アレルギー性気道炎症時の肺樹状細胞の成熟および移行の解析
Summary
我々は、オボアルブミン誘発アレルギー性気道炎症の設定でオボアルブミンに反応して肺樹状細胞の成熟と移行を監視するための戦略について説明します。この戦略は、感染の設定で肺樹状細胞の遊走を評価するために変更することができます。
Abstract
樹状細胞（DC）が抗原特異的T細胞を活性化することにより適応免疫応答の開始に関与する重要なプレーヤーである。 DCは、定常状態での末梢組織に存在していますが、抗原刺激に応答して、樹状細胞は、抗原を取り上げ、急速にそれらが抗原1,2に対するT細胞応答を開始する所属リンパ節に移行します。さらに、樹状細胞はまた、自己免疫などアレルギー性免疫応答3を開始するのに重要な役割を果たしている。
DCは、肺の環境4の設定に公差の免疫応答と誘導の両方の開始に重要な役割を果たしています。肺の環境では、環境抗原5の広大な配列への暴露により主に寛容です。ただし、一部の個体でアレルギーや喘息の誘発につながる耐性の休憩がある。本研究では、気道DCの成熟とMIGを監視するために使用することができます戦略を記述感作に用いた抗原に応答して配給。気道DCの成熟と移行の測定は、気道アレルギー性炎症時に免疫応答の動態の評価を可能にし、また根本的なメカニズムとともに、その後の免疫応答の大きさを理解する上で役立ちます。
我々の戦略は、増感剤としてオボアルブミンの使用に基づいています。オボアルブミン誘発性アレルギー性喘息は、気道好酸球増加、肺の炎症、喘息6,7中に見つかった上昇IgE値を再現するために広く使われているモデルです。感作後、マウスを取り込みオボアルブミン気道樹状細胞の特異的な標識を可能にFITC標識アルブミンの鼻腔内送達によって、求められています。次に、いくつかのDC特異的なマーカーを使用して、我々はこれらの樹状細胞の成熟を評価することができ、また、フローサイトメトリーを用いることにより、所属リンパ節への移行を評価することができます。
Protocol
Discussion
ここで紹介する方法は、気道チャレンジOVA-FITCの配信に基づいて、肺樹状細胞を分析するためのフローサイトメトリーベースのアプローチを提供しています。これは、OVA-FITCを取ると、監視されているので、DC集団は、実質的にOVA誘発性アレルギー性気道炎症の過程で気道免疫応答に参加しているものである肺樹状細胞の選択的な監視が可能になります。コントロールマウスでは、アレル?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、博士ジム胡にCIHRとCFカナダの補助金によっておよびCFカナダラーフルKushwahに授与博士課程の学生の身分によって資金を供給された。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Ovalbumin | Sigma-Aldrich | A5503 |
| Alum | Thermo Scientific | 77161 |
| OVA-FITC | Sigma-Aldrich | A9771 |
| Collagenase D | Roche | 11088858001 |
| Antibodies | e-Bioscience |
Riferimenti
- Kushwah, R., Hu, J. Role of dendritic cells in the induction of regulatory T cells. Cell Biosci. 20, (2011).
- Kushwah, R., Hu, J. Complexity of dendritic cell subsets and their function in the host immune system. Immunology. 133, 409-419 (2011).
- Lambrecht, B. N., Hammad, H. Taking our breath away: dendritic cells in the pathogenesis of asthma. Nat Rev Immunol. 3, 994-1003 (2003).
- Hammad, H., Lambrecht, B. N. Dendritic cells and epithelial cells: linking innate and adaptive immunity in asthma. Nat. Rev. Immunol. 8, 193-204 (2008).
- Lloyd, C. M., Murdoch, J. R. Tolerizing allergic responses in the lung. Mucosal. Immunol. 3, 334-344 (2010).
- Herz, U. The relevance of murine animal models to study the development of allergic bronchial asthma. Immunol. Cell Biol. 74, 209-217 (1038).
- Herz, U., Lumpp, U., Daser, A., Gelfand, E. W., Renz, H. Murine animal models to study the central role of T cells in immediate-type hypersensitivity responses. Adv. Exp. Med. Biol. 409, 25-32 (1996).
- Nakae, S. TNF can contribute to multiple features of ovalbumin-induced allergic inflammation of the airways in mice. J. Allergy Clin. Immunol. 119, 680-686 (2007).
- Guth, A. M. Lung environment determines unique phenotype of alveolar macrophages. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 296, L936-L946 (2009).
- Kushwah, R., Cao, H., Hu, J. Characterization of pulmonary T cell response to helper-dependent adenoviral vectors following intranasal delivery. J. Immunol. 180, 4098-4108 (2008).
- Kushwah, R., Oliver, J. R., Zhang, J., Siminovitch, K. A., Hu, J. Apoptotic dendritic cells induce tolerance in mice through suppression of dendritic cell maturation and induction of antigen-specific regulatory T cells. J. Immunol. 183, 7104-7118 (2009).
