Summary
Abstract
Fra november nummer af Journal of Visualiseret Forsøg begynder med en serie af adfærdsmæssige eksperimenter til at måle prehension evne i primater. Efterforskere fra University of Fribourg demonstrere fire gribe og nå opgaver, som alle følger almindelige trin for komfortabelt fastholdende dyret og korrekt positionering hovedet. Den Brinkman Bestyrelsen test bruges til at vurdere nå til statiske objekter, mens den roterende Brinkman bestyrelse præsenterer en tilstand, hvor dyrene skal kunne forudse objekt position. Den Brinkman Box test gør det muligt behændighed, der skal undersøges under forhold, hvor aben har færre frihedsgrader til at udføre gribe opgaven og kan ikke bruge visionen til at vejlede bevægelse. Mens Brinkman bestyrelse og box test udelukkende stole på en analyse af video opnået ved forsøg, med henblik på at generere data, skuffen når opgaven apparat har detektorer, der overvåger greb og belastning styrker samt skuffe position, hvilket gør denne test approprIATE til måling af styrke såvel som prehension evne. I kombination giver disse fire test en kraftfuld tilgang til vurdering af motorisk kontrol i de distale forelimb, og Fribourg gruppen præsenterer data fra både læsion undersøgelser og eksperimenter har til formål at afprøve en mulig behandling for rygmarvsskader.
I Klinisk og Translational Medicine, samarbejdspartnere fra afdelingen for Kirurgisk Forskning ved University Hospital Zürich og Institute of Laboratory Animal Science ved University of Zurich, arbejde sammen om at implantere en radiotelemetry enhed i mus, som kan bruges til at tage fysiologiske målinger i frit bevægelige dyr. Enhederne består af to ledninger, som er i stand til at måle biopotential aktivitet (EKG, EEG, eller EMG) samt temperaturen, og en let radiosender (1-200 Hz i båndbredde), der kan implanteres i bughulen. Stress af håndtering af dyr samt anæstesi er kendt sammenblandede elementer, som påvirker fysiologiskeAl målinger, så radiotelemetry enheder er en bekvem måde at få fysiologiske data fra dyr i en uforstyrrede, naturlig tilstand, samt foretage målinger af flere dyr samtidig.
JOVE tilføjer også til dens væld af elektroporation protokoller med en metode til at indføre macromoledules i kraniofacial mesenchyme at udvikle Xenopus laevis haletudser, fra Liu Lab på Kings College i London. Xenopus haletudser overføres til en elektroporation kammer, hvor de kan injiceres med nukleinsyre, og derefter udsat for elektroporation, som vil levere Ekspressionsvektorer eller morpholinos i udviklingslandene kraniofacial væv. Gene levering til differentierede brusk er i sig selv problematisk, og Liu laboratoriet viser, at gennem elecroporation, kan morpholinos indføres i procartilaginous og bruskspidserne væv i Xenopus haletudse gennem en række udviklingsstadier.
I Bioengineering, de Zuckerman gruppen fraLawrence Berkeley National Laboratory illustrerer deres metode til syntese peptoids, en klasse af biologisk aktive organiske molekyler, der ligner peptider, men har deres sidekæder knyttet til kvælstof for peptidbinding, snarere end alpha kulstof, hvilket gør dem resistente over for proteolyse . Den Zuckerman gruppen demonstrerer submonomer syntese, hvor peptid monomerer er tilføjet sekventielt i bromoacetylation og bromid fordrivelse reaktioner, så peptoid kædelængde og sammensætning at være netop kontrolleret. Endvidere er den omstændighed, at syntese sker på amid harpiks, og er dermed fast fase syntese, forenkler rensning af den syntetiserede peptoids. Disse forfattere viser også, hvordan den nyligt syntetiserede peptoids kan induceres til selv at samle ind højt ordnede strukturer, kaldet nanosheets, hvilket kan visualiseres ved fluorescens og scanning elektronmikroskopi. Disse nanosheets kunne tjene som en potentiel platform for protein og membran mimETICS.
Senere på måneden, JOVE har en test til måling af fagocyterende aktivitet i cellerne udsættes for klinisk antistof prøver for vores Immunologi og Infektion sektion. Samarbejdspartnere fra Massachusetts General Hospital og Dartmouth College viser, at THP-1 celler vil opsluge antistof-bundet antigen belagt perler i timelapse video mikroskopi og præsentere en plade-baseret flowcytometri metode til at kvantificere omfanget af fagocytose. Vores forfattere bruger denne metode til at afgøre, hvorvidt forskellige antistof prøver at fremkalde fagocytose, som dem fra HIV-patienter, både behandlet og ubehandlet med anti-retroviral terapi.
Dette resumé af JOVE indhold i november giver et kort overblik over JOVE højdepunkter for måneden. Andre bemærkelsesværdige artikler omfatter metoder til billeddannelse af cytoskeletal dynamik i endotelceller, måling af calcium flux i cardiomyocytter, og skær elektrofysiologi af voksne født neuroner i de olfaktoriske pære.
