الكبار ماوس وريدي ارتفاع ضغط الدم نموذج: الشريان السباتي المشترك لجهات خارجية الوداجي الوريد التحام.
Summary
نحن تصف طريقة لخلق نموذج موثوق من ارتفاع ضغط الدم الوريدي الدماغي في الماوس الكبار. وقد وصفت على نطاق واسع هذا النموذج واختبارها في الفئران. هذه نظيره جديد في الفئران يفتح إمكانية استخدام الحيوانات المعدلة وراثية، وبالتالي يوسع تطبيقات النموذج.
Abstract
فهم الفيزيولوجيا المرضية من تشوهات الشرايين والدماغ والشرايين والأوردة الناسور قد تحسنت بفضل النماذج الحيوانية. نموذج الفئران خلق الناسور الاصطناعي بين الشريان السباتي المشترك (CCA) والوريد الوداجي الخارجي (EJV) وقد وصفت على نطاق واسع وأثبت ممكنا من الناحية التقنية. هذا التصور يثير ارتفاع ضغط الدم الوريدي الدماغي ثابت (CVH)، وبالتالي ساعدت دراسة مساهمة ارتفاع ضغط الدم الوريدي إلى تشكيل، والأعراض السريرية، والتشخيص من الألغام المضادة للمركبات الدماغ وAVFs السحائي. تم نماذج الفئران تعادل وصف نادرا فقط وأظهرت مشكلة مع تضيق من الناسور. ومن شأن نموذج الفئران أنشئت تسمح دراسة الفيزيولوجيا المرضية ليس فقط ولكن أيضا العلاجات الجينية المحتملة لهذه الأمراض الدماغية الوعائية.
نقدم نموذجا للشرياني الناسور الذي ينتج ارتفاع ضغط الدم الوريدي داخل الجمجمة دائم في الماوس. المجهرية مفاغرة سو على الفئران CCA وEJV يمكن أن يكون صعبا نظرا لضآلة علم التشريح ويؤدي في كثير من الأحيان في الناسور غير البراءات. في هذا البروتوكول خطوة بخطوة نعالج جميع التحديات الهامة التي واجهتها خلال هذا الإجراء. تجنب تراجع المفرط للالوريد خلال التعرض، وذلك باستخدام خيوط 11-0 بدلا من 10-0، وجعل مفاغرة المخطط لها بعناية نهاية إلى الجانب هي بعض الخطوات الحاسمة. على الرغم من أن هذه الطريقة تتطلب مهارات المجهرية المتقدمة ومنحنى التعلم الطويل الذي يعادل في الفئران، ويمكن تطويرها باستمرار.
وقد تم تصميم هذا النموذج رواية لدمج تقنيات الماوس المعدلة وراثيا مع نظام تجريبي سابقا الراسخة التي أثبتت مفيدة لدراسة الألغام المضادة للمركبات الدماغ وAVFs السحائي. عن طريق فتح إمكانية استخدام الفئران المعدلة وراثيا، طائفة واسعة من نماذج صالحة يمكن أن يتحقق ويمكن أيضا اختبار المعالجات الجينية. ويمكن أيضا لبناء التجريبية أن تتكيف أيضا على دراسة بعد التمديدأمراض لها الدماغية ذات الصلة مع ارتفاع ضغط الدم الوريدي مثل الصداع النصفي، وفقدان الذاكرة العالمية عابرة، والعمى أحادي عابر، الخ
Introduction
وقد أثبتت النماذج الحيوانية من ارتفاع ضغط الدم الوريدي الدماغي ليكون أداة رئيسية في فهم الفيزيولوجيا المرضية من تشوهات الشرايين والدماغ والشرايين والأوردة الناسور 1-7. الأكثر استخداما هو نموذج الفئران التي تم إنشاؤها من خلال الناسور الاصطناعي بين الشريان السباتي المشترك (CCA) والوريد الوداجي الخارجي (EJV)، والذي يثير ثابت ارتفاع ضغط الدم الوريدي الدماغي (CVH) في الفئران 1،8-10. نماذج الفئران ما يعادلها، عن طريق فتح إمكانية استخدام مختلف سلالات الفئران المعدلة وراثيا، من شأنه أن يسمح مزيد من الدراسة على الفيزيولوجيا المرضية وليس فقط ولكن أيضا العلاجات الجينية المحتملة لهذه الأمراض الدماغية الوعائية. وعلاوة على ذلك، يمكن أيضا بناء التجريبية أن تتكيف أيضا على دراسة الأمراض القلبية الوعائية الأخرى ذات الصلة مع ارتفاع ضغط الدم الوريدي مثل الصداع النصفي، وفقدان الذاكرة العالمية عابرة، والعمى أحادي عابر، الخ 11 ولكن المحاولات السابقة لبناء هذه النماذج الفئران حأظهرت افي الصعوبات مع المباح من الناسور بسبب التشريح ضآلة 5،12. هنا، نحن تصف لدينا بروتوكول خطوة بخطوة لمفاغرة الناجحة للالفئران CCA وEJV أن يترجم إلى ناسور براءات الاختراع على المدى الطويل وارتفاع ضغط الدم الوريدي دائم في الماوس.
Protocol
Representative Results
Discussion
وقد أصيب ارتفاع ضغط الدم الوريدي الدماغي يرتبط ارتباطا وثيقا مع المظاهر السريرية أكثر شدة وسوء أحوال الطقس في المرضى الذين يعانون AVFs السحائي والألغام المضادة للمركبات الدماغ 3. هذه الآثار من CVH وقد تم دراسة على نطاق واسع في نماذج الفئران 1،2،8. ومن شأن نموذ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ويدعم هذا المشروع جزئيا NIH T32 GM008440 إلى اسبن ووكر، R01 NS27713 إلى وليام L.Young، P01 NS44155 إلى وليام L.Young وهوا سو، R21 NS070153 لهوا SU ومن قبل جمعية القلب الأمريكية AHA 10GRNT3130004 لهوا سو. ويدعم الدكتور آنا رودريغيز-هيرنانديز عن طريق منحة من "OBRA لا كايكسا الاجتماعي"
Materials
| 10-0 Sterile Microsuture | Arosurgical Ic. | VT5A010Q10 |
| 11-0 Sterile Microsuture | Arosurgical Ic | VT4A00N07 |
| DUROTIP Scissors | Aesculap | BC210R |
| Micro-Adson Tissue Forceps | Aesculap | BD510R |
| Microscissors | Aesculap | OC496R |
| Micro Forceps #5 Jewelers | Aesculap | BD331R |
| Angled Jewelers Forceps | Aesculap | BD329R |
| Micro Suture Forceps | Aesculap | BD338R |
| DUROGRIP Needle Holder | Aesculap | BM009R |
Riferimenti
- Bederson, J. B., Wiestler, O. D., Brüstle, O., Roth, P., Frick, R., Yaşargil, M. G. Intracranial venous hypertension and the effects of venous outflow obstruction in a rat model of arteriovenous fistula. Neurosurgery. 29, 341-350 (1991).
- Gao, P., Zhu, Y., Ling, F., Shen, F., Lee, B., Gabriel, R. A., Hao, Q., Yang, G. Y., Su, H., Young, W. L. Nonischemic cerebral venous hypertension promotes a pro-angiogenic stage through HIF-1 downstream genes and leukocyte-derived MMP-9. J. Cereb. Blood Flow Metab. 29, 1482-1490 (2009).
- Kim, H., Su, H., Weinsheimer, S., Pawlikowska, L., Brain Young, W. L. arteriovenous malformation pathogenesis: a response-to-injury paradigm. Acta Neurochir. Suppl. 111, 83-92 (2011).
- Lawton, M. T., Arnold, C. M., Kim, Y. J., Bogarin, E. A., Stewart, C. L., Wulfstat, A. A., Derugin, N., Deen, D., Young, W. L. Radiation arteriopathy in the transgenic arteriovenous fistula model. Neurosurgery. 62, 1129-1138 (2008).
- Lawton, M. T., Stewart, C. L., Wulfstat, A. A., Derugin, N., Hashimoto, T., Young, W. L. The transgenic arteriovenous fistula in the rat: an experimental model of gene therapy for brain arteriovenous malformations. Neurosurgery. 54, 1463-1471 (2004).
- Schaller, B., Graf, R., Sanada, Y., Tolnay, M., Rosner, G., Wienhard, K., Heiss, W., D, Hemodynamic changes after occlusion of the posterior superior sagittal sinus: an experimental PET study in cats. AJNR Am J Neuroradiol. 24, 1876-1880 (2003).
- Zhu, Y., Lawton, M. T., Du, R., Shwe, Y., Chen, Y., Shen, F., Young, W. L., Yang, G. Y. Expression of hypoxia-inducible factor-1 and vascular endothelial growth factor in response to venous hypertension. Neurosurgery. 59, 687-696 (2006).
- Herman, J. M., Spetzler, R. F., Bederson, J. B., Kurbat, J. M., Zabramski, J. M. Genesis of a dural arteriovenous malformation in a rat model. J. Neurosurg. 83, 539-545 (1995).
- Terada, T., Higashida, R. T., Halbach, V. V., Dowd, C. F., Tsuura, M., Komai, N., Wilson, C. B., Hieshima, G. B. Development of acquired arteriovenous fistulas in rats due to venous hypertension. J. Neurosurg. 80, 884-889 (1994).
- Yassari, R., Sayama, T., Jahromi, B. S., Aihara, Y., Stoodley, M., Macdonald, R. L. Angiographic, hemodynamic and histological characterization of an arteriovenous fistula in rats. Acta Neurochir (Wien). 146, 495-504 (2004).
- Solheim, O., Skeidsvoll, T. Transient global amnesia may be caused by cerebral vein thrombosis. Med. Hypotheses. 65, 1142-1149 (2005).
- Yang, B., Shergill, U., Fu, A. A., Knudsen, B., Misra, S. The mouse arteriovenous fistula model. J Vasc Interv Radiol. 20, 946-950 (2009).
- Choi, E. J., Choi, E. J., Walker, E. J., Shen, F., Oh, S. P., Arthur, H. M., Young, W. L., Su, H. Minimal Homozygous Endothelial Deletion of Eng with VEGF Stimulation Is Sufficient to Cause Cerebrovascular Dysplasia in the Adult Mouse. Cerebrovascular diseases. 33, 540-547 (2012).
- Hao, Q., Su, H., Marchuk, D. A., Rola, R., Wang, Y., Liu, W., Young, W. L., Yang, G. Y. Increased tissue perfusion promotes capillary dysplasia in the ALK1-deficient mouse brain following VEGF stimulation. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 295, H2250-H2256 (2008).
- Su, H., Hao, Q., Shen, F., Zhu, Y., Lee, C. Z., Young, W. L., Yang, G. Y. Development of a cerebral microvascular dysplasia model in rodents. Acta Neurochir. Suppl. 105, 185-189 (2008).
- Walker, E. J., Su, H., Shen, F., Degos, V., Jun, K., Young, W. L. Bevacizumab Attenuates VEGF-Induced Angiogenesis and Vascular Malformations in the Adult Mouse Brain. Stroke; a journal of cerebral circulation. , (2012).
