Colorazione immunoistochimica di B7-H1 (PD-L1) in paraffina incorporate diapositive di tessuto pancreatico Adenocarcinoma

Elaine Bigelow; Katherine M. Bever; Haiying Xu; Allison Yager; Annie Wu; Janis Taube; Lieping Chen; Elizabeth M. Jaffee; Robert A. Anders; Lei Zheng

doi:10.3791/4059

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Articolo metodologico

Colorazione immunoistochimica di B7-H1 (PD-L1) in paraffina incorporate diapositive di tessuto pancreatico Adenocarcinoma

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DOI:

10.3791/4059

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3 gennaio 2013

Elaine Bigelow¹^,² , Katherine M. Bever¹^,² , Haiying Xu¹^,²^,³ , Allison Yager¹ , Annie Wu¹^,²^,⁴ , Janis Taube³^,⁵ , Lieping Chen⁶ , Elizabeth M. Jaffee¹^,²^,⁵^,⁷^,⁸ , Robert A. Anders¹^,²^,⁵^,⁸ , Lei Zheng¹^,²^,⁴^,⁵^,⁷

¹The Sidney Kimmel Comprehensive Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ²Department of Oncology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ³Department of Dermatology, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁴Department of Surgery, Johns Hopkins University School of Medicine, ⁵The Sol Goldman Pancreatic Cancer Center, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁶Yale Cancer Center, Yale School of Medicine, ⁷The Skip Viragh Center for Pancreatic Cancer, The Johns Hopkins University School of Medicine, ⁸Department of Pathology, The Johns Hopkins University School of Medicine

In questo articolo

Sommario

B7-H1 (PD-L1) e il suo legame al PD-1 forniscono una maggiore tumore segnale indotto immunosoppressiva nel microambiente del tumore. Una tecnica di colorazione immunoistochimica per caratterizzare l'espressione e la localizzazione di B7-H1 in adenocarcinoma pancreatico è descritto qui.

Abstract

B7-H1/PD-L1, un membro della famiglia B7-immune di regolamentazione proteine di superficie cellulare, svolge un ruolo importante nella regolazione negativa di risposte immunitarie mediate da cellule attraverso la sua interazione con il suo recettore, morte programmata-1 (PD -1) ^1,2. Sovraespressione di B7-H1 da cellule tumorali è stato osservato in un certo numero di tumori umani, compreso il melanoma, glioblastoma, e carcinomi del polmone, seno, colon, ovaio, e cellule renali, e ha dimostrato di alterare anti-tumorali T- cella immunità ^3-8.

Recentemente, B7-H1 espressione tessuti adenocarcinoma pancreatico è stato identificato come un potenziale marcatore prognostico ^9,10. Inoltre, il blocco di B7-H1 in un modello murino di cancro pancreatico ha dimostrato di produrre una risposta antitumorale ^11. Questi dati suggeriscono l'importanza di B7-H1 come un potenziale bersaglio terapeutico. Anti-B7-H1 anticorpi bloccanti sono quindi in fase di sperimentazione in studi clinici per il mulgestire più tumori umani solidi tra cui il melanoma e tumori del polmone, del colon, rene, stomaco e pancreas ^12.

Per essere successivamente in grado di identificare i pazienti che beneficeranno B7-H1 di targeting terapie, è fondamentale per indagare la correlazione tra espressione e la localizzazione delle B7-H1 e la risposta del paziente al trattamento con anticorpi B7-H1 blocco. Esaminando l'espressione di B7-H1 in tessuti umani adenocarcinoma pancreatico attraverso immunoistochimica darà una migliore comprensione di come questa co-inibitrice molecola di segnalazione contribuisce alla soppressione dell'immunità antitumorale in microambiente del tumore. L'anticorpo anti-B7-H1 monoclonale (clone 5H1) sviluppato da Chen e colleghi ha dimostrato di produrre risultati affidabili in colorazione criosezioni di più tipi di tessuti neoplastici umani ^4,8, ma macchie nei paraffinati diapositive era stata una sfida fino recentemente ^13-18. Abbiamo devfuggita la B7-H1 protocollo di colorazione per le diapositive incluse in paraffina di tessuti adenocarcinoma pancreatico. La B7-H1 protocollo di colorazione qui descritto produce coerente colorazione membranosa e citoplasmatica di B7-H1 con po 'di storia.