El análisis de la maduración pulmonar de células dendríticas y migración durante la inflamación de las vías alérgica
Summary
Se describe una estrategia para controlar la maduración y la migración de las células dendríticas pulmonares en respuesta a la ovoalbúmina en la configuración de las vías respiratorias inflamación inducida por ovalbúmina alérgica. Esta estrategia se puede modificar para evaluar la migración de las células dendríticas pulmonares en la configuración de la infección.
Abstract
Las células dendríticas (DC) son los principales actores implicados en la iniciación de la respuesta inmune adaptativa mediante la activación de antígenos específicos de células T. Los países en desarrollo están presentes en los tejidos periféricos en estado estacionario, sin embargo, en respuesta a la estimulación antigénica, los países en desarrollo ocupan el antígeno y rápidamente migran a los ganglios linfáticos que drenan en el que inician la respuesta de células T contra el antígeno de 1,2. Además, los países en desarrollo también desempeñan un papel clave en la iniciación de la respuesta inmunitaria autoinmune, así como alérgica 3.
Los países en desarrollo desempeñan un papel esencial tanto en la iniciación de la respuesta inmune y la inducción de la tolerancia en el ámbito del medio ambiente de pulmón 4. Entorno de pulmón es en gran parte tolerogénico, debido a la exposición a la amplia gama de antígenos ambientales 5. Sin embargo, en algunos individuos hay una ruptura en la tolerancia, lo que conduce a la inducción de la alergia y el asma. En este estudio, se describe una estrategia, que se puede utilizar para controlar las vías respiratorias maduración DC y MIGración en respuesta al antígeno utilizado para la sensibilización. La medición de las vías respiratorias maduración de las DC y la migración permite la evaluación de la cinética de la respuesta inmune durante la inflamación las vías respiratorias alérgicas y también ayuda a comprender la magnitud de la posterior respuesta inmune junto con los mecanismos subyacentes.
Nuestra estrategia se basa en la utilización de ovoalbúmina como agente sensibilizante. Ovoalbúmina inducida por el asma alérgica es un modelo ampliamente utilizado para reproducir la eosinofilia las vías respiratorias, inflamación pulmonar y niveles elevados de IgE se encuentran en el asma 6,7. Después de la sensibilización, los ratones son desafiados por la administración intranasal de ovoalbúmina marcado con FITC, lo que permite el etiquetado específico de los países en desarrollo las vías respiratorias, que la captación de ovoalbúmina. A continuación, utilizando varios marcadores específicos de CC, podemos evaluar la maduración de estos países en desarrollo y también se puede evaluar su migración a los ganglios linfáticos de drenaje mediante el empleo de la citometría de flujo.
Protocol
Discussion
El método que aquí se presenta ofrece un enfoque basado en la citometría de flujo para el análisis de los países en desarrollo pulmonar, con base en la entrega de OVA-FITC para el desafío de las vías respiratorias. Esto permite el control selectivo de los países en desarrollo pulmonar, que ocupan un OVA-FITC y por lo tanto, las poblaciones de CC, que se controlan son efectivamente los que participan en la respuesta inmune vías respiratorias durante el curso de la inflamación inducida por OVA las vías respirat…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabajo fue financiado por CIHR y CF subvenciones a Canadá el Dr. Jim Hu y por una beca de doctorado otorgado a Rahul Kushwah por CF Canadá.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Ovalbumin | Sigma-Aldrich | A5503 |
| Alum | Thermo Scientific | 77161 |
| OVA-FITC | Sigma-Aldrich | A9771 |
| Collagenase D | Roche | 11088858001 |
| Antibodies | e-Bioscience |
Riferimenti
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