Un sencillo método de intubación ratón de pulmón
Summary
Este artículo describe un método striaghforward y eficiente de intubación de ratones para las mediciones de la función pulmonar o la instilación pulmonar, que permite a los ratones para recuperar y se estudió en tiempos posteriores. El procedimiento consiste en una fuente de luz de fibra óptica de bajo costo que ilumina directamente la tráquea.
Abstract
Un procedimiento sencillo para intubar ratones para las mediciones de la función pulmonar tendría varias ventajas en estudios longitudinales con un número limitado de animales o caro. Una de las razones por las que esto no se hace de forma más rutinaria es que es relativamente difícil, a pesar de existir varios estudios publicados que describen la manera de lograrlo. En este trabajo se demuestra un procedimiento que elimina uno de los principales obstáculos asociados con este intubación, que de visualizar la tráquea durante todo el tiempo de intubación. El enfoque utiliza una fuente de 0,5 mm de luz de fibra óptica que sirve como un introductor para dirigir la cánula de intubación en la tráquea ratón. Se demuestra que es posible utilizar este procedimiento para medir la mecánica pulmonar en ratones individuales durante un transcurso de tiempo de al menos varias semanas. La técnica se puede configurar con relativamente poco gasto y experiencia, y que pueden ser rutinariamente a cabo con relativamente poca formación. Esto debería MAKE Es posible para cualquier laboratorio para llevar a cabo de forma rutinaria este intubación, lo que permite estudios longitudinales en ratones individuales, minimizando de este modo el número de ratones necesarios y aumentar el poder estadístico mediante el uso de cada ratón como su propio control.
Introduction
En 1999, Brown et al. Publicado un artículo que describe un método para la intubación de la pulmón de ratón 1. Dicha técnica tiene una utilidad considerable en hacer la función de repetición pulmonar o lavado broncoalveolar de ratones individuales en estudios longitudinales 2. Dado que el papel original, ha habido varios otros papeles que han descrito diferentes enfoques para la intubación ratón 3-9. Aunque todos estos métodos se pueden utilizar con éxito, por lo general requieren una formación considerable o coste. Uno de los principales problemas con la intubación es tal que cuando se acerca la cánula de intubación se acerca a la inserción tráquea pendiente, la propia cánula bloquea la luz y por lo tanto la visualización de donde tiene que ir. Por lo tanto, la inserción queda ciego en el momento más crítico. En este trabajo se muestra cómo eliminar sencilla y económica a este problema de visualización, lo que garantiza la intubación exitosa con relativamente poca formación oexperiencia.
Protocol
Representative Results
Discussion
El procedimiento descrito aquí tiene varias ventajas. En primer lugar el aparato es sencillo y relativamente barato .. La fabricación del aparato no requiere ninguna herramienta especial o equipo costoso. El uso de un catéter que presenta también es la fuente de luz significa que uno nunca pierde de vista la apertura de la tráquea como el introductor se acerca a la apertura de la tráquea. El uso de un introductor de 0,5 mm también sirve para minimizar el trauma que podría ocurrir con una inserción inicial de un…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Apoyado por el NIH HL-10342.
Materials
| Material | Company | Catalog # | Comment |
| Intubation cannula | BD Insylte, Sparks, MD or Jelco Optiva, Carlsbad, CA | 1-in.-long, 20-gauge intravenous (IV) catheter | |
| Fiber-optic cable | Edmund Optics, Barrington, NJ | #NT02-542 | Approximately 2-ft length of 0.5-mm optical fiber (Communication grade plastic fiber). The edge of the fiber end that is inserted into the trachea should be gently rounded by holding the fiber ≈2 cm from the end and then making small circles while dragging the tip for a few seconds on 1,000-grit emory paper. |
| Light Source | Volpi | NCL-150 | Although we use a 150-W halogen light source, any equivalent light source, even with much lower wattage can be used. |
| Silicone rubber stopper | A #1 silicone rubber stopper fits the light source used in this demonstration. Different light sources may require a different size. | ||
| Small silicone rubber tube | Cole-Palmer | EW-96410-13 | A ≈1.5 cm piece of silicone rubber tubing (0.8 inner diameter, 4 mm outer diameter) |
| Angled support stand | Ours is constucted from plexiglass, but any material to which a thread or wire can be affixed to hold the mouse at an almost vertical angle can be used. |
Riferimenti
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