожденного иммунитета. Активация врожденного иммунитета потенциально может модулировать размер инфаркта. Мы модифицировали существующие мышиных закрытой грудью модели с использованием подвесной весов, которые могут быть полезны для изучения миокарда до и посткондиционирования и роли врожденного иммунитета при ишемии миокарда и реперфузии. Эта модель позволяет животным, чтобы оправиться от хирургической травмы до начала ишемии миокарда.
Летучие анестетики были интенсивно изучается и их предварительной эффект для ишемической болезни сердца, хорошо известно. Однако это защитное действие исключает его использования в открытой модели грудь перевязки коронарной артерии. Таким образом, еще одним преимуществом может стать использование йхорошо управляемый электронной летучих анестетиков для приборов в хроническую закрытой груди модели, так как их предварительной эффект длится до 72 часов. Хронические заболевания сердца с прерывистой ишемии и несколько моделей хитом и другие возможные применения этой модели.
Для хронического закрытой груди модели, интубации и вентиляции мышей пройти боковой тупой торакотомия через 4 межреберье. После идентификации левой передней нисходящей лигатура проходит под судном и оба шва концы пропускаются через окклюдера. Тогда, как шов концы пропускаются через стенку грудной клетки, узлами, образуя петлю и оставил в подкожной клетчатке. После закрытия груди и восстановление в течение 5 дней мышей вновь под наркозом, на груди кожа вновь и подвесных весов подключили к петле под контролем ЭКГ.
В конце ишемии / реперфузии протокол, сердца могут быть окрашены с ТТК на инфарктОценка размера или пройти перфузии фиксации, чтобы морфометрических исследований в дополнение к гистологии и иммуногистохимии.
Protocol
Discussion
Мы модифицировали мышиный закрытой грудью модель доступа к сердцу через левый боковой межреберная торакотомия и ведущие из ЛАД швы на груди в левой межключичный линии. Выход из костной грудной клетки нетронутыми позволит свести к минимуму травмы, потребность в обезболивающих лекарст…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Мы благодарим Даниэля Дюрр за его советы относительно перфузии фиксации техники.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
| Microscope | Leica | M80 |
| Light source | Schott | KL 1500 LCD |
| Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
| MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
| 8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
| 6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
| Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
| Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
| Phthalo blue | Heucotech LTD | |
| PowerLab | ADInstruments |
Riferimenti
- Lim, S. Y., Davidson, S. M., Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. Preconditioning and postconditioning: the essential role of the mitochondrial permeability transition pore. Cardiovasc. Res. 75, 530-535 (2007).
- Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. Use of a Hanging Weight System for Coronary Artery Occlusion in Mice. J. Vis. Exp. (50), e2526 (2011).
- Michael, L. H. Myocardial infarction and remodeling in mice: effect of reperfusion. Am. J. Physiol. 277, H660-H668 (1999).
- Nossuli, T. O. A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies 52. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 278, H1049-H1055 (2000).
- Irwin, M. W. Tissue expression and immunolocalization of tumor necrosis factor-alpha in postinfarction dysfunctional myocardium 846. Circulation. 99, 1492-1498 (1999).
- Michael, L. H. Creatine kinase and phosphorylase in cardiac lymph: coronary occlusion and reperfusion. Am. J. Physiol. 248, 350-359 (1985).
- Tonkovic-Capin, M. Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels 765. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, H61-H68 (2002).
- Tsutsumi, Y. M. Role of caveolin-3 and glucose transporter-4 in isoflurane-induced delayed cardiac protection. Anesthesiology. 112, 1136-1145 (2010).
- Benedict, P. E., Benedict, M. B., Su, T. P., Bolling, S. F. Opiate drugs and delta-receptor-mediated myocardial protection. Circulation. 100, II357-II360 (1999).
- Ren, X., Wang, Y., Jones, W. K. TNF-alpha is required for late ischemic preconditioning but not for remote preconditioning of trauma. J. Surg. Res. 121, 120-129 (2004).
- Andrassy, M. High-mobility group box-1 in ischemia-reperfusion injury of the heart. Circulation. 117, 3216-3226 (2008).
- Kim, S. C. Extracellular heat shock protein 60, cardiac myocytes, and apoptosis. Circ. Res. 105, 1186-1195 (2009).
- Lin, L. HSP60 in heart failure: abnormal distribution and role in cardiac myocyte apoptosis. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 293, 2238-2247 (2007).
