상처 치유의 생쥐 모델
Summary
생리와 병리 설정에서 치료 화합물을 평가하는 데 사용할 수있는 피부 상처 치유의 쥐 모델.
Abstract
상처 치유 및 복구는 인간의 삶에서 발생하는 가장 복잡한 생물학적 과정이다. 부상 후, 여러 생물 학적 경로가 활성화됩니다. 예를 들어, 당뇨병 환자에서 발생하는 손상 상처 치유, 같은 절단 등의 심각한 불리한 결과를 초래할 수 있습니다. 상처 복구를 촉진 새로운 에이전트를 개발하기 위해 증가 자극 그러므로 있습니다. 이러한 테스트는 이러한 종종 비실용적 돼지와 같은 큰 동물 모델에 국한되어 있습니다. 그들은 경제적 인 기계적인 조사를 허용 유전자 조작, 의무이기 때문에 쥐, 이상적인 전임상 모델을 나타냅니다. 그러나, 그것은 주로 수축을 통해 발생할 때 마우스 치유가 인간의 근본적으로 다른 상처. 우리의 생쥐 모델은 상처 주위에 부목을 통합하여이를 극복한다. 상처를 부목으로 복구 프로세스가 긴밀를 반영 상피, 세포 증식 및 혈관 신생, 그때 의존인간의 상처 치유의 생물학적 처리합니다. 일관성과 치료를 필요로하는 반면,이 쥐 모델은 복잡한 수술 기법을 포함, 예를 들어, 혈관 신생을 촉진하거나 염증을 억제 할 수 유망한 에이전트의 강력한 테스트를 할 수 없습니다. 두 개의 상처가 준비되어 더욱이, 각각의 마우스 시험 화합물과 같은 동물에 차량 제어 모두의 응용 프로그램을 사용, 자신의 제어 역할을합니다. 결론적으로, 우리는 인간의 그것과 비교할 상처 치유의 실제, 배우기 쉬운, 강력한 모델을 보여줍니다.
Introduction
손상된 상처 치유 중요한 병적 상태와 세계적으로 사망에 대한 책임이며, 이는 당뇨병 1,2의 환자에 특히 사실이다. 인간, 상처 치유는 3 중복 의미가있는 프로세스의 연속이다. 직후에 남긴 상처, 염증 프로세스가 시작됩니다. 염증 세포는 세포 증식, 이동 및 혈관 신생 과정을 촉진 인자를 놓습니다. 재 상피화 및 새로운 조직의 형성 이후에 같은 콜라겐 매트릭스 단백질의 세포 사멸하고 다시 조직을 모두 수반 개조의 단계가있다.
상처 치유의 복잡성은 현재 체외에서 복제 된이 동물 모델의 사용을 필요로 할 수 없습니다. 지금까지, 상처 치유 연구는 치료 과정은 동일하고 인간에게 비교를 보장하기 위해, 같은 돼지 같은 큰 동물 모델에 한정되어있다. 그러나 큰 애니을 사용하여이러한 연구를위한 LS 집에 어려울 항상 실제 4 수 없습니다 수 있습니다. 실험실 쥐 쉽게 유전자 5-7 역학적 조사 조작 할 수있는 경제적 인 동물 모델을 나타냅니다. 그러나 생쥐 상처 수축 8의 과정 차적으로 인해 인간의 다르게 치료. 이것은 부분적으로 인간에서 크게 결석 panniculus carnosus라는 광범위한 피하 횡문근 층 때문입니다. 마우스,이 근육 층은 피부가 독립적으로 깊은 근육의 이동 할 수 있으며 피부 아래에 입힐 수있는 총알의 급속한 수축에 대한 책임이 있습니다.
이 제한을 극복하기 위해, 쥐 상처 치유는 부목을 사용한다 (그림 1) 8,9에 의해 인간의 상처 치유를 복제하도록 구성 할 수 있습니다. 이 비디오에서 우리는 다시 epithelializa의 인간 프로세스를 상처 수축을 제거하고 더 가깝게 근사 splinted 쥐 상처 모델을 보여TION 및 새로운 조직의 형성. 이 모델에서 panniculus carnosus을 포함 두 개의 전층 절개는 마우스의 정중선의 양쪽에 배부 한에 생성됩니다. 실리콘 부목은 접착제의 도움으로 상처 주위에 배치하고 부목는 중단 된 봉합사로 고정되어 있습니다. 각 마우스함으로써 동물의 수를 줄이고, 하나의 상처를 치료하고 다른 차량 제어를받는과 함께 자신의 제어 역할을합니다. 국소 응용 프로그램에 따라 투명 폐쇄성 드레싱이 적용됩니다. 또한 국소 응용 프로그램 및 / 또는 상처 영역 10,11의 측정을 위해 필요한 경우 드레싱을 제거 할 수 있습니다. 에서 실험 완료, 상처 봉합, 형태 학적 구조와 신생 혈관의 정도는 면역에 의해 평가 될 수있다. 이 경제 모델을 수행하기 쉬운 또한 당뇨병이나 다른 pathophysiologies의 맥락에서 상처 치유를 평가하기 위하여 이용 될 수있다.
Protocol
Representative Results
Discussion
이 피부 상처 치유의 실험 쥐 모델입니다. 이 모델의 중요한 특징은 인간의 발생 과정이 유사하고, 재 상피화 및 새로운 조직의 형성이 발생할 수 있도록 상처 수축을 방지하는 실리콘 부목의 사용이다. 이 모델은 다목적 생리적 및 병리 모두 (예를 들면 당뇨병) 설정에서 상처 치유를 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 모델은 경제적 인 환경에서 잠재적 인 상처 치유 나 혈관 치료를 평가하?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 국민 건강과 호주의 의학 연구위원회 (NHMRC) (: 632512 프로젝트 부여 ID)의 자금 지원을 인정하고 싶습니다. 루이스 던은 국립 심장 재단 경력 개발 원정대에 의해 NHMRC 초기 경력 친목과 크리스티나 Bursill에 의해 지원되었다.
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| Press-to-seal silicone sheeting 0.5 mm thick | Invitrogen | P18178 | Cut into “donuts” with external diameter of 1cm external, 0.5 cm internal diameter |
| Biopsy punch 5 mm | Steifel | BC-B1-0500 | To outline wound area to be excised |
| Vannas scissors 8.5 cm curved | World Precision Instruments | 501232 | For wound incision and excision |
| Dumonte #7b forceps, 11 cm | World Precision Instruments | 501302 | To grip skin when creating incision and excising skin |
| Graefe forceps, serrated 10cm | World Precision Instruments | 14142 | To help attach silicone splint to skin |
| Needle holder, smooth jaws, curved, 12.5 cm | World Precision Instruments | 14132 | |
| Malis forceps, smooth, straight, 12 cm | Codman and Shurtleff, Inc (J&J) | 80-1500 | To suture the silicon rings to the skin |
| Ruler, 0.5 mm gradation | n/a | ||
| Calipers 0.25 mm gradation | Duckworth and Kent | 9-653 | To measure wound area |
| Opsite FlexiFix transparent adhesive film. 10 cm x 1 m | Smith & Nephew | 66030570 | |
| Rimadyl (Carprofen) | Pfizer | 462986 |
Riferimenti
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