La micro-injection d'insuline de l'hippocampe et<em> In vivo</emMicrodialyse> Test de la mémoire spatiale cours
Summary
Modulation de charge hippocampally-mémoire de travail spatiale par micro-injection directe intrahippocampique, accompagnée et suivie d'<em> In vivo</emMicrodialyse> pour les métabolites dans des animaux conscients et se comportent.
Abstract
Le métabolisme du glucose est un marqueur utile pour l'activité neuronale locale, formant la base de méthodes telles que l'imagerie par résonance 2-désoxyglucose et magnétique fonctionnelle. Cependant, l'utilisation de ces méthodes dans des modèles animaux nécessite une anesthésie et donc à la fois modifie l'état du cerveau et empêche mesures comportementales. Une autre méthode est l'utilisation de la microdialyse in vivo de prendre la mesure en continu des concentrations cérébrales fluides extracellulaires de métabolites du glucose, de lactate et connexes dans éveillé, animaux en liberté. Cette technique est particulièrement utile lorsqu'il est combiné avec des tâches visant à s'appuyer sur des régions spécifiques du cerveau et / ou de manipulation pharmacologique aiguë, par exemple, les mesures de l'hippocampe au cours d'une tâche de mémoire de travail spatiale (alternance spontanée) montrent une baisse de la glycémie extracellulaire et l'augmentation de lactate qui sont suggestive de 1,2 glycolyse accrue, et l'administration d'insuline à la fois intrahippocampique améliore la mémoire et augmente glycol hippocampelyse 3. Des substances telles que l'insuline peut être livré à l'hippocampe par la sonde de microdialyse même utilisé pour mesurer les métabolites. L'utilisation de l'alternance spontanée comme une mesure de la fonction hippocampique est conçu pour éviter tout confondre de motivation stressantes (p. ex footshock), de retenue ou de récompense (par exemple la nourriture), qui peuvent tous altérer l'exécution des tâches à la fois et le métabolisme, cette tâche fournit également un mesurer l'activité motrice qui permet de contrôler pour les effets non spécifiques de traitement. Ensemble, ces méthodes permettent la mesure directe des variables neurochimiques et régulant le comportement métabolique.
Protocol
Representative Results
Discussion
Toutes les solutions utilisées dans microdialyse doit être filtré immédiatement avant l'utilisation, en utilisant un filtre 0,2 um. Après l'insertion de la sonde dans la canule de guidage, d'observer afin de confirmer que l'écoulement est libre et collecte des échantillons est en cours. Si le débit s'arrête après l'insertion, la cause la plus probable des dommages à la membrane de la sonde causée par l'insuffisance des soins lors de l'insertion, et une sonde de frais doit êtr…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par le NIH / NIDDK (DK077106 à ECM).
Materials
The majority of reagents are standard laboratory grade and can be obtained from a supplier of choice. Similarly, equipment such as syringe pumps and tubing can be used from any of several manufacturers. Specific items used here for which details are important include: |
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| CMA 12 microdialysis probes | CMA/ Microdialysis | CMA-12-XXX | These are available in various membrane lengths and cutoffs, indicated by specific codes in the ‘XXX.’ |
| Human insulin (Humulin) | Eli Lilly | N/a | |
| Liquid swivel | Instech | 375/D/22QM | This specific swivel has very low torque and internal volume, as well as a nonreactive quartz lining. |
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