דימום דוגמנות intracerebral בעכברים: הזרקה של דם או השתלת collagenase קטריאלי
Summary
מודלים של בעלי חיים רלוונטיים קליני של דימום intracerebral (ICH) על מנת להרחיב את הידע של שבץ המדמם שלנו ולבחון אסטרטגיות טיפוליות חדשניות. במחקר זה, אנו מתארים ולהעריך את שני מודלי ICH המיישמים זריקות חד צדדיות של כל אחד דם אוטולוגית או collagenase חיידקים לגרעיני בסיס (קורפוס סטריאטום) של עכברים.
Abstract
דימום intracerebral ספונטני (ICH) מגדיר מחל נוירולוגית שעלולה לסכן חיים, שמהווה 10-15% מכלל האשפוזים הקשורים לאירוע מוחי ושאין עבורם טיפולים יעילים זמינים עד היום 1,2. בגלל חוסר האחידות של ICH בבני אדם, מודלים פרה שונים יש צורך ביסודיות לחקור אסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות 3. ICH הניסויי מושרה נפוץ במכרסמים בזריקת intraparenchymal של או דם אוטולוגית או collagenase חיידקי 4. המודל המתאים נבחר מבוסס על הפתופיזיולוגיה של אינדוקצית דימום והתקדמות פציעה. מודל הזרקת הדם מחק דימום במהירות מתקדמת. לחלופין, collagenase חיידקי enzymatically משבש lamina הבסיס של נימים במוח, וגורם לדימום פעיל המתפתח בדרך כלל במשך מספר שעות 5. בצקת perihematomal תוצאתי וגירעונות neurofunctional ניתן לכמת הלוך ושובמ 'שני מודלים. במחקר זה, שתארנו והערכתי מודל שונה כפול הזרקה של הדם כל אוטולוגית 6, כמו גם מודל הזרקת ICH של collagenase חיידקי 7, אשר שניהם היעד לגרעיני הבסיס (קורפוס סטריאטום) של עכברי זכרי CD-1. חוקרים העריכו את גירעונות neurofunctional ובצקת מוחית בגיל 24 ולאחר 72 hr אינדוקצית ICH. הזרקת Intrastriatal דם אוטולוגית (30 μl) או collagenase חיידקים (0.075U) גרמה לגירעונות לשעתק neurofunctional בעכברים ובצקת מוח גדלה באופן משמעותי בגיל 24 ו 72 שעות לאחר ניתוח (p <0.05). לסיכום, שני הדגמים להניב אוטמי hemorrhagic עקביים ומייצגים שיטות בסיסיות למחקר קליני ICH.
Protocol
Discussion
מודלים של בעלי חיים של דימום intracerebral (ICH) יתרמו רבים להבנה מתקדמת של הפתופיזיולוגיה של המחלה, ומשמשים בדרך כלל כדי לפתח ולהעריך אסטרטגיות טיפוליות חדשניות בהגדרה קלינית. זריקות Intraparenchymal דם אוטולוגית או collagenase חיידקים הן שיטות מבוססות היטב כדי ליצור ICH במכרסמים. שני הש?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
מחקר זה מומן בחלקו על ידי מענק NIH RO1NS053407 לJH ג'אנג. ברצוננו להודות למר דיימון Klebe על תרומתו היקרה.
Materials
| Material | Company | Catalogue Number | Comment |
| Stereotactic Head Frame | Stoelting Co. | 51600 | |
| Nanomite Syringe Pump | Harvard Apparatus | PY2 70-2217 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton Company | 1725RN (250 μl) 1701 RN (10 μl) |
26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes. |
| Microdrill | Fine Science Tools | 18000-17 | |
| Microdrill burr | Fine Science Tools | 19007-09 | 0.9 mm diameter |
| Collagenase Type VII-S | Sigma-Aldrich | C2399 | |
| Microhematocrit Capillary Tubes | Fisher Scientific | 22-362-574 | unheparinized |
| Bone Wax | Ethicon | W31 | |
| Suture | Ethicon | 1676G | |
| Ketamine | JHP Pharmaceuticals | 42023-115-10 | Ketalar |
| Xylazine | LLOYD Laboratories | 139-236 | AnaSed |
Riferimenti
- Broderick, J. P. Guidelines for the management of spontaneous intracerebral hemorrhage: A statement for healthcare professionals from a special writing group of the Stroke Council, American Heart Association. Stroke. 30, 905-915 (1999).
- Qureshi, A. I., Mendelow, A. D., Hanley, D. F. Intracerebral haemorrhage. Lancet. 373, 1632-1644 (2009).
- MacLellan, C. L., Silasi, G., Auriat, A. M., Colbourne, F. Rodent models of intracerebral hemorrhage. Stroke. 41, 95-98 (2010).
- James, M. L., Warner, D. S., Laskowitz, D. T. Preclinical models of intracerebral hemorrhage: a translational perspective. Neurocrit Care. 9, 139-152 (2008).
- MacLellan, C. L. Intracerebral hemorrhage models in rat: comparing collagenase to blood infusion. J. Cereb. Blood Flow Metab. 28, 516-525 (2008).
- Belayev, L. Experimental intracerebral hemorrhage in the mouse: histological, behavioral, and hemodynamic characterization of a double-injection model. Stroke. 34, 2221-2227 (2003).
- Clark, W., Gunion-Rinker, L., Lessov, N., Hazel, K. Citicoline treatment for experimental intracerebral hemorrhage in mice. Stroke. 29, 2136-2140 (1998).
- Nakamura, T. Intracerebral hemorrhage in mice: model characterization and application for genetically modified mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 487-494 (2004).
- Schallert, T. Behavioral tests for preclinical intervention assessment. NeuroRx. 3, 497-504 (2006).
- Hartman, R., Lekic, T., Rojas, H., Tang, J., Zhang, J. H. Assessing functional outcomes following intracerebral hemorrhage in rats. Brain Res. 1280, 148-157 (2009).
- Hua, Y. Behavioral tests after intracerebral hemorrhage in the rat. Stroke. 33, 2478-2484 (2002).
- Tang, J. Mmp-9 deficiency enhances collagenase-induced intracerebral hemorrhage and brain injury in mutant mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 1133-1145 (2004).
- Ma, Q. Vascular adhesion protein-1 inhibition provides antiinflammatory protection after an intracerebral hemorrhagic stroke in mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. , (2010).
- Bullock, R., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M., Graham, D. I. Intracranial haemorrhage induced at arterial pressure in the rat. Part 1: Description of technique, ICP changes and neuropathological findings. Neurol Res. 6, 184-188 (1984).
- Yang, G. Y., Betz, A. L., Chenevert, T. L., Brunberg, J. A., Hoff, J. T. Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema, blood flow, and blood-brain barrier permeability in rats. J. Neurosurg. 81, 93-102 (1994).
- Rosenberg, G. A., Mun-Bryce, S., Wesley, M., Kornfeld, M. Collagenase-induced intracerebral hemorrhage in rats. Stroke. 21, 801-807 (1990).
- Alkayed, N. J. Gender-linked brain injury in experimental stroke. Stroke. 29, 159-165 (1998).
- Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. Acute hyperglycemia induced by ketamine/xylazine anesthesia in rats: mechanisms and implications for preclinical models. Exp Biol Med. (Maywood). 230, 777-784 (2005).
- Fujiwara, N. Effect of normobaric oxygen therapy in a rat model of intracerebral hemorrhage. Stroke. 42, 1469-1472 (2011).
- Khatibi, N. H. Isoflurane posttreatment reduces brain injury after an intracerebral hemorrhagic stroke in mice. Anesth Analg. 113, 343-348 (2011).
