Orthotope Aorta Transplantatie in Muizen voor de Studie van vasculaire aandoeningen
Summary
We beschrijven een techniek waarbij een deel van de abdominale aorta van een muis getransplanteerd orthotopically is om net onder de nierslagaders in een allogene of syngene ontvanger. Deze techniek kan nuttig zijn in studies waarin transplantatie van grote slagaders van gelijke grootte is als voordelig.
Abstract
Vasculaire procedures waarbij anastomosen in de muis wordt algemeen gedacht moeilijk en sterk afhankelijk van de vaardigheid van de individuele chirurg. Dit geldt grotendeels, maar er zijn een aantal belangrijke principes die de moeilijkheidsgraad van deze procedures kan verminderen en reproduceerbaarheid. Orthotopische aorta transplantatie is een uitstekende procedure om deze principes leren omdat het alleen twee end-to-end anastomose, maar vereist een goede hechting techniek en behandeling van de vaartuigen verenigbaar succes. Deze procedure begint met het verkrijgen van een stuk abdominale aorta van een donordier, gevolgd door splitsing van het natieve aorta in de ontvanger. De verkregen aorta wordt dan geplaatst tussen de verdeelde uiteinden van de ontvanger en aorta gehecht vast met end-to-end anastomose. Om dit te bereiken doel met succes een hoge mate van concentratie, goed gereedschap, een vaste hand en een appreciatie van vereist hoe gemakkelijk devasculatuur van een muis kunnen worden beschadigd, waardoor trombose. Het leren van deze belangrijke principes is wat beslaat het grootste deel van de tijd de beginners bij het leren van microchirurgie bij kleine knaagdieren. Gedurende dit protocol, verwijzen we naar deze belangrijke punten. Dit model kan worden gebruikt om vasculaire ziekte te bestuderen in verschillende experimentele systemen 1-8. In de context hier wordt meestal gebruikt voor de studie van post-transplantatie vaatziekten, een lange-termijn complicatie van een orgaantransplantatie waarin intimale hyperplasie optreedt in de allograft. Het belangrijkste voordeel van het model is dat het kwantitatieve morfometrische analyse vergemakkelijkt en het getransplanteerde vat ligt grenzend aan het endogene vat, dat kan dienen als extra controle 9. De techniek hier wordt het meest gebruikt voor muizen met een gewicht 18 tot 25 gram. We hebben opgebouwd de meeste van onze ervaring in het gebruik van de C57BL/6J, BALB / CJ en C3H/HeJ stammen.
Protocol
Representative Results
Discussion
Muismodellen van aorta transplantatie een aantal voordelen omdat muizen goed immunogenetically 9,12,13 gedefinieerd, en ze kunnen gemakkelijk worden gemanipuleerd om de expressie van specifieke genen te wijzigen, indien gewenst. Zoals vermeld in de inleiding, vaatchirurgie in de muis is moeilijker dan de meeste modellen vanwege de grootte van de schepen. Zelfs de grote slagaders, zoals de aorta gewoonlijk niet meer dan 100-200 iM in binnendiameter, zodat het manipuleren van deze schepen is een aanzienlijke ho…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd gefinancierd door de kern bron van de NIH P30 O'Brien centrum (DK 079337).
Materials
| Item | Company | Catalog No. |
| Vascular Clamps | Fine Science Tools | 00396-01 (Size B-1) |
| Dumont Forceps | Fine Science Tools | 11293-00 |
| 10-0 Needled microsuture | AROSurgical | TK-107038 |
| Straight scissors | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5620 |
| Low temperature cauterizer | Beaver-Visitec International | 8441000 |
| Self retaining retractor | World Precision Instruments | 14240 |
Riferimenti
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis. J. Heart Lung Transpl. 18, 946-951 (1999).
- Calise, D., et al. Orthotopic aortic transplantation in rodents by the sleeve technique: a model system for the study of graft vascular disease. Transpl. Proc. 33, 2369-2370 (2001).
- Thomsen, M., et al. An orthotopic aortic graft mouse model to study the immunopathology of chronic vascular rejection. Transpl. Proc. 34, 2833-2835 (2002).
- Benza, R. L., George, J. F. Aortic graft transplantation in mice. J. Heart Lung Transpl. 21, 1319-1321 (2002).
- Chereshnev, I., et al. Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation. The Journal of surgical research. 111, 171-176 (2003).
- Cho, H. R., et al. Improved surgical technique for heterotopic aortic transplantation in mice. J. Korean Med. Sci. 22, 12-15 (2007).
- Zhong, R. Organ transplantation in mice: current status and future prospects. Microsurgery. 19, 52-55 (1999).
- George, J. F., Pinderski, L. J., Litovsky, S., Kirklin, J. K. Of mice and men: mouse models and the molecular mechanisms of post-transplant coronary artery disease. J. Heart Lung Transpl. 24, 2003-2014 (2005).
- Gorska, P. Principles in laboratory animal research for experimental purposes. Med Sci Monit. 6, 171-180 (2000).
- Landi, M. S., Kreider, J. W., Lang, C. M., Bullock, L. P. Effects of shipping on the immune function in mice. Am. J. Vet. Res. 43, 1654-1657 (1982).
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Chen, B., et al. Carbon monoxide rescues heme oxygenase-1-deficient mice from arterial thrombosis in allogeneic aortic transplantation. Am. J. Pathol. 175, 422-429 (2009).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transpl. Proc. 5, 733-735 (1973).
- Chang, E. I., et al. Vascular anastomosis using controlled phase transitions in poloxamer gels. Nature medicine. 17, 1147-1152 (2011).
