A فأر معدل وفيات منخفض الموديل بالتشنج الدماغي لتقييم تأخر بعد نزيف تحت العنكبوتية التجريبية
Summary
أم الدم نزيف تحت العنكبوتية (SAH) والذي يحدث نزيف في الفضاء تحت العنكبوتية عندما تمزق تمدد الأوعية الدموية. في حين كانت معدلات الاعتلال والوفيات من هذا الحدث على انخفاض بسبب النهج تحسين العلاج، وخطر بالتشنج بعد نزيف تحت العنكبوتية لا يزال هو نفسه كما كان قبل عدة سنوات. كانت أهمية إنشاء نموذج حيواني شاملة وقابلة للتكرار لتحديد بدء الأحداث من تشنج وعائي دماغي محور البحوث منذ أول استخدام للالفئران في نموذج بالتشنج التجريبية في عام 1979 من قبل باري<em> وآخرون.</em> العمل في وقت مبكر في الفئران أظهرت أن حقنة واحدة من الدم الذاتي في ماجنا صهريج وأدى إلى الحادة (في غضون دقائق)، ولكن لا تتأخر بالتشنج الدماغي<sup> 3، 6، 14</sup>. نحن هنا تميز انخفاض معدل وفيات الفئران SAH نموذج الذي يؤدي إلى تشنج وعائي تأخر استنساخه.
Abstract
الهدف: تحديد الخصائص ووضع نموذج يمكن استنساخه تشنج وعائي دماغي الذي يوضح تأخر بعد نزيف تحت العنكبوتية أم الدم (SAH) في الفئران، من أجل تحديد بدء الأحداث، والتغيرات المرضية في جسم المريض والأهداف المحتملة لتلقي العلاج.
تم تعيين تعسفا إلى واحدة من مجموعتين – ثمانية وعشرون من الذكور سبراغ داولي الفئران (300 ز 250) – SAH أو السيطرة المالحة: طرق. كان بفعل الجرذان نزيف تحت العنكبوتية SAH في المجموعة (ن = 15) عن طريق الحقن المزدوج من الدم الذاتي، 48 ساعة على حدة، في صهريج للماجنا. تم حقن وبالمثل، ملحي (ن = 13) في ماجنا صهريج للمن السيطرة على المجموعة المالحة. تمت التضحية الفئران في اليوم الخامس بعد الحقن الثاني والدم والحفاظ على العقول للتحليل النسيجي. وقد تم قياس درجة بالتشنج باستخدام مقاطع من الشريان القاعدي، عن طريق قياس اللمعية عبر منطقة الداخلية باستخدام قطاعات NIH-J صورة البرنامج. كان مغزىاختبار توكي باستخدام / كرامر 'ق التحليل الإحصائي.
النتائج: بعد تحليل المقاطع النسيجية، الشريان القاعدي المنطقة عبر اللمعية قطاعات كانت أصغر في SAH من المياه المالحة في المجموعة، بما يتفق مع تشنج وعائي دماغي في المجموعة الأولى. في المجموعة SAH، كانت منطقة الشريان القاعدي الداخلي (0.056 ميكرون ± 3) أصغر بكثير من بالتشنج بعد خمسة أيام من الحقن بالدم الثانية (سبعة أيام بعد الحقن الدم الأولي)، مقارنة مع مجموعة التحكم المالحة مع منطقة الداخلية (0،069 ± 3، P = 0.004). لم تكن هناك وفيات من تشنج وعائي دماغي.
الاستنتاج: نموذج الفئران SAH مزدوجة يدفع، النجاة خفيفة، بالتشنج الشريان القاعدي التي يمكن استخدامها لدراسة آليات المرضية في جسم المريض من تشنج وعائي دماغي في نموذج حيوان صغير. A معدل وفيات منخفضة ومقبولة هو معيار هام ليكون راضيا عن نموذج مثالي الحيوان بحيث SAH آليات بالتشنج يمكن أن يكون elucidated 7 و 8. ويمكن إجراء المزيد من التعديلات لنموذج لضبط شدة زيادة بالتشنج والعصبية الامتحانات.
Protocol
Representative Results
Discussion
الرئيسيات، وجود أكثر تكوين مماثلة الوراثية والخصائص التشريحية للإنسان، بشكل وثيق تقليد أحداث بالتشنج الدماغي وتأخر بسهولة أكبر الخضوع غير الغازية التصوير (MRI وتصوير الأوعية) لمراقبة التغييرات في الشرايين، من القوارض 8. ومع ذلك، ونماذج الرئيسيات من حيث التكلف?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نود أن نعترف بجهود الدكتور ماري لو Vallano، قسم العلوم العصبية وعلم وظائف الأعضاء، على المدخلات لها قيمة في الكتابة لهذا المخطوط.
Materials
| Name of equipment / reagent | Company | Catalogue Number |
| Male SD rats (250-300 g) | Taconic | SD-M |
| 26 G Catheters | Webster | 8416683 |
| 25 G Needles | Buffalo | 305122 |
| 1 cc Syringes | Central stores | 54245 |
| Ketamine/Xylazine cocktail | Animal Care (SUNY)* | – |
| Betadine | Central stores | 51458 |
| Sucrose | Sigma | S9378-1kg |
| Paraformaldehyde | Sigma | P6148-500G |
| Phosphate buffer solution | Fisher | BP-399-4 |
| Surgical Table | Harvard | PY2 72-2590 |
| OCT Compound (cryoprotection) | VWR | 25608-930 |
| Superfrost Slides | Fisher | 12-550-15 |
* Synthesized at Department of Laboratory Animal Care, SUNY Upstate Medical University. Add 1 cc [100 mg/ml] of Xylazine to 10 ml [100 mg/ml] of Ketamine.
Riferimenti
- Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat. Stroke. 26, 1086-1091 (1995).
- Cheng, G., Wei, L., Zhi-Dan, S., Shi-Guang, Z., Xiang-Zhen, L. Atorvastatin ameliorates cerebral vasospasm and early brain injury after subarachnoid hemorrhage and inhibits caspase-dependent apoptosis pathway. BMC Neurosci. 10, 7-17 (2009).
- Jackowski, A., Crockard, A., Burnstock, G., Russell, R. R., Kristek, F. The time course of intracranial pathophysiological changes following experimental subarachnoid hemorrhage in the rat. J. Cereb. Blood Flow Metab. 10, 835-849 (1990).
- Kaoutzanis, M., Yokota, M., Sibilia, R., Peterson, J. W. Neurologic evaluation in a canine model of single and double subarachnoid hemorrhage. J. Neurosci. Methods. 50, 301-307 (1993).
- Karaoglan, A., Akdemir, O., Barut, S., Kokturk, S., Uzun, H., Tasyurekli, M., Colak, A. The effects of resveratrol on vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage in rats. Surg. Neurol. 70, 337-343 (2008).
- Lee, J. Y., Huang, D. L., Keep, R., Sagher, O. Characterization of an improved double hemorrhage rat model for the study of delayed cerebral vasospasm. J. Neurosci. Methods. 168, 358-366 (2008).
- Lee, J. Y., Sagher, O., Keep, R., Hua, Y., Xi, G. Comparison of experimental rat models of early brain injury after subarachnoid hemorrhage. Neurosurgery. 65 (2), 331-343 (2009).
- Megyesi, J. F., Vollrath, B., Cook, D. A., Findlay, J. M. In vivo animal models of cerebral vasospasm: a review. Neurosurgery. 46, 448-460 (2000).
- Prunell, G. F., Mathiesen, T., Diemer, N. H., Svendgaard, N. A. Experimental subarachnoid hemorrhage: Subarachnoid blood volume, mortality rate, neuronal death, cerebral blood flow, and perfusion pressure in three different rat models. Neurosurgery. 52, 165-176 (2003).
- Prunell, G. F., Mathiesen, T., Svendgaard, N. A. Experimental subarachnoid hemorrhage: Cerebral blood flow and brain metabolism during the acute phase in three different models in the rat. Neurosurgery. 54, 426-436 (2004).
- Ryba, M. S., Gordon-Krajcer, W., Walski, M., Chalimoniuk, M., Chrapusta, S. J. Hydroxylamine attenuates the effects of simulated subarachnoid hemorrhage: implication for the role of oxidative stress in cerebral vasospasm. Neurol. Res. 31, 195-199 (1999).
- Satoh, M., Parent, A. D., Zhang, J. H. Inhibitory effect with antisense mitogen-activated protein kinase oligodeoxynucleotide against cerebral vasospasm in rats. Stroke. 33, 775-781 (2002).
- Suzuki, H., Kanamaru, K., Tsunoda, H., Inada, H., Kuroki, M., Sun, H., Waga, S., Tanaka, T. Heme oxygenase-1 gene induction as an intrinsic regulation against delayed cerebral vasospasm in rats. J. Clin. Invest. 104, 59-66 (1999).
- Swift, D. M., Solomon, R. A. Subarachnoid hemorrhage fails to produce vasculopathy or chronic blood flow changes in rats. Stroke. 19, 878-882 (1988).
- Vatter, H., Weidauer, S., Konczalla, J., Dettmann, E., Zimmermann, M., Raabe, A., Preibisch, C., Zanella, F., Seifert, V. Time course in the development of cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage: clinical and neuroradiological assessment of the rat double hemorrhage model. Neurosurgery. 58, 1190-1197 (2006).
- Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats. Stroke. 26, 1279-1283 (1995).
- Zubkov, A. Y., Nanda, A., Zhang, J. H. Signal transduction pathways in cerebral vasospasm. Pathophysiology. 9, 47-61 (2003).
