زرع مثلي الشريان الأورطي في الفئران لدراسة أمراض الأوعية الدموية
Summary
وصفنا تقنية التي زرعها قسم من الشريان الأورطي البطني من الماوس orthotopically إلى أسفل الشرايين الكلوية في مستلم خيفي أو مسانج. هذه التقنية يمكن أن تكون مفيدة في الدراسات التي يعتبر زرع الشرايين كبيرة من حجم موحد المفيد.
Abstract
ويعتقد عموما الإجراءات التي تنطوي على الأوعية الدموية في anastomoses الماوس لتكون صعبة وتعتمد إلى حد كبير على مهارة الجراح الفردية. هذا صحيح إلى حد كبير، ولكن هناك عددا من المبادئ الهامة التي يمكن أن تقلل من صعوبة هذه الإجراءات وتعزيز التكاثر. زرع مثلي الأبهر هو إجراء الممتازة التي لتعلم هذه المبادئ لأنها تنطوي على اثنين فقط من نهاية إلى نهاية anastomoses، ولكنها تتطلب تقنية جيدة خياطة والتعامل مع السفن لنجاح ثابت. يبدأ هذا الإجراء مع شراء بطول الشريان الأورطي البطني من حيوان المانحة، تليها شعبة من الشريان الأورطي الأصلي في المتلقي. ثم يتم وضع الشريان الأورطي شراؤها بين طرفي المقسمة الشريان الأورطي المستفيدة وخياطة في مكانها باستخدام نهاية إلى نهاية anastomoses. لتحقيق هذا الهدف يتطلب بنجاح على درجة عالية من التركيز، والأدوات الجيدة، مطرد من ناحية، وتقدير مدى سهولةيمكن أن تتلف الأوعية الدموية على فأرة الحاسوب، مما أدى إلى تجلط الدم. تعلم هذه المبادئ أهمية هو ما يشغل معظم وقته للمبتدئين عندما تعلم المجهرية في القوارض الصغيرة. طوال هذا البروتوكول، نشير إلى هذه النقاط المهمة. ويمكن استخدام هذا النموذج لدراسة أمراض الأوعية الدموية في مجموعة متنوعة من النظم التجريبية المختلفة 1-8. في سياق المعروضة هنا، وغالبا ما تستخدم لدراسة ما بعد زرع أمراض الأوعية الدموية، مشتركة على المدى الطويل مضاعفات زرع الأعضاء الصلبة التي تضخم باطنة يحدث داخل طعم خيفي. والميزة الرئيسية لهذا النموذج هو أنه يسهل التحليلات الكمية والمظهرية السفينة المزروعة تقع متجاورة إلى السفينة الذاتية، والتي يمكن أن تكون بمثابة عنصر تحكم إضافية 9. غالبا ما يتم استخدام هذه التقنية هو موضح هنا للالفئران وزنها 18-25 جرام. تراكمت لدينا خبرة أكثر من مستخدما في ذلك C57BL/6J، BALB / CJ، وسلالات C3H/HeJ.
Protocol
Representative Results
Discussion
نماذج الماوس من زرع الأبهر توفير عدد من المزايا بشكل جيد للغاية لأن تعريف الفئران immunogenetically 9،12،13، ويمكن التلاعب بها بسهولة أنها لتغيير التعبير عنها من جينات معينة، إذا رغبت في ذلك. كما ذكر في المقدمة، جراحة الأوعية الدموية في الماوس هو أكثر صعوبة من معظم النما?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وقد تم تمويل هذا العمل من قبل الموارد الأساسية للمركز NIH اوبراين P30 (DK 079337).
Materials
| Item | Company | Catalog No. |
| Vascular Clamps | Fine Science Tools | 00396-01 (Size B-1) |
| Dumont Forceps | Fine Science Tools | 11293-00 |
| 10-0 Needled microsuture | AROSurgical | TK-107038 |
| Straight scissors | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5620 |
| Low temperature cauterizer | Beaver-Visitec International | 8441000 |
| Self retaining retractor | World Precision Instruments | 14240 |
Riferimenti
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis. J. Heart Lung Transpl. 18, 946-951 (1999).
- Calise, D., et al. Orthotopic aortic transplantation in rodents by the sleeve technique: a model system for the study of graft vascular disease. Transpl. Proc. 33, 2369-2370 (2001).
- Thomsen, M., et al. An orthotopic aortic graft mouse model to study the immunopathology of chronic vascular rejection. Transpl. Proc. 34, 2833-2835 (2002).
- Benza, R. L., George, J. F. Aortic graft transplantation in mice. J. Heart Lung Transpl. 21, 1319-1321 (2002).
- Chereshnev, I., et al. Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation. The Journal of surgical research. 111, 171-176 (2003).
- Cho, H. R., et al. Improved surgical technique for heterotopic aortic transplantation in mice. J. Korean Med. Sci. 22, 12-15 (2007).
- Zhong, R. Organ transplantation in mice: current status and future prospects. Microsurgery. 19, 52-55 (1999).
- George, J. F., Pinderski, L. J., Litovsky, S., Kirklin, J. K. Of mice and men: mouse models and the molecular mechanisms of post-transplant coronary artery disease. J. Heart Lung Transpl. 24, 2003-2014 (2005).
- Gorska, P. Principles in laboratory animal research for experimental purposes. Med Sci Monit. 6, 171-180 (2000).
- Landi, M. S., Kreider, J. W., Lang, C. M., Bullock, L. P. Effects of shipping on the immune function in mice. Am. J. Vet. Res. 43, 1654-1657 (1982).
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Chen, B., et al. Carbon monoxide rescues heme oxygenase-1-deficient mice from arterial thrombosis in allogeneic aortic transplantation. Am. J. Pathol. 175, 422-429 (2009).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transpl. Proc. 5, 733-735 (1973).
- Chang, E. I., et al. Vascular anastomosis using controlled phase transitions in poloxamer gels. Nature medicine. 17, 1147-1152 (2011).
