Ileo postoperatorio (POI) è una complicanza della chirurgia addominale che porta a un aumento della morbilità e degenza prolungata. Poiché le strategie profilattiche o terapeutiche mancano intensificazione della ricerca è necessaria. Pertanto abbiamo stabilito un modello di topo standardizzata e possibile esaminare la fisiopatologia di POI e di studiare i potenziali opzioni terapeutiche.
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Articolo metodologico
Valutazione funzionale della motilità intestinale e Wall infiammazione intestinale nei roditori: Analisi in un modello standardizzato di manipolazione intestinale
In questo articolo
Sommario
Abstract
Infiammazione del tratto gastrointestinale è un motivo comune per una varietà di malattie umane. Modelli di ricerca animali sono fondamentali per indagare il complesso cellulare e molecolare della patologia intestinale. Anche se la tunica mucosa è spesso l'organo di interesse in molte malattie infiammatorie, opere recenti hanno dimostrato che il externa muscolare (ME) è un organo altamente immunocompetente che ospita una fitta rete di immunociti residenti. 1,2 Questi lavori sono stati eseguiti all'interno del standardizzato modello di manipolazione intestinale (IM) che porta a infiammazione della parete intestinale, essenzialmente limitata al ME. Clinicamente questa infiammazione porta a disturbi della motilità intestinale prolungato, nota come ileo postoperatorio (POI) che è una complicazione frequente e inevitabile dopo chirurgia addominale. 3 L'infiammazione è caratterizzata dalla liberazione di mediatori proinfiammatori quali IL-6 4 neurotrasmettitori o IL-1β o inibitorio come Nitric ossido (NO). 5 Successivamente, i numeri enormi di immunociti travasare nel ME, dominato dai neutrofili polimorfonucleati (PMN) e monociti e, infine, mantenere POI. duraturo, giorni 2, questa paralisi intestinale porta ad un aumento del rischio di aspirazione, traslocazione batterica e complicanze infettive fino a sepsi e insufficienza d'organo multi e provoca un elevato onere economico 6.
In questo manoscritto si dimostra il modello standardizzato di IM e di valutazione in vivo del transito gastrointestinale (GIT) e transito intestinale. Inoltre si dimostra un metodo per la separazione della ME dalla tunica mucosa seguita da analisi immunologiche, che è fondamentale distinguere tra le risposte infiammatorie in questi due compartimenti intestinali altamente immunoactive parete. Tutte le analisi sono facilmente trasferibili ad altri modelli di ricerca, che influenzano la funzione gastrointestinale.
Protocollo
1. Animali
Maschio C57Bl6 / J topi con un peso medio di 25 g sono stati ottenuti da Harlan Winkelmann (Borchen, Germania). Tutti gli esperimenti sono stati eseguiti in conformità con la legge federale sulla protezione degli animali. I principi di cura degli animali da laboratorio sono stati seguiti. Gli animali sono stati mantenuti su un 12-ore ciclo luce / buio e dotato di roditori chow disponibili in commercio e l'acqua del rubinetto ad libitum. Animali dovrebbero essere accolti almeno 7 giorni dopo l'arrivo in stabulario prima degli esperimenti. Si noti che tutti gli esperimenti può essere facilmente adattato a ratti....
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Discussione
Uno studio comparativo analizzando i diversi livelli di IM (eventratio piccolo intestino per 10 minuti contro delicatamente l'ispezione del piccolo intestino con due applicatori di cotone contro IM con l'evacuazione del contenuto dell'intestino tenue nel cieco) ha evidenziato una correlazione tra il grado di manipolazione chirurgica e POI. Rispetto agli altri gruppi IM mostrato la più alta quantità di leucociti nel ME (PNMs, macrofagi e mastociti) conseguente POI prolungata e grave. 8.
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Dichiarazioni
Nessun conflitto di interessi dichiarati.
Ringraziamenti
Questo lavoro è stato sostenuto da finanziamenti della Deutsche Forschungsgemeinschaft (KA1270/3-1/2) e BONFOR (O-112,0040).
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| Nome del reagente / attrezzature | Azienda | Numero di catalogo | |
| Ethilon 5/0 | Ethicon | 1666H | |
| Cotone applicatori | Monco | 71010 | |
| catetere arterioso | Vygon | 115-798 | |
| Piastra a 96 pozzetti (nero) | Greiner Bio One | 655096 | |
| sfera di vetro (2 mm di diametro) | Worf | disponibile su richiesta | |
| Perni insetti | Strumenti Scienza Belle | 26000-25 | |
| Hanker Yates Reagente | Polyscience | 560694 | |
| Aquatek | Merck | HC109850 | |
| DMEM | Lonza | BE12-604 F | |
| FITC-destrano (MW 70000) | Sigma Aldrich | 46945-500mg-F |
Riferimenti
- Wehner, S., Behrendt, F. F., Lyutenski, B. N., Lysson, M., Bauer, A. J., Hirner, A., Kalff, J. C. Inhibition of macrophage function prevents intestinal inflammation and postoperative ileus in rodents. Gut. 56, 176-185 (2007).
- Kalff, J. C., Schwarz, N. T., Walgenbach, K. J., Schraut, W. H., Bauer, A. J.
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Ristampe e permessi
