の口頭伝達<em>リステリア菌</em>汚染された食品の摂取を介したマウスにおける
Summary
本稿で使用して、マウスの経口感染のための新規な方法を説明します<em>リステリア菌</em>汚染された食品。プロトコルは容易に他の食品媒介性病原細菌での使用に適合させることができる。
Abstract
リステリア菌は、ヒトにおける食品媒介感染症を引き起こす通性細胞内細菌の病原体である。ほとんど密接に人間の病気を模倣小さな動物モデルの不足によるリステリア症の胃腸の段階についてはほとんど知られていない。本論文では、Lの口頭伝達のための新規なマウスモデルを説明リステリア 。マウス飼育L.は 、このモデルを使用リステリア汚染されたパンは、感受性（BALB / C / J / BY）または耐性（C57BL / 6）マウス系統で全身の広がりの程度を変化させることによって、続いて胃腸感染の離散位相を、持っている。感染の後期段階の間に、胆嚢および脳への普及が観察される。リステリア症の食品媒介性モデルは、非常に再現性がある特殊な技術を必要とせず、細菌の単離および実験マウス系統の多種多様な使用することができる。このように、L.によって使用される病原性戦略の両方を研究するための理想的なモデルであるリステリア </em>の腸の植民地化と同様、侵襲食品媒介性細菌感染に対する宿主応答を促進する。
Introduction
リステリア菌は、ヒトにおける食品媒介感染症を引き起こす通性細胞内細菌の病原体である。細菌が私たちの食糧供給を保護するために使用されるプロセスの多くに耐性があり、乾燥、塩漬け、または冷凍1,2及び感染症などは、一般的に処理するためにリンクされている、消費前に加熱されていない食品を"すぐに食べる" 。いくつか前の流行、L.のソースでリステリア ·汚染された食品が確認された、露出した個人の制限されたグループは密接に3-6をモニターした。これらの例では、そうでない健常者における臨床疾患が軽度、自己制限胃腸炎からより重度の腸と全身感染する必要が入院。L.まで変化新生児や高齢者の両方を含む免疫妥協個人、、におけるリステリア感染症であっても抗生物質治療で、高い死亡率（25〜30％）と関連している<s7,8>まで。リトルはL.のため感染量についてはほとんど知られていないリステリア 、または反復するその小さな動物モデルの不足が主な原因口頭伝達した後、感染症への感受性を支配する宿主因子、感染成果のこの幅広い。
リステリア症の最も広く使用されるモデルは、マウスの静脈内（iv）の接種である。 IVモデルは高い再現性で、感染9,10時に両方ナイーブおよびメモリーT細胞応答を研究するために非常に有用であった。静脈モデルの欠点は、それが完全に感染の腸相をバイパスすることである。食品媒介送信後、腸粘膜はおそらく遅くなり、継続的に末梢組織に広めることができる細菌の数を制限する障壁を提供する。これとは対照的に、全体の接種は静脈内投与から数分以内に脾臓と肝臓で見つけることができ、かつ生物のこの大ボーラスは自然免疫Dを圧倒することがこれらの組織におけるefenses。大用量（10 9〜10 11 CFU）は、典型的には10腸管定着を達成するために必要とされるため、強制経口投与によるマウスの経口感染はあまり一般的に使用される。また、給餌針で胃内（IG）接種は、全身普及に先立って胃腸感染の再現期間を生成しません。いくつかのラボでは、L.ことを報告している他の人が48 HPI 11-15までは全身の広がりを示さなかったリステリアは 、4-12時間感染後（HPI）以内に脾臓や肝臓に達する。このラボツーラボ変動は食道の粘膜に軽度の外傷をもたらすことができた、IG接種の侵襲性の結果である、と細菌の直接血流の侵入を促進する可能性がある。
我々は最近、経口L.の新規マウスモデルを開発しました密接に人間の病気16のすべての段階を模倣リステリアは、感染症。マウスは続きの部分を摂取する際に感染症が発生します食品、非外傷性のあるプロセスを、アミノ化および実験室の研究者によって専門的なスキルを必要としません。時間の離散時間（36-48時間）については、L.リステリアは再現こうして腸粘膜を越え転位および末梢組織に広めるためにリステリア病原性によって使用されるメカニズムの調査を可能にする、唯一の消化管にコロニーを形成する。重要なのは、モデルが感染に対する宿主生来の抵抗の相違を調査するために使用することができる。以前の研究では、BALB / C / Jマウス/ BYはLの指数レプリケーションでは、食品媒介性リステリア症の影響を非常に受けやすいことが示された腸、脾臓、肝臓、胆嚢16で発生したリステリア 。これとは対照的に、C57BL / 6マウスはL.の唯一の一時的な植民地で、食品媒介感染症に耐性であったこれらの組織の各々に発生したリステリア 。密接に人間の病気を模倣食品媒介モデルの追加の特徴は、自然な普及です脳への感染（5-7 DPI）の後期段階中に発生しました。
Protocol
Representative Results
Discussion
近交系マウスは、一日のすべての回で餌に均一に受容されず、汚染されたパンを食べるために彼らの意欲は、両方の歪みタイプとマウス17の年齢によって異なります。我々の経験では、6-9週齢のB6マウスは、一日中いつでも餌を受け入れているが、それは彼らの明暗サイクルの間に提供されていない限り、BALBマウスは一貫して、パンの部分を食べることはありません。暗期は検査室の…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品はSEFDに授与国立衛生研究所（AI079442とAI091918）からの補助金によって支えられて
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| Brain Heart Infusion Agar | Difco | BD-241830 | |
| Lithium chloride | Sigma | L9650 | |
| Glycine | Omnipur | 4840 | |
| EDTA | Gibco | 15575-038 | |
| DTT | Sigma | D5545 | |
| Collagenase, type IV | Worthington | LS004089 | |
| DNAse I | Worthington | LS002007 | |
| Diff-Quik | Dade-Behring | B4132-1A | |
| PowerGen 1000 homogenizer | Fisher | 14-261-06 | |
| stainless steel type 304 mesh #80 | Small Parts, Inc. | CX-0080-C | |
| Cytospin | Statspin | M801-22 |
Riferimenti
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