Transplante ortotópico de aorta em camundongos para o Estudo da Doença Vascular
Summary
Descrevemos uma técnica em que uma secção da aorta abdominal de um rato é transplantado ortotopicamente para um pouco abaixo das artérias renais de um receptor alogénico ou singeneicos. Esta técnica pode ser útil em estudos em que o transplante de grandes artérias de tamanho uniforme é considerada vantajosa.
Abstract
Procedimentos vasculares que envolvem anastomoses no ratinho são geralmente pensado para ser difícil e muito dependente da habilidade do cirurgião. Isto é principalmente verdadeiro, mas há um certo número de princípios importantes que podem reduzir a dificuldade de esses procedimentos e melhorar a reprodutibilidade. Transplante ortotópico aórtica é um procedimento excelente para aprender esses princípios, porque envolve apenas dois end-to-end anastomoses, mas requer boa técnica de sutura e movimentação dos navios para o sucesso consistente. Este procedimento começa com a obtenção de um comprimento de aorta abdominal de um animal dador, seguido pela divisão da aorta nativa do receptor. A aorta obtido é então colocado entre as extremidades divididas da aorta destinatário e suturados no lugar usando end-to-end anastomoses. Para atingir esse objetivo com sucesso requer um alto grau de concentração, boas ferramentas, uma mão firme, e uma apreciação de quão facilmente avasculatura de um rato pode ser danificado, resultando em trombose. Aprender esses princípios importantes é o que ocupa a maior parte do tempo o iniciante no aprendizado de microcirurgia em pequenos roedores. Ao longo deste protocolo, que se referem a esses pontos importantes. Este modelo pode ser utilizado para estudar a doença vascular numa variedade de diferentes sistemas experimentais 1-8. No contexto mostrado aqui, que é mais frequentemente usado para o estudo de pós-transplante, doença vascular, uma complicação a longo prazo comum de transplantação de órgãos sólidos nos quais a hiperplasia da íntima ocorre dentro do aloenxerto. A principal vantagem do modelo é que ele facilita a análise morfométrica quantitativa e o vaso transplantado fica contíguo ao vaso endógeno, que pode servir como um controle adicional 9. A técnica mostrada aqui é mais frequentemente usado para ratos pesando 18-25 gramas. Temos acumulado mais de nossa experiência usando o C57BL/6J, BALB / cJ e linhagens C3H/HeJ.
Protocol
Representative Results
Discussion
Modelos do rato do transplante de aorta fornecer um número de vantagens, porque os ratinhos são muito bem definida imunogeneticamente 9,12,13, e eles podem ser facilmente manipuladas para alterar a sua expressão de genes específicos, se desejado. Conforme referido na introdução, a cirurgia vascular em ratos é muito mais difícil do que a maioria dos modelos por causa do tamanho dos recipientes. Até mesmo os grandes vasos, como a aorta são geralmente não mais de 100-200 um de diâmetro interior, de m…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado pelo recurso núcleo do P30 NIH O'Brien centro (DK 079.337).
Materials
| Item | Company | Catalog No. |
| Vascular Clamps | Fine Science Tools | 00396-01 (Size B-1) |
| Dumont Forceps | Fine Science Tools | 11293-00 |
| 10-0 Needled microsuture | AROSurgical | TK-107038 |
| Straight scissors | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5620 |
| Low temperature cauterizer | Beaver-Visitec International | 8441000 |
| Self retaining retractor | World Precision Instruments | 14240 |
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