השתלת אב עורקים בעכברי orthotopic לחקר מחלת כלי דם
Summary
אנו מתארים טכניקה שבה קטע של אב העורקים בבטן מעכבר הושתל orthotopically ממש מתחת לעורקי הכליה בנמען אלוגנאית או syngeneic. טכניקה זו יכולה להיות שימושית במחקרים בם השתלה של עורקים גדולים של גודל אחיד נחשבת יתרון.
Abstract
נהלי כלי דם המעורבים anastomoses בעכבר נחשבים בדרך כלל להיות קשה ותלוי מאוד במיומנותו של מנתח הפרט. זה בעיקר נכון, אבל יש מספר העקרונות חשובים שיכול להפחית את הקושי של נהלים אלה ולשפר את השחזור. השתלת אב העורקים orthotopic היא הליך שבו מצוין ללמוד עקרונות אלה משום שהיא כוללת רק שני anastomoses מקצה לקצה, אבל דורשת טכניקה טובה תפירה וטיפול בכלי להצלחה בקנה אחד. הליך זה מתחיל ברכש של אורך של אב עורקים בבטן מחית תורם, ואחרי החלוקה של אב עורקי היליד בנמען. אז אב עורקי הרכש ממוקם בין הקצוות החצויים של אב עורקי הנמען ונתפר למקומו באמצעות anastomoses מקצה לקצה. כדי להשיג מטרה זו דורשת רמה גבוהה של ריכוז, כלים טובים, יד יציבה, והערכה להצלחה באיזו קלותמערכת כלי דם של עכבר יכולה להיות פגומה, וכתוצאה מפקקת. למידת העקרונות חשובים האלה היא מה שתופס את רוב הזמן של המתחילים כאשר למידת microsurgery במכרסמים קטנים. לאורך פרוטוקול זה, אנו מתייחסים לנקודות חשובות אלה. מודל זה יכול לשמש כדי לחקור מחלת כלי דם במגוון רחב של מערכות ניסיוניות שונות 1-8. בהקשר שמוצג כאן, זה משמש לרוב לחקר מחלה לאחר השתלת כלי דם, סיבוכים ארוכי טווח שכיחים של השתלת איבר מוצקה שבי היפרפלזיה intimal מתרחשת בתוך השתל. היתרון העיקרי של המודל הוא שהוא מאפשר ניתוחי מורפומטריות כמותיים והכלי המושתל טמון רציף לכלי אנדוגני, שיכול לשמש כשליטה נוספת 9. הטכניקה המוצגת כאן משמשת לרוב לעכברים במשקל 18-25 גרם. צברנו את רוב הניסיון שלנו באמצעות C57BL/6J, BALB / CJ, וזני C3H/HeJ.
Protocol
Representative Results
Discussion
מודלי עכבר של אב עורקי השתלה לספק מספר היתרונות, כי עכברים הם מאוד מוגדרים היטב immunogenetically 9,12,13, והם יכולים לטפל בקלות לשנות את הביטוי של גנים ספציפיים שלהם, אם תרצו בכך. כפי שצוין במבוא, כירורגיה של כלי דם בעכבר היא יותר קשה מאשר רוב הדגמים בגלל גודלו של כלי השיט. א…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו מומנה על ידי משאב הליבה של NIH P30 אובריאן המרכז (DK 079337).
Materials
| Item | Company | Catalog No. |
| Vascular Clamps | Fine Science Tools | 00396-01 (Size B-1) |
| Dumont Forceps | Fine Science Tools | 11293-00 |
| 10-0 Needled microsuture | AROSurgical | TK-107038 |
| Straight scissors | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5620 |
| Low temperature cauterizer | Beaver-Visitec International | 8441000 |
| Self retaining retractor | World Precision Instruments | 14240 |
Riferimenti
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis. J. Heart Lung Transpl. 18, 946-951 (1999).
- Calise, D., et al. Orthotopic aortic transplantation in rodents by the sleeve technique: a model system for the study of graft vascular disease. Transpl. Proc. 33, 2369-2370 (2001).
- Thomsen, M., et al. An orthotopic aortic graft mouse model to study the immunopathology of chronic vascular rejection. Transpl. Proc. 34, 2833-2835 (2002).
- Benza, R. L., George, J. F. Aortic graft transplantation in mice. J. Heart Lung Transpl. 21, 1319-1321 (2002).
- Chereshnev, I., et al. Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation. The Journal of surgical research. 111, 171-176 (2003).
- Cho, H. R., et al. Improved surgical technique for heterotopic aortic transplantation in mice. J. Korean Med. Sci. 22, 12-15 (2007).
- Zhong, R. Organ transplantation in mice: current status and future prospects. Microsurgery. 19, 52-55 (1999).
- George, J. F., Pinderski, L. J., Litovsky, S., Kirklin, J. K. Of mice and men: mouse models and the molecular mechanisms of post-transplant coronary artery disease. J. Heart Lung Transpl. 24, 2003-2014 (2005).
- Gorska, P. Principles in laboratory animal research for experimental purposes. Med Sci Monit. 6, 171-180 (2000).
- Landi, M. S., Kreider, J. W., Lang, C. M., Bullock, L. P. Effects of shipping on the immune function in mice. Am. J. Vet. Res. 43, 1654-1657 (1982).
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Chen, B., et al. Carbon monoxide rescues heme oxygenase-1-deficient mice from arterial thrombosis in allogeneic aortic transplantation. Am. J. Pathol. 175, 422-429 (2009).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transpl. Proc. 5, 733-735 (1973).
- Chang, E. I., et al. Vascular anastomosis using controlled phase transitions in poloxamer gels. Nature medicine. 17, 1147-1152 (2011).
