चूहा में लगातार पोषक आसव का एक मॉडल
Summary
चूहों में ग्लूकोज और Intralipid की पुरानी सुई लेनी के लिए एक प्रोटोकॉल में वर्णित है. इस मॉडल अंग समारोह और शारीरिक मापदंड पर पोषक तत्वों की अधिकता के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
Abstract
पोषक तत्वों के अत्यधिक स्तर के लिए पुरानी जोखिम कई अंगों और ऊतकों के कार्य को प्रभावित करने और मोटापे से जुड़े कई जटिलताओं के विकास और टाइप 2 मधुमेह सहित उपापचयी सिंड्रोम, के लिए योगदान करने के लिए माने है. ग्लूकोज और फैटी एसिड की अत्यधिक स्तर अग्नाशय बीटा सेल और इंसुलिन के स्राव को प्रभावित तंत्र है जिसके द्वारा अध्ययन करने के लिए, हम चूहे में एक पुरानी पोषक निषेचन मॉडल की स्थापना की है. एक 7 दिन स्वस्थ हो जाना अवधि की अनुमति, एक कुंडा और पिंजरे में आसानी से ले जाने के लिए पशु सक्षम बनाता है कि तोड़ प्रणाली का उपयोग कर पंप को कैथेटर को जोड़ने, और infusing प्रक्रिया सामान्य संज्ञाहरण के तहत सही गले नस और बाईं मन्या धमनी catheterizing के होते हैं ग्लूकोज और / या Intralipid (हेपरिन के साथ संचार में जब लगभग 80% unsaturated/20% संतृप्त फैटी एसिड का एक मिश्रण उत्पन्न करता है जो एक सोयाबीन तेल पायस) 72 घंटे के लिए. यह मॉडल कई एडवांटा प्रदान करता हैऔषधीय यौगिकों सह तर करने के लिए विकल्प, और आहार मॉडल के लिए विरोध के रूप में अपेक्षाकृत कम समय सीमा के पतले ग्लूकोज और फैटी एसिड घूम के लक्ष्य के स्तर से मिलाना संभावना सहित ges,. यह अंगों की एक किस्म में पोषक तत्वों से प्रेरित शिथिलता के तंत्र की जांच करने के लिए और इस संदर्भ में दवाओं के प्रभाव का परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
Introduction
संचलन में ग्लूकोज और लिपिड की चिरकाल ऊंचा स्तर सहित ग्लूकोज homeostasis के रखरखाव में फंसा कई अंगों के कार्य में फेरबदल से टाइप 2 मधुमेह के रोगजनन में योगदान करने का प्रस्ताव है, लेकिन सीमित नहीं किया गया है, अग्नाशय बीटा सेल (की समीक्षा की 1 में). पुरानी ह्य्पेरग्ल्य्समिया इस प्रकार एक दुष्चक्र पैदा करने और टाइप 2 मधुमेह के मरीजों में ग्लूकोज नियंत्रण की गिरावट में योगदान करने के लिए पहली जगह में ह्य्पेरग्ल्य्समिया को जन्म दिया है जो बीटा सेल दोष aggravates कि glucotoxicity परिकल्पना posits. इसी तरह, glucolipotoxicity परिकल्पना के रूप में अक्सर टाइप 2 मधुमेह में मनाया ग्लूकोज और लिपिड स्तर के सहवर्ती उन्नयन, बीटा सेल के लिए हानिकारक हैं कि प्रस्ताव है.
अग्नाशय बीटा सेल समारोह पर लंबे समय से ऊंचा पोषक तत्वों के हानिकारक प्रभावों के सेलुलर और आणविक तंत्र का गूढ़ रहस्य understandi की कुंजी हैटाइप 2 मधुमेह 1 के रोगजनन के एनजी. कि अंत करने के लिए, अध्ययन की एक बड़ी संख्या लैंगरहैंस के अलग टापू में या प्रतिरूप, इंसुलिन स्रावित सेल लाइनों में इन विट्रो में पुरानी पोषक अतिरिक्त पूर्व vivo के तंत्र की जांच की है. संवर्धित कोशिकाओं या टापू में इस्तेमाल फैटी एसिड की सांद्रता शायद ही कभी इन विवो 2 में बीटा कोशिकाओं के आसपास के क्षेत्र में घूम स्तर मैच हालांकि, क्योंकि पूरे जीव के लिए इन मॉडल प्रणाली में प्राप्त निष्कर्षों का अनुवाद विशेष रूप से जटिल है. दूसरी ओर, पोषक तत्वों की अधिकता के जवाब में बीटा सेल विफलता के तंत्र के रूप में Zucker मधुमेह मोटे चूहे 3,4, gerbil Psammomys obesus 5 और उच्च वसा वाले आहार द्वारा उदाहरण, मधुमेह के कृंतक मॉडल में जांच की गई है खिलाया माउस 6. इन मॉडलों, तथापि, आंतरिक चयापचय असामान्यताएं की विशेषता है और रक्त ग्लूकोज की जोड़तोड़ के लिए आसानी से उत्तरदायी नहीं हैंऔर / या एक और अधिक नियंत्रित और कम पुरानी सेटिंग में लिपिड स्तर. अन्यथा सामान्य जानवरों के दिनों की एक समय सीमा में पोषक तत्व के स्तर घूम बदलने में सक्षम होने के लिए, हम शारीरिक मापदंड और समारोह पर, हमें अकेले या संयोजन में, लिपिड और ग्लूकोज के प्रभाव की जांच करने के लिए सक्षम बनाता है जो सामान्य चूहों में एक पुरानी जान फूंकना मॉडल विकसित किया है 7,8.
Protocol
Representative Results
Discussion
पिछले अध्ययनों की एक संख्या हमारे ज्ञान को पुरानी ग्लूकोज की सुई लेनी (जैसे 10-15) या कृन्तकों में लिपिड (जैसे 16,17), कार्यरत है हालांकि दोनों ईंधन के संयुक्त अर्क केवल चूहों 18 में सूचित किय…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम के स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान (R01DK58096 विन्सेंट Poitout के लिए) द्वारा समर्थित किया गया था. विन्सेंट Poitout मधुमेह और अग्नाशय बीटा सेल समारोह में कनाडा अनुसंधान चेयर रखती है. Bader Zarrouki मर्क और एली लिली से पोस्ट डॉक्टरेट फैलोशिप प्राप्त किया. Ghislaine Fontés कनाडा डायबिटीज एसोसिएशन से एक के बाद डॉक्टरेट फैलोशिप द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| Saline 0.9% | BD | JB1324 | |
| Dextrose 70% | McKesson | ||
| Intralipid 20% | Fresenius Kabi | JB6023 | |
| Metricide (Glutaraldehyde 2.6%) | Metrex | 11-1401 | |
| Heparin Sodium 10,000 USP u/ml | PPC | ||
| Carprofen | Metacam | ||
| Glycopyrrolate | Sandoz | ||
| Isoflurane | Abbott | ||
| Chlohexidine 2% | |||
| Alcohol 70% | |||
| Iodine | |||
| PE-50 | BD | 427411 | |
| CO-EX T22 | Instech Solomon | BCOEX-T22 | |
| Connector 22G | Instech Solomon | SC22/15 | |
| Swivel 22G | Instech Solomon | 375/22PS | |
| Y-Connector 22G | Instech Solomon | ||
| Counterbalance and arm | Instech Solomon | CM375BP | |
| 23 G blunted needles | Instech Solomon | LS23 | |
| 23 G canulation pins | Instech Solomon | SP23/12 | |
| Tethers (12 inch) | Lomir | RT12D | |
| Infusion jackets | Lomir | RJ01, RJ02, RJ03, RJ04 | |
| (SM-XL) | |||
| Tether attachment piece | Lomir | RS T1 | |
| 60 ml syringe | BD | 309653 | |
| 1 ml syringe | BD | 309602 |
Riferimenti
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