Summary

Damar Hastalığı Çalışmaları Farelerde Ortotopik Aort Nakli

Published: November 28, 2012
doi:

Summary

Bir fare abdominal aort bir bölüm sadece bir allojenik veya sinjenik alıcı olarak renal arterler aşağıda orthotopically transplante edildiği bir yöntem açıklanmaktadır. Bu teknik, birörnek büyük arter nakli avantajlı olarak kabul edilir olan çalışmalarda yararlı olabilir.

Abstract

Fare anastomozlar içeren vasküler prosedürleri genellikle zordur ve cerrahın beceri bağımlı olduğu düşünülmektedir. Bu büyük ölçüde doğrudur, ancak bu işlemlerin zorluğu azaltmak ve tekrarlanabilirliği artırabilirsiniz önemli ilkeleri bir dizi vardır. Ortotopik aort nakli sadece iki uç-uca anastomoz içerir çünkü bu ilkeleri öğrenmek için hangi mükemmel bir yöntemdir, ancak tutarlı başarı için iyi bir dikiş tekniği ve gemilerin taşıma gerektirir. Bu işlem alıcının içinde yerli aorta bölümü tarafından izlenen bir donör hayvan abdominal aort uzunluğu, alımı ile başlar. Tedarik aorta sonra alıcının aort bölünmüş uçları arasına yerleştirilen ve uç uca anastomoz kullanarak yerine sütüre edilir. Bu hedefe başarıyla konsantrasyon yüksek derecede, iyi araçlar, sarsılmaz bir el ve bir takdir gerektirir gerçekleştirmek için ne kadar kolayBir fare damarlarda tromboz sonuçlanan, hasar görebilir. Bu önemli ilkeleri Öğrenme küçük kemirgenler mikrocerrahi öğrenme zaman en acemi zaman kaplar budur. Bu protokol boyunca, bu önemli noktaları bakın. Bu model, farklı deneysel sistemlerde 1-8, çeşitli damar hastalığı araştırmak için kullanılabilir. Burada gösterilen bağlamda, en sık transplant sonrası damar hastalığı, allograft intimal hiperplazi içinde meydana geldiği, organ naklinde bir ortak uzun süreli komplikasyon incelenmesi için kullanılmıştır. Modelin birincil avantajı kantitatif morfometrik analizler kolaylaştırır ve nakledilen damar ek bir denetim 9 olarak hizmet verebilir endojen gemi, bitişik yatıyor olmasıdır. Burada gösterilen teknik, genellikle 18-25 gram ağırlığındaki fareler için kullanılır. Biz C57BL/6J, BALB / CJ ve C3H/HeJ suşları kullanılarak tecrübemizi en birikmiştir.

Protocol

1. Preoperatif Hazırlık Cerrahi yöntemler, dikkatli yapılması ne olursa olsun, önemli bir stres sonucu. Bu tür stresin etkilerini en aza indirmek için ve rezerv maksimize etmek, hayvanların kullanımı 10,11 önce en az 72 saat süreyle vivaryum tutulmalıdır. Cerrahi aletler, gazlı bez ve bezlerden steril olmalıdır. Bu araçlar temas dikiş veya ameliyat alanının yalnızca kriteri sağlayan steril eldiven kullanmak için gerekli değildir. Hemostaz için, sıkma …

Representative Results

Şekil 1 bir aort greft gösterir. Beyaz oklar dikiş hatları göstermektedir. Bir patent greft görünür bir darbe gösterecektir. Şekil 2. Alıcının sağkalım 56 gün süreyle takip edildiği tipik bir deney gösterir. Bir grup BALB / c aort ile nakledilen (C57BL / 6 x FVB) wild-tip alıcı fareler oluşuyordu. "KO" belirlenen diğer grup, 24 saat içinde greft trombozu sonuçlanan heme oksijenaz-1, ifade eksik alıcıları (C57BL / 6 x FVB) oluşmaktadır. Özellikle,…

Discussion

Fareler çok iyi immunogenetically 9,12,13 tanımlanmış olup, istenirse kolayca, belirli genlerin kendi ifadesini değiştirmek için manipüle edilebilir, çünkü aort nakli Fare modellerinde bir çok avantaj sağlamaktadır. Girişte belirtildiği gibi, fare, vasküler cerrahi, çünkü gemilerin büyüklüğü en modelleri daha zordur. Böyle aorta gibi bile büyük arter, genellikle iç çapı 100-200 mikron fazla vardır; böylece bu gemilerin manipüle beceri ve maharet 8,14 önemli miktar…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu çalışma NIH P30 O'Brien merkezi (DK 079.337) çekirdek kaynak tarafından finanse edildi.

Materials

Item Company Catalog No.
Vascular Clamps Fine Science Tools 00396-01 (Size B-1)
Dumont Forceps Fine Science Tools 11293-00
10-0 Needled microsuture AROSurgical TK-107038
Straight scissors Roboz Surgical Instrument Co. RS-5620
Low temperature cauterizer Beaver-Visitec International 8441000
Self retaining retractor World Precision Instruments 14240

Riferimenti

  1. Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
  2. Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis. J. Heart Lung Transpl. 18, 946-951 (1999).
  3. Calise, D., et al. Orthotopic aortic transplantation in rodents by the sleeve technique: a model system for the study of graft vascular disease. Transpl. Proc. 33, 2369-2370 (2001).
  4. Thomsen, M., et al. An orthotopic aortic graft mouse model to study the immunopathology of chronic vascular rejection. Transpl. Proc. 34, 2833-2835 (2002).
  5. Benza, R. L., George, J. F. Aortic graft transplantation in mice. J. Heart Lung Transpl. 21, 1319-1321 (2002).
  6. Chereshnev, I., et al. Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation. The Journal of surgical research. 111, 171-176 (2003).
  7. Cho, H. R., et al. Improved surgical technique for heterotopic aortic transplantation in mice. J. Korean Med. Sci. 22, 12-15 (2007).
  8. Zhong, R. Organ transplantation in mice: current status and future prospects. Microsurgery. 19, 52-55 (1999).
  9. George, J. F., Pinderski, L. J., Litovsky, S., Kirklin, J. K. Of mice and men: mouse models and the molecular mechanisms of post-transplant coronary artery disease. J. Heart Lung Transpl. 24, 2003-2014 (2005).
  10. Gorska, P. Principles in laboratory animal research for experimental purposes. Med Sci Monit. 6, 171-180 (2000).
  11. Landi, M. S., Kreider, J. W., Lang, C. M., Bullock, L. P. Effects of shipping on the immune function in mice. Am. J. Vet. Res. 43, 1654-1657 (1982).
  12. Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
  13. Chen, B., et al. Carbon monoxide rescues heme oxygenase-1-deficient mice from arterial thrombosis in allogeneic aortic transplantation. Am. J. Pathol. 175, 422-429 (2009).
  14. Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transpl. Proc. 5, 733-735 (1973).
  15. Chang, E. I., et al. Vascular anastomosis using controlled phase transitions in poloxamer gels. Nature medicine. 17, 1147-1152 (2011).
check_url/it/4338?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Guo, L., Agarwal, A., George, J. F. Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease. J. Vis. Exp. (69), e4338, doi:10.3791/4338 (2012).

View Video