Orthotopen Aortic Transplantation in Mäuse für das Studium der Vascular Disease
Summary
Wir beschreiben ein Verfahren, bei dem ein Abschnitt der Bauchaorta von einer Maus transplantiert orthotopisch wird knapp unterhalb der Nierenarterien in einer allogenen oder syngenen Empfänger. Diese Technik kann in Untersuchungen, bei denen die Transplantation von grossen Arterien von einheitlicher Größe als vorteilhaft erachtet wird nützlich.
Abstract
Vaskulären Verfahren, die in der Maus Anastomosen gelten im Allgemeinen als schwierig und hängt stark von der Geschicklichkeit des einzelnen Chirurgen. Dies ist weitgehend richtig, aber es gibt eine Reihe von wichtigen Prinzipien, die die Schwierigkeit dieser Verfahren reduzieren und erhöhen Reproduzierbarkeit. Orthotopen aortischen Transplantation ist ein ausgezeichnetes Verfahren, in dem diese Prinzipien lernen, weil es nur zwei End-zu-End-Anastomosen beinhaltet, erfordert jedoch eine gute Nahttechnik und Handhabung der Gefäße für konsistente Erfolg. Dieses Verfahren beginnt mit der Beschaffung einer Länge von Bauchaorta von einem Spender Tier, durch Teilung des nativen Aorta in den Empfänger verfolgt. Die Aorta beschafft wird dann zwischen den geteilten Enden des Empfängers Aorta platziert und vernäht einrastet mit Ende-zu-Ende-Anastomosen. Um dies zu erreichen dieses Ziel erfolgreich erfordert ein hohes Maß an Konzentration, gute Werkzeuge, eine ruhige Hand und eine Aufwertung, wie leicht dieGefäßsystem eines Maus können beschädigt werden, was zu Thrombose. Das Erlernen dieser wichtigen Grundsätze ist es, was nimmt den größten Teil der Anfänger an der Zeit, wenn das Lernen Mikrochirurgie in kleine Nagetiere. In diesem Protokoll, verweisen wir auf diesen wichtigen Punkten. Dieses Modell kann verwendet werden, um vaskuläre Krankheit in einer Vielzahl von verschiedenen experimentellen Systemen 1-8 untersuchen. Im Rahmen abgebildet, wird es häufig für die Untersuchung von post-Transplantat Gefäßerkrankung, einer langfristigen gemeinsamen Komplikation der Organtransplantation, bei dem Intimahyperplasie erfolgt im Allotransplantat verwendet. Der primäre Vorteil des Modells ist, dass es quantitative morphometrischen Analysen erleichtert und das transplantierte Gefäßes liegt angrenzend an die endogenes Gefäß, welches als zusätzliche Kontrolle 9 dienen kann. Die Technik hier gezeigt wird häufig für Mäuse mit einem Gewicht 18-25 Gramm verwendet. Wir haben die meisten unserer Erfahrung gesammelt mit dem C57BL/6J, BALB / cJ und C3H/HeJ Stämme.
Protocol
Representative Results
Discussion
Mausmodellen aortischen Transplantation bieten eine Reihe von Vorteilen, da Mäuse sehr gut immunogenetically 9,12,13 definiert, und sie können leicht manipuliert werden, um ihre Expression spezifischer Gene zu verändern, falls gewünscht. Wie in der Einleitung erwähnt, ist der Gefäßchirurgie in der Maus schwieriger als die meisten Modelle aufgrund der Größe der Gefäße. Selbst die großen Arterien, wie der Aorta sind in der Regel nicht mehr als 100-200 um Innendurchmesser, so Manipulation dieser Schi…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Diese Arbeit wurde durch den Kern Ressource des NIH P30 O'Brien Zentrum (DK 079.337) finanziert.
Materials
| Item | Company | Catalog No. |
| Vascular Clamps | Fine Science Tools | 00396-01 (Size B-1) |
| Dumont Forceps | Fine Science Tools | 11293-00 |
| 10-0 Needled microsuture | AROSurgical | TK-107038 |
| Straight scissors | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5620 |
| Low temperature cauterizer | Beaver-Visitec International | 8441000 |
| Self retaining retractor | World Precision Instruments | 14240 |
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