In myography pressione, un piccolo segmento intatta di una nave è attaccato su due piccole cannule e pressurizzato ad una pressione luminale adatto. Qui, descriviamo il metodo per misurare la risposta di vasodilatazione del mouse 3<sup> Rd</sup> Ordine arterie mesenteriche in c57 e sGCα<sub> 1</sub<sup> – / -</sup> Topo, utilizzando myography pressione.
Sistemi miografo pressione sono squisitamente utili nella valutazione funzionale di piccole arterie, pressurizzato ad una pressione transmurale adatto. La condizione vicino fisiologico raggiunto nel myography pressione permette la caratterizzazione approfondita delle risposte intrinseche a stimoli farmacologici e fisiologici, che possono essere estrapolati per il comportamento in vivo del letto vascolare. Miografo pressione ha diversi vantaggi rispetto myographs filo convenzionali. Ad esempio, vasi di resistenza più piccoli possono essere studiate a pressioni endoluminali strettamente controllati e fisiologicamente rilevanti. Qui, si studia la possibilità di 3 ° ordine arterie mesenteriche (3-4 mm di lunghezza), preconstricted con fenilefrina, a vaso-rilassarsi in risposta alla acetilcolina. Arterie mesenteriche sono montati su due cannule collegate ad un sistema pressurizzato e sigillato che viene mantenuta a pressione costante di 60 mmHg. Il diametro del lume ed esterno del vaso sono continuouSly ha registrato con una videocamera, permettendo reale quantificazione tempo della vasocostrizione e vasodilatazione in risposta alla fenilefrina e acetilcolina, rispettivamente.
Per dimostrare l'applicabilità di myography pressione per studiare l'eziologia della malattia cardiovascolare, abbiamo valutato funzione vascolare endotelio-dipendente in un modello murino di ipertensione sistemica. Topi deficienti in α 1 subunità della guanilato ciclasi solubile (sGCα 1 – / -) sono ipertesi quando su un (S6) sfondo 129S6 (sGCα 1 -/-S6), ma non quando su un C57BL / 6 (B6) sfondo (sGCα 1 -/-B6). Utilizzando myography pressione, dimostriamo che sGCα risultati 1 da carenza di alterata vasodilatazione endotelio-dipendente. La disfunzione vascolare è più pronunciata in sGCα 1 -/-S6 che in sGCα 1 -/-B6 topi, probabilmente CONTRIBUZIONEng per la pressione sanguigna più alta in sGCα 1 -/-S6 che in sGCα 1 -/-B6 topi.
Myography pressione è una tecnica relativamente semplice, ma sensibile e meccanicamente utile che può essere utilizzato per valutare l'effetto di vari stimoli sulla contrazione vascolare e relax, aumentando così la nostra comprensione dei meccanismi alla base della malattia cardiovascolare.
Sistemi miografo pressione sono utilizzati per misurare la funzione fisiologica e le proprietà delle piccole arterie, vene e altre navi. Un piccolo segmento intatta di un'arteria o vena è attaccato su due piccole cannule di vetro e pressurizzato ad una pressione luminale sufficiente tenendo il vaso di mantenere la maggior parte del suo nelle caratteristiche vivo (figure 1 e 2). La condizione vicino fisiologica in un miografo pressione riflette il comportamento in vivo del letto vascolare, permettendo lo studio delle proprietà intrinseche (ad esempio tono miogenica) di vasi isolati. Alcuni dei vantaggi del myography pressione sopra myography filo, dove la contrazione muscolare è valutata con accoppiamento meccanico diretto a un trasduttore di forza 1, comprendono (i) che micro resistenza arterie, che definiscono la resistenza complessiva sviluppata nel sistema vascolare, possono essere studiati, mentre miografo filo è limitata a grandi arterie conduit, (ii) tcappello il rischio di danneggiare l'endotelio viene ridotta, poichè senza cavi devono essere passati attraverso il lume del vaso, (iii) che la forma naturale del vaso è meglio mantenuta, e (iv) che la dimensione vaso può essere studiato in una vasta gamma di pressioni o sollecitazioni di taglio 2.
Studiare micro vasi può essere più informativo che studiare grandi arterie conduit per aiutare a capire i meccanismi fisiopatologici e molecolari che contribuiscono al tono vascolare alterata nelle malattie cardiovascolari come l'ipertensione. Per esempio, danno della funzione endoteliale associata con l'alimentazione topi una dieta ricca di grassi per 8 settimane potrebbe essere dimostrata in 2 nd-ordine mesenterici arterie 3 ma non in anelli aortici (Figura 3). Un altro vantaggio di myography pressione che è intrinseco miogenico costrizione del vaso pressurizzato è presente, e che il ruolo e la funzione dell'endotelio in questo fenomeno può essere studiato. Qui, descrIBE l'uso di una pressione di studiare miografo reattività vascolare del topo mesenterici 3 ° ordine arterie di resistenza in una cornice di ossido nitrico compromessa (NO)-cGMP segnalazione.
I topi sono il modello sperimentale di scelta per molti ricercatori, in parte a causa della possibilità di introdurre modifiche genetiche, generando modelli murini di fisiopatologia umana. Lo stato vasoattiva di piccola resistenza, ma non di più grandi vasi conduit definisce in gran parte la regolazione del flusso di sangue in tutto il sistema vascolare 11. Le dimensioni delle arterie di resistenza in piccoli animali, come topi, impedisce l'uso di un filo miografo per studiare la funzione microvascolare…
The authors have nothing to disclose.
Gli autori desiderano ringraziare Drs. Paul Huang e Dmitriy Atochin per l'uso della pressione DMT miografo e Drs. Binglan Yu Chong Lei e per la fornitura di topi nutriti con dieta ricca di grassi o dieta standard.
Fonte di finanziamento
Questo lavoro è stato sostenuto da Scientist Development Grant 10SDG2610313 dalla American Heart Association (ad ES Buys), e un Miles Shore 50 ° anniversario del programma Fellowship Eleanor e per studiosi in medicina presso la Harvard Medical School (per ES Buys).
Name | Company | Cataloge No. |
NaCl | Fisher Scientific | BP358 |
CaCl2 (2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 |
KCl | Sigma | P9333 |
MgSO4 | Fisher Scientific | M65-500 |
KH2PO4 | Sigma | P3786 |
NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328 |
NaOH | Fisher Scientific | S318 |
D-Glucose | Sigma | G8270 |
EDTA | Fisher Scientific | BP121 |
HEPES | Sigma | H3375 |
Phenylephrine | Acros Organics | AC20724 |
Acetylcholine | Sigma | A6625 |
Pressure Myograph System | DMT |