Un murino tórax cerrado modelo de isquemia y reperfusión miocárdica
Summary
El trauma quirúrgico induce una respuesta inflamatoria. Las citocinas y los ligandos endógenos se sabe que modulan el tamaño del infarto de miocardio después de la isquemia y la reperfusión. Se presenta una versión modificada de tórax cerrado, el modelo murino de isquemia y reperfusión con pesas colgantes para minimizar los efectos de la toracotomía.
Abstract
El trauma quirúrgico mediante toracotomía abierta en el pecho de los modelos de la ligadura coronaria induce una respuesta inmune que modifica diversos mecanismos implicados en la isquemia y la reperfusión. La respuesta inmune incluye la expresión de citoquinas y la liberación o la secreción de ligandos endógenos de los receptores inmunes innatas. La activación de la inmunidad innata potencialmente puede modular el tamaño del infarto. Hemos modificado una existente murino tórax cerrado, modelo de uso de pesas colgantes que pueden ser útiles para el estudio de miocardio previo y poscondicionamiento y el papel de la inmunidad innata en la isquemia y reperfusión miocárdica. Este modelo permite a los animales a recuperarse del trauma quirúrgico antes de la aparición de la isquemia miocárdica.
Los anestésicos volátiles han sido intensamente estudiados y su efecto de preacondicionamiento para la cardiopatía isquémica es bien conocida. Sin embargo, este efecto protector se opone a su uso en los modelos de tórax abierto de la ligadura de la arteria coronaria. Por lo tanto, otra ventaja podría ser el uso de THe anestésicos volátiles y controlables para la instrumentación de una enfermedad crónica a tórax cerrado el modelo, ya que su efecto de preacondicionamiento dura hasta 72 horas. Las enfermedades crónicas del corazón con isquemia intermitente y varios modelos afectados son otras posibles aplicaciones de este modelo.
Para la crónica a tórax cerrado el modelo, los ratones intubados y ventilados sometidos a una toracotomía lateral romo a través del cuarto espacio intercostal. Tras la identificación de la descendente anterior izquierda una ligadura se pasa por debajo de la embarcación y los dos extremos de la sutura se pasa a través de un dispositivo de oclusión. Entonces, ambos extremos de la sutura se pasa a través de la pared del pecho, anudado para formar un bucle y se deja en el tejido subcutáneo. Tras el cierre en el pecho y la recuperación por 5 días, los ratones se anestesiaron de nuevo, la piel del pecho se vuelve a abrir y los pesos que cuelgan están conectados al circuito bajo control ECG.
Al final del protocolo de isquemia / reperfusión, corazones pueden ser teñidas con TTC para infartotamaño de la evaluación o someterse a la fijación de la perfusión para permitir estudios morfométricos, además de la histología y la inmunohistoquímica.
Protocol
Discussion
Hemos modificado un ratón modelo de tórax cerrado, mediante el acceso al corazón a través de una toracotomía intercostal izquierda lateral y que lleva a cabo las suturas LAD en el pecho en la línea media clavicular izquierda. Saliendo de la caja torácica ósea intacta a minimizar el trauma, la necesidad de medicamentos para el dolor, infección del sitio quirúrgico y, por tanto, facilitar la recuperación. Al preservar la arteria izquierda mamífero interno no hay necesidad de electrocauterio. Salimos del bucle …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Damos las gracias a Daniel por su Duerr asesoramiento en materia de técnica de perfusión-fijación.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Vapor | Drägerwerk AG | Isoflo |
| Microscope | Leica | M80 |
| Light source | Schott | KL 1500 LCD |
| Homeothermic Blanket Control Unit | Harvard Apparatus | |
| MiniVent Type 845 | Hugo Sachs Elektronik | |
| 8-0 Prolene | Ethicon | BV130-5 6.5mm 3/8c |
| 6-0 Prolene | Ethicon | BV-1 9.3 mm 3/8c |
| Kalt suture needle size 3 | FST | 12050-03 |
| Triphenyltetrazolium | Sigma Aldrich | 93145 |
| Phthalo blue | Heucotech LTD | |
| PowerLab | ADInstruments |
Riferimenti
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