宿主植物の揮発性物質のスクリーニングツールとしてElectroantennographicバイオアッセイ
Summary
成人臍orangeworm（の電気生理学的応答の測定による急速に画面宿主植物揮発性物質の方法<em> Amyelois transitella</em>）electroantennographic分析を介して単一のコンポーネントとのブレンドにアンテナが実証されています。
Abstract
植物揮発性物質は、植物 – 昆虫の相互作用において重要な役割を果たしている。草食性の昆虫は、宿主植物を見つけるためにkairomonesとして知られている植物の揮発性物質を、使用しています。1,2宿主植物が害虫による重要な農業商品食害が農家に深刻な経済的損失を与えることがあるとき。したがって、kairomonesはルアーまたは混乱させるこれらの昆虫を、従って、昆虫制御のための農薬への環境に優しい代替を提供する誘引として使用することができます。3残念なことに、植物は季節に依存して排出量の組成物との比率を変化させた膨大な数の揮発性物質を放出することができます商品や一日の時間の。これは、揮発性成分の生物学的活性成分または混合物の識別困難なプロセスになります。宿主植物揮発性の排出量の生物活性成分を識別するために我々は、実験室ベースのスクリーニングアッセイelectroantennography（EAG）を採用しています。 EAGの評価およびrecorするための効果的なツールです。dの電気生理学的に彼らの触角の受容体を介して、昆虫の嗅覚応答。 EAGスクリーニングプロセスは、有望な生物活性成分を識別するためにテストされ揮発性物質の数を減らすことができます。しかし、EAGバイオアッセイは、受容体の活性化に関する情報を提供します。それは化合物が誘発する昆虫行動のタイプに関する情報を提供していません。行動反応の誘引、忌避剤または他のタイプのようになります。 EAGにより、大幅な応答を誘発する揮発性物質は、適切な陽性対照に比べて、一般的に害虫の行動反応の更なる試験へ取得されます。実験デザインは提示します詳細単一のコンポーネントとバイオアッセイをEAGによるコンポーネントの単純なブレンドに成人害虫へそorangeworm（Amyelois transitella）の電気生理学的触角応答の測定による4,5アーモンドベースのホスト植物の揮発性物質をスクリーニングするために採用の方法論。方法は2つの元を利用してcisedアンテナは "フォーク"電極ホルダーの両端に配置。ここで示したプロトコルでは、スクリーニングの揮発性のための迅速、高スループットの標準化手法を提案する。刺激レベルを標準化し、したがって、触角応答が相対chemoreceptivityを示すことができるようにするために、各揮発性のセット、一定量である。ネガティブコントロールは、パフの両方残留溶媒及び機械的な力への電気生理学的反応をなくすことができます。ポジティブコントロール（このインスタンスのアセトフェノンの）男性と女性のへそorangeworm（NOW）蛾から一貫した応答を誘発した単一化合物である。男性NOW蛾で一貫した応答を提供し、バイオアッセイ研究のために使用される追加セミオケミカル標準では（Z、Z）-11,13-hexdecadienal、女性生産さフェロモンからアルデヒド成分6-8です。
Protocol
Discussion
標的昆虫の化学受容応答を決定するためのバイオアッセイとして電図の記録を使用するには、ガスクロマトグラム（GC-EAD）からの流出の検出器としてEAGを活用した研究は文献に記載されていますかなり一般的であり、数多くのです。9,10方法が示され相対的反応性を確信して割り当ての高い複製の揮発性成分に相当する量の迅速なスクリーニングを提供します。それは我々が"スク?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
本研究では、USDA-ARS CRISプロジェクト5325から42000-037-00Dの下とCRADA 58-3K95-7から1198とTFCA 58-5325-8-419の結果と実施した。作者は感謝して技術支援のために（Z、Z）-11,13-hexadecadienal、生産的な議論のためのB.ヒグビー、およびJ.ベイカーの贈り物にSuterraを認める。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Acetophenone | Alfa-Aesar | A12727 | Female positive control |
| (Z,Z)-11,13-Hexadecadienal | Suterra | Male positive control | |
| α-Humulene | Aldrich | 53675 | Sesquiterpene |
| 2-Undecanone | Aldrich | U1303 | Fatty acid derivative |
| 2-Phenylethanol | Aldrich | 77861 | Benzenoid |
| Pentane | EMD | PX0167-1 | Solvent |
| 4-Channel acquisition controller | Syntech | IDAC-4 | |
| EAG probe, pre-amplifier | Syntech | Type PRG-2 | |
| Antenna holder | Syntech | For PRG-2 | Fork electrode |
| Stimulus controller | Syntech | CS-55 | Air flow and puffs |
| Spectra Electrode Gel | Parker | 12-02 | |
| Bioassay discs | Whatman | 2017-006 | 6 mm |
| Pasteur pipets | VWR | 14673-010 | 5 ¾” (14.6 cm) |
| Parafilm M | Bemis | PM-992 |
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