过敏性气道炎症在肺树突状细胞的成熟和迁移分析
Summary
我们描述了一个战略，以监测肺部树突状细胞的成熟和迁移的卵在卵蛋白引起的过敏性气道炎症的设置。这种策略可以进行修改，以评估肺部树突状细胞的迁移，在感染的设置。
Abstract
树突状细胞（DC）的启动适应性免疫应答的抗原特异性T细胞激活的关键球员。区议会是目前在稳定状态下的外围组织，区议会，然而，在抗原刺激的反应，采取抗原，并迅速转移到淋巴结，他们开始对T细胞反应的抗原1,2。此外，区议会也起到了关键作用，在启动自身免疫性以及过敏免疫反应3。
区议会发挥了至关重要的作用，同时启动免疫反应和诱导耐受性肺环境设置4。肺癌环境主要是耐受性，由于置身于广大环境抗原5阵列。然而，在一些人有一个宽容的突破，从而导致过敏和哮喘的感应。在这项研究中，我们描述了一个战略，它可以用来监测气道DC成熟和米格在抗原致敏使用的口粮。气道DC成熟和迁移的测量，允许在气道过敏性炎症免疫反应动力学的评估，并协助随后沿与免疫反应的基本机制的了解程度。
我们的战略是基于对卵清蛋白作为增敏剂的使用。卵清蛋白诱发过敏性哮喘是一种广泛使用的模型，以重现气道嗜酸性粒细胞浸润，肺炎和升高的IgE水平在哮喘6,7。致敏后，小鼠滴鼻交付FITC标记的卵，它允许特定的标签气区议会其中吸收卵的挑战。接下来，使用多个DC特异性标志物，我们可以评估这些区议会的成熟，并采用流式细胞仪还可以评估其迁移到淋巴结。
Protocol
Discussion
这里介绍的方法提供了一个流式细胞仪分析肺区议会，上呼吸道挑战OVA-FITC标记的交付为基础的基础的做法。这允许选择性的肺区议会，占用OVA-FITC标记，因此直流人口，这是监测在OVA诱发的过敏性气道炎症过程，在呼吸道的免疫反应参与的有效的监测。在对照组，在过敏性气道炎症的情况下，的洄游区议会号码（卵-FITC标记+区议会）的肠系膜淋巴结中确定的指示直流迁移，基础利率而过敏性气道…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作是由CIHR和CF加拿大赠款博士吉姆胡锦涛和加拿大的CF拉胡尔Kushwah授予博士学位奖学金。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Ovalbumin | Sigma-Aldrich | A5503 |
| Alum | Thermo Scientific | 77161 |
| OVA-FITC | Sigma-Aldrich | A9771 |
| Collagenase D | Roche | 11088858001 |
| Antibodies | e-Bioscience |
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