Summary

زرع مثلي الأمعاء الصغيرة في الفئران

Published: November 06, 2012
doi:

Summary

أصبح صغيرا زرع الأمعاء خيار العلاج المقبولة لمرضى الفشل المعوية لا رجعة فيه. نموذجنا التجريبي لزرع مثلي الأمعاء الدقيقة في الفئران بمثابة أداة موثوقة لمعالجة المناعية الأساسية والعمليات الالتهابية التي تعقد زرع الأمعاء.

Abstract

أصبح صغيرا زرع الأمعاء خيارا مقبولا السريرية للمرضى الذين يعانون متلازمة الأمعاء القصيرة وفشل التغذية الوريدية (فشل معوي لا رجعة فيه). في مراكز متخصصة واستراتيجيات تحسين إدارة المنطوق أدت إلى المريض القصيرة والمتوسطة الأجل وبقاء ممتازة الكسب غير المشروع مع توفير نوعية عالية من الحياة 1،3. وخلافا للزرع أكثر شيوعا من أجهزة صلبة أخرى (أي القلب والكبد) الآليات الكامنة وظيفة العديد من الكسب غير المشروع والتعديلات المناعية الناجمة عن زرع الأمعاء ليست معروفة تماما 6،7. حلقات الرفض الحاد، والمزمن الفشل الإنتان الكسب غير المشروع هي العقبات الرئيسية التي تسهم نتائج لا تزال مواتية على المدى الطويل أقل وعرقلة لعمل أكثر على نطاق واسع على الرغم من إجراء عدد متزايد من المرضى على التغذية الوريدية الرئيسية التي ستستفيد من المحتمل زرع من هذا القبيل. الأمعاء الدقيقة يحتوي علىعدد كبير من الركاب وكوسيتيس يشار إلى جزء من القناة الهضمية نظام اللمفاوية المرتبطة (GALT) هذا الجزء من كونها السبب في immunogenity عالية من الكسب غير المشروع المعوية. وجود وبالقرب من العديد من commensals ومسببات الأمراض في الأمعاء يفسر شدة الإنتان الحلقات مرة واحدة للخطر سلامة الغشاء المخاطي الكسب غير المشروع (على سبيل المثال، رفض). للمضي قدما في مجال البيانات وزرع الأمعاء multiorgan أكثر المتولدة من النماذج الحيوانية موثوقة ومجدية هو مطلوب. تقديم نموذج يجمع بين كل من الموثوقية وهنا الجدوى متى تم انشاؤه بطريقة موحدة ويمكن أن توفر معلومات قيمة في مجمع آليات الكامنة، الجزيئية الخلوية والوظيفية التي يتم تشغيلها بواسطة زرع الأمعاء. وقد استخدمنا بنجاح وصقل الإجراءات الموصوفة على مدى أكثر من 5 سنوات في مختبرنا 8-11. وإن الرب القائم على الفيديو الشكل هو مفيدة بشكل خاص للتدليل على اإلجراءات المعقدةوتجنب المزالق dure الأولية للجماعات تخطط لإنشاء نموذج القوارض مثلي التحقيق زرع الأمعاء.

Protocol

1. عملية المانحة يجب أن تبقى الفئران المانحة الصوم لمدة 24 ساعة (حرية الوصول إلى المياه / الجلوكوز الحل). للحث على Isoflurane التخدير عن طريق الاستنشاق، وتبدأ مع 2٪ على مستوى رذاذ، ومن ثم خفض إلى 1٪ ب?…

Representative Results

بعد العملية الجراحية الاعتيادية ينبغي أن الحيوانات المزروعة التعافي سريعا من الإجراء تحت مصباح الحرارة لحوالي 1 ساعة. انخفاض حرارة الجسم هو أحد الأسباب الرئيسية لوفيات ما بعد الجراحة وينبغي تجنب بعناية داخل وبعد العمل الجراحي. يج…

Discussion

في حين وصفت نماذج زرع الأمعاء في الفئران في وقت مبكر كما هو الحال في ال 5 1970ies معظم النماذج المستخدمة مؤخرا تنطوي على زرع الأمعاء منتبذ باستخدام تقنيات مختلفة 13. في حين أن الإجراءات منتبذ بشكل عام لديها ميزة التقنيات المجهرية أسهل وأسهل الوصول إلى الكسب غي?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N solution Nycomed 6967855
Ampicillin Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl) Pfizer
Prolene 10-0 unresorbable suture Ethicon
Monocryl 6-0 resorbable suture Ethicon
Vicryl 3-0 resorbable suture Ethicon
i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm Braun
i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm Braun
Kodan Skin Prep Schülke
NaCl 0.9% Infusion solution Braun
Curved forceps small FineScienceTools 11009-13
Micro forceps curved AESCULAP BD 333
Micro forceps curved AESCULAP FD281R
Micro forceps straight 1 WPI 5
Micro forceps straight 2 WPI 2
Micro needle holder WPI 14081
Micro scissors FineScienceTools 15006-09
Micro scalpel MANI Ophthalmic knife
Micro clamps AESCULAP FB329R

Riferimenti

  1. Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
  2. Berney, T., et al. Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation. J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804 (2002).
  3. Fishbein, T. M. Intestinal transplantation. N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).
  4. Hernandez, F., et al. Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats. J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).
  5. Monchik, G. J., Russell, P. S. Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations. Surgery. 70 (5), 693 (1971).
  6. Murase, N., et al. Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506. Transplantation. 55 (1), 1 (1993).
  7. Murase, N., et al. Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion. Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).
  8. Pech, T., et al. Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation. Am. J. Transplant. 10 (11), 2431 (2010).
  9. Schaefer, N., et al. Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis. Am J Transplant. 7 (5), 1062 (2007).
  10. Schaefer, N., et al. Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1821 (2006).
  11. Schaefer, N., et al. Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function. Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).
  12. Xue, L., et al. Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases. Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).
  13. Zhang, X. Q., et al. Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).
  14. Zhao, Y., et al. The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant. Proc. 39 (1), 278 (2007).
check_url/it/4102?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Kitamura, K., von Websky, M. W., Ohsawa, I., Jaffari, A., Pech, T. C., Vilz, T., Wehner, S., Uemoto, S., Kalff, J. C., Schaefer, N. Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (69), e4102, doi:10.3791/4102 (2012).

View Video