Bioluminescent बैक्टीरियल इमेजिंग<em> Vivo में</em
Summary
इस लेख के प्रशासन का वर्णन<em> लक्स टैग</emचूहों को बैक्टीरिया और बाद में<em> Vivo में</em> IVIS bioluminescence इमेजिंग विश्लेषण का उपयोग.
Abstract
यह वीडियो और कैंसर के लिए सेल थेरेपी जीन में बैक्टीरिया का उपयोग पर एक जोर के साथ जीवित चूहों में बैक्टीरिया तस्करी के अध्ययन के लिए पूरे शरीर bioluminesce इमेजिंग (BLI) के उपयोग का वर्णन करता है. बैक्टीरिया को कैंसर के उपचार के लिए एक वेक्टर के आकर्षक वर्ग मौजूद है, एक प्राकृतिक प्रणालीगत प्रशासन के बाद ट्यूमर के भीतर रियायत के तौर पर विकसित करने की क्षमता रखने. जीवाणु लक्स जीन बैक्टीरिया और समवर्ती ट्यूमर साइटों के कैसेट परमिट BLI पता लगाने व्यक्त इंजीनियर. स्थान और समय पर बैक्टीरिया का स्तर ट्यूमर के भीतर आसानी से जांच की जा सकती है, दो या तीन आयामों में visualized. विधि बैक्टीरियल प्रजातियों और ट्यूमर xenograft प्रकार की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए लागू है. इस लेख में चमड़े के नीचे ट्यूमर असर चूहों के भीतर bioluminescent बैक्टीरिया के विश्लेषण के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन करता है. (GIT) BLI पथ में खानेवाला बैक्टीरिया के दृश्य भी वर्णित है. यह शक्तिशाली है, और सस्ते, इमेजिंग वास्तविक समय रणनीति प्रतिनिधिvivo में जीवाणुओं की विशेष रूप से जीन थेरेपी में कैंसर अनुसंधान, और संक्रामक रोग के संदर्भ में अध्ययन के लिए एक आदर्श तरीका टीएस. इस वीडियो लक्स टैग ई. का अध्ययन करने के लिए प्रक्रिया की रूपरेखा जीवित चूहों में कोलाई, स्थानिक और लौकिक readout प्राप्त का उपयोग BLI IVIS प्रणाली के साथ प्रदर्शन.
Protocol
Discussion
जीन थेरेपी के संदर्भ में, रोगियों को चिकित्सीय जीन की डिलीवरी के लिए जैविक एजेंटों के उपयोग महान 3-5 वादा दिखाया है. वायरस की तरह, जीवाणुओं की जन्मजात जैविक गुणों कोशिकाओं या ऊतकों को कैंसर के संदर्भ …
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखकों के लिए यूरोपीय आयोग के सातवें फ्रेमवर्क (PIOF-GA-2009-२,५५,४६६) कार्यक्रम और आयरिश स्वास्थ्य अनुसंधान बोर्ड (HRA_POR/2010/138) से इस पांडुलिपि के लिए प्रासंगिक समर्थन को स्वीकार करना चाहते हैं ई. लक्स टैग. कोलाई डॉ. Cormac Gahan, यूनिवर्सिटी कॉलेज कॉर्क से एक तरह का उपहार था.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| 4T1 cell line | ATCC | CRL-2539 | Syngeneic breast cancer model derived from a spontaneously arising BALB/c mammary tumor |
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium |
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | Phosphate Buffered Saline |
| Xenogen IVIS | Caliper Life Sciences | IVIS 100 for 2D imaging; IVIS Spectrum for 3D. | |
| Luria Broth Miller (LB) | Sigma-Aldrich | L2542 | Growth medium for E. coli |
| Erythromycin | Sigma-Aldrich | E5389 | Antibiotic |
| Streptomycin | Sigma-Aldrich | S9137 | Antibiotic |
| MF1nu/nu mice | Harlan (UK) | 069(nu)/070(nu/+) | Hsd:Athymic Nude-Foxn1nu |
| Balb/c mice | Harlan (UK) | 066 | Haplotype: H-2d |
| Gavage needle | Vet-tech Solutions (UK) | DE009 | 22G x 38mm straight gavage needle |
| Syringe for IV injection | BD BioSciences | 309309 – 1 ml | Insulin syringe with 28 G x ½ inch micro-fine IV needle. |
| Syringe for tumor inoculation | Braun | 9161376V | Omnifix 26 G x ½ inch needle |
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