यह प्रोटोकॉल का एक कारक है कि कार्यात्मक बीटा सेल जन व्यवस्थित करने के लिए मधुमेह के उपचार के लिए संभावित चिकित्सात्मक लक्ष्य की पहचान करने की अनुमति देता है. प्रोटोकॉल अलग चूहा adenoviruses साथ जीन अभिव्यक्ति के हेरफेर के बाद islets में आइलेट प्रतिकृति और बीटा सेल समारोह का आकलन करने के लिए एक सुव्यवस्थित विधि के होते हैं.
ग्लूकोज homeostasis को मुख्य रूप से अंत: स्रावी हार्मोन इंसुलिन और ग्लूकागन द्वारा नियंत्रित किया जाता है, अग्नाशय बीटा और अल्फा कोशिकाओं से स्रावित, क्रमशः. कार्यात्मक बीटा सेल जन संरचनात्मक बीटा सेल के रूप में अच्छी तरह के रूप में बीटा कोशिकाओं की क्षमता के लिए एक पोषक तत्व लोड करने के लिए जवाब जन द्वारा निर्धारित किया जाता है. कार्यात्मक बीटा सेल जन नुकसान मधुमेह 1-3 की दोनों प्रमुख रूपों के लिए केंद्रीय है. जबकि कार्यात्मक गिरावट टाइप 1 मधुमेह एक autoimmune हमले से बीटा सेल जन परिणाम, टाइप 2 मधुमेह में, इस घटती दोनों बीटा कोशिकाओं की अक्षमता इंसुलिन छिपाना उचित और तंत्र की एक काडर से बीटा कोशिकाओं के विनाश से विकसित करता है. इस प्रकार, कार्यात्मक बीटा सेल जन को बहाल करने के प्रयासों के बेहतर उपचार और मधुमेह के लिए संभावित इलाज के लिए सर्वोपरि हैं.
आणविक मार्ग है कि प्रतिकृति को प्रोत्साहित करने के लिए और बीटा कोशिकाओं के समारोह बढ़ाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है की पहचान के प्रयास चल रहे हैं.आदर्श रूप में, चिकित्सकीय लक्ष्य दोनों बीटा सेल के विकास और समारोह में सुधार होगा. शायद अधिक महत्वपूर्ण है यद्यपि की पहचान है कि एक रणनीति है कि बीटा सेल विकास को बढ़ावा देने आई. बीटा सेल समारोह (जैसे कुछ ओंकोजीन के साथ) और इसके विपरीत की कीमत पर आता है.
व्यवस्थित दबा या overexpressing अलग चूहा islets में लक्ष्य जीन की अभिव्यक्ति के द्वारा, एक बढ़ती कार्यात्मक बीटा सेल 4-6 बड़े पैमाने के लिए संभावित चिकित्सात्मक लक्ष्यों की पहचान कर सकते हैं. Adenoviral वैक्टर अलग चूहा 4,7-15 टापू में कुशलतापूर्वक overexpress या पछाड़ना प्रोटीन के लिए नियोजित किया जा सकता है. यहाँ, हम करने के लिए एक जीन अभिव्यक्ति का उपयोग adenoviral पारगमन में हेरफेर और आइलेट और अलग चूहा टापू (चित्रा 1) में बीटा सेल समारोह प्रतिकृति का आकलन विधि प्रस्तुत करते हैं. इस विधि में पहले से इस्तेमाल किया गया है उपन्यास लक्ष्य है कि बीटा सेल प्रतिकृति या 5,6,8,9,16,17 समारोह मिलाना की पहचान.
रास्ते की स्थापना है कि प्रतिकृति को प्रोत्साहित करने के लिए और बीटा कोशिकाओं के समारोह बढ़ाने के लिए modulated किया जा सकता है मधुमेह के दोनों प्रमुख रूपों के लिए प्रासंगिक हैं. क्योंकि कार्यात्मक बीटा से?…
The authors have nothing to disclose.
एनआईएच (PTF करने के लिए) से इस काम DK078732 अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
RPMI 1640 media | Gibco | 11879 | |
Penicillin/streptomycin | Gibco | 15140 | |
6-well plate | BD-Falcon | 35-1146 | Non-TC treated |
[methyl-3H]-thymidine | Perkin Elmer | NET027Z001MC | 1 mCi/ml |
Micro-centrifuge tubes | Denville | C2170 | 1.7 ml |
NaCl | Sigma | 59888 | |
KCl | Acros | 42409 | |
KH2PO4 | Acros | 20592 | |
MgSO4 | Acros | 41348 | |
CaCl2 | Acros | 34961 | |
HEPES | Sigma | H0887 | 1 M solution |
35% BSA | Sigma | A7979 | |
NaHCO3 | Acros | 42427 | |
d-glucose | Sigma | G8769 | |
TCA | Fisher Scientific | SA9410-1 | 10% w/v |
NaOH | Acros | 12426 | |
Scintillation counting tube | Sarstedt | 58.536 | 7 ml, PP |
Scintillation counting tube cap | Sarstedt | 65.816 | |
Econo-Safe counting cocktail | RPI | 111175 | |
Insulin RIA | Siemens | TKIN2 | |
BCA Assay Kit | Thermo Scientific | 23250 | |
Equipment | |||
Centrifuge | Eppendorf | 5415R | |
Scintillation counting tube rack | Sarstedt | 93.1431.001 | |
Liquid scintillation counter | Perkin Elmer | Tri-Carb 2910TR |