초점 대뇌 국소 빈혈에 조기 허혈성 공차를 유도하기 위해 적절한 전처리 자극으로 양측 경동맥 동맥 폐색
Summary
증거가 축적되고, 그 허혈 (PC) – 뇌에 대한 비 손상 허혈성 도전 – 후속 손상 허혈성 모욕을 과도 전압 보호 기능을 부여. 우리는 C57BL6 / J 생쥐의 일시적인 국소 대뇌 허혈 (중간 대뇌 동맥 폐색, MCAO에 의한)에 초기 허혈 내성 (IT) 유도 컨디셔닝 자극으로 양측 경동맥 폐색 (BCCAO)를 설립했다.
Abstract
증거가 축적되고, 그 허혈 – 뇌에 대한 비 손상 허혈성 도전 – 후속 손상 허혈성 모욕을 과도 전압 보호 기능을 부여. 우리는 C57BL6 / J 생쥐의 일시적인 국소 대뇌 허혈에 초기 허혈 내성을 유도하는 사전 조건 자극으로 양측 경동맥 폐색을 설립했다. 이 비디오에서는, 우리는이 연구에 사용되는 방법을 보여줍니다.
Introduction
허혈성 뇌졸중은 높은 사망률과 막대한 사회 경제적 부담이 1 병이다. 최근 수십 년에 걸쳐 집중적 인 실험 및 임상 과학적인 노력에도 불구하고, 급성 허혈성 뇌졸중 환자에 대한 치료 옵션이 매우 제한 남아 있습니다. 그와는 대조적으로, 선진국의 노인의 비율 증가는 크게 다음 수십 년 3 허혈성 뇌졸중 환자의 발생률과 유병률이 증가합니다. 따라서 허혈성 뇌졸중 환자의 새로운 치료 전략을 눌러 필요가있다.
한 가지 방법은 손상 자극에 대처하는 뇌의 내인성 적응 메커니즘 더욱 이해를 얻을 것입니다. 이 뇌 유래 신경 보호는 허혈 (PC) 또는 허혈성 공차 (IT)로 알려진 뇌에 적용되는 비 피해 유해 자극은 일시적인 저항을 유도하는 현상을 설명합니다이후 손상 허혈성 모욕 4에. IT 초기 PC 후 몇 시간 분 이내에 발생하며 4 발생 몇 시간의 대기 시간을 필요로하는 IT 지연 : IT는 두 개의 서로 다른 시간 창에 발생합니다.
지금까지 뇌의 IT에 대한 연구는 IT 연기에 초점을 맞추고있다. 훨씬 덜은 IT 초기의 메커니즘에 알려져있다. 본 연구의 목적은 적절한 PC 자극으로, IT를 지연 유도하기 위해 설립 자극 유도하는 양측 경동맥 폐색 (BCCAO)를 설정하는 것입니다 일시적인 국소 대뇌 허혈 (중간 대뇌 동맥 폐색에 의해 유도, MCAO)에 서둘러 C57BL6에 / J 생쥐.
두 수술시 (BCCAO 및 MCAO), 레이저 도플러 flowmetry (LDF)에 의한 뇌 혈류의 모니터링 (CBF)가 수행되었다.
BCCAO는 마취와 자발적 호흡 생쥐에서 수행되었다. 두 경동맥 (CCA)가 노출되었다60에 대한 폐색 초 재관류 5 분 뒤에. 이 BCCAO / 재관류 순서는 두 번 반복되었다. 수술 후, 마우스는 빨리 회복 및 기능 손상의 흔적을 보여 주었다. BCCAO 프로토콜은 뇌의 지연 세포의 죽음을 초래하지 않았다 위에서 설명한 것을 배제하기 위해, 우리는에 BCCAO 후 72 시간 염색 TDT-중재 dUTP-비오틴 닉 엔드 라벨 (TUNEL) (또는 가짜 수술) 시행 별도 그룹입니다.
MCAO 5-7 설치류의 국소 대뇌 허혈의 유도 널리 사용되는 모델입니다. 수술 절차는 표준 운영 절차 (SOP) 8을 사용하여 수행 하였다. 왼쪽 CCA를 노출 한 후, 실리콘으로 덮인 모노 필라멘트는 그로 인하여 전방 대뇌 동맥 (ACA)까지 윌리스의 원형으로 내부 경동맥 (ICA)를 통해 진행하고 말초 CCA, 중간 대뇌 동맥의 기원 (에 도입되었다 MCA)은 정의 된 시간 동안 폐색되었다. 본 연구에서는일반적으로 선조체와 피질 뇌 영역을 포함 MCA 영토에서 허혈성 병변의 결과 MCAO의 사용 45 분.
본 연구에서는, 우리는 초기 IT는 PC 자극으로 BCCAO를 사용하는 임시 프로필을 분석 하였다. 우리의 데이터 BCCAO와 MCAO 사이의 최적의 시간 지연이 IT 30 분, 조기 유도하는 것을 지적했다.
이 비디오에서는, 우리는 모두 수술, 즉 BCCAO 및 MCAO의 데모를 제공합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
본 연구에서는, 우리는 BCCAO 세 시퀀스, 각각의 분 지속과 5 분 재관류 다음은, 서둘러을 유도하는 적절한 허혈성 PC 자극 것으로 나타났습니다.
또한, 우리는 사용 된 컨디셔닝 프로토콜이 더 주목할만한 수술 후 이환율과 함께 안전하고 사소한 침략 절차, 뇌 세포 사멸없이 사망의 흔적임을 증명하고있다. 여러 가지 컨디셔닝 프로토콜은 이전 6-7,12 설명하고있다. 기?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the instrument | Company | Catalogue number/model |
| Binocular surgical microscope | Zeiss | Stemi 2000 C |
| Light source for microscope | Zeiss | SteREO CL 1500 ECO |
| Heating pad with rectal probe | FST | 21061-10 |
| Stereotactic frame | David Kopf | Model 930 |
| Scissors | FST | 91460-11 |
| Dumont forceps #5 | FST | 11251-10 |
| Dumont forceps #7 | FST | 11271-30 |
| Mircovascular clamp | FST | 00398-02 |
| Clamp applicator | FST | 00072-14 |
| Springscissors | FST | 15372-62 |
| Needle holder | FST | 12010-14 |
| Needles | Feuerstein, Suprama | BER 562-20 |
| 5-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | |
| 7-0 silk suture | Feuerstein,Suprama | |
| 8-0 silk suture | Feuerstein, Suprama |
Riferimenti
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