Un modello murino per la sclerosi laterale amiotrofica (SLA) è una valutazione clinica e comportamentale. Come prerequisito per un'analisi accompagnamento immunoistologico la preparazione del midollo spinale è raffigurato in dettaglio.
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Articolo metodologico
Test clinici e la rimozione del midollo spinale in un modello murino di sclerosi laterale amiotrofica (SLA)
In questo articolo
Sommario
Abstract
La sclerosi laterale amiotrofica (SLA) è una malattia neurodegenerativa letale con conseguente progressiva degenerazione dei motoneuroni. Il picco di insorgenza è di circa 60 anni per la malattia sporadica e circa 50 anni per la malattia familiare. Grazie al suo andamento progressivo, il 50% dei pazienti muore entro 30 mesi dall'inizio dei sintomi. Per valutare nuove opzioni di trattamento per questa malattia, modelli murini di SLA genetici sono stati generati sulla base umani mutazioni nel gene familiari SOD, come la (G93A) mutazione SOD1. Aspetti più importanti che devono essere valutati nel modello sono la sopravvivenza globale, decorso clinico e la funzione motoria. Qui, dimostriamo la valutazione clinica, mostrano la conduzione di due test del motore comportamentali e fornire sistemi di punteggio per tutti i parametri quantitativi. Poiché un'analisi approfondita del modello murino ALS di solito richiede un esame immunoistochimica del midollo spinale, abbiamo dimostrato la sua preparazione in dettaglio l'applicazione del farelaminectomia metodo rsal. Esemplari risultati istologici sono dimostrati. La completa applicazione dei metodi di esame descritti negli studi sul modello murino di SLA consentirà al ricercatore di verificare in modo affidabile per future opzioni terapeutiche che possono fornire una base per le sperimentazioni cliniche umane successive.
Protocollo
Gli animali sono stati acquistati da Jackson Laboratory (# 002.726) 1. Essi sono clinicamente segnato e sottoposto ad un test di funzionamento del motore (rotarod test) e della forza muscolare (appesa prova del filo). Tutti questi test e il successivo abbattimento degli animali al fine di preparare il midollo spinale sono stati eseguiti in accordo molto vicino alle linee guida locali per corretto svolgimento degli esperimenti sugli animali.
1. Punteggio clinico
Oltre alla verifica del peso corporeo per i topi vengono esaminati i segni di deficit motorio con il seguente sistema di quattro punti di punt....
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Discussione
Il (G93A) modello murino SOD1 genetico è un modello animale valido per studiare il corso della malattia del motoneurone perdita progressiva paragonabile umana sclerosi amiotrofica laterale 8. Una varietà di paradigmi di trattamenti diversi sono stati valutati in questo modello e rappresentano una base per la successiva prova in studi clinici umani 8-10. Per poter rilevare differenze significative in uno studio sperimentale di trattamento in questi topi, è di importanza eminente includere almeno 24 .......
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Dichiarazioni
Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.
Ringraziamenti
LT ha ricevuto sovvenzioni da parte del Forschungsförderungsprogramm della Medicina dell'Università di Göttingen. PL e MB sono stati sostenuti dal Centro di Ricerca per la DFG Fisiologia molecolare del cervello (CMPB), Göttingen. Gli autori ringraziano il Dott. Lars Tatenhorst per l'assistenza e la videografia con Birgit Liebau aiuto con audio e video editing.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Fabbricante | Informazioni per l'ordinazione | ||
| Test comportamentale | |||
| Rota-Rod per il Mice | Ugo Basile, Comerio, Italia | # 47600 | |
| Hanging dispositivo a filo | Su misura | ||
| Preparazione Spinal Cord | |||
| Operation Table Spia di funzionamento Guanti di protezione | |||
| "Iris" Forbici, angolato a lato | Strumenti Scienza Belle, Heidelberg, Germania | 14063-09 | |
| Cohan-Vännäs Forbici primavera, diritte | Strumenti Scienza Belle, Heidelberg, Germania | 15000-10 | |
| Micro pinza | Hammacher, Solingen, Germania | HWC 111-10 | |
| Scalpel "präzisa plus" | Dahlhausen, Köln, Germania | 11.000.00.510, figura 10 |
Riferimenti
- Gurney, M. E. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu, Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Weydt, P. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport.
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Ristampe e permessi
