Summary

Volwassen muis Veneuze Hypertensie Model: halsslagader op externe halsader Anastomosis.

Published: January 27, 2015
doi:

Summary

We beschrijven een methode waarbij een betrouwbaar model van cerebrale veneuze hypertensie bij volwassen muizen. Dit model wordt algemeen beschreven en getest in de rat. Deze nieuwe tegenhanger in de muizen opent de mogelijkheid om genetische gemodificeerde dieren en daardoor verbreedt de toepassing van het model.

Abstract

Het begrip van de pathofysiologie van hersenen arterioveneuze misvormingen en arterioveneuze fistels heeft dankzij diermodellen verbeterd. Een rat model creëren van een kunstmatige fistel tussen de gemeenschappelijke halsslagader (CCA) en de externe halsader (EJV) is op grote schaal beschreven en bleek technisch haalbaar is. Dit construct veroorzaakt een consistente cerebrale veneuze hypertensie (CVH), en derhalve heeft bijgedragen bestuderen van de bijdrage van veneuze hypertensie vorming, klinische symptomen en prognose hersenen AVM en durale AVFs. Gelijkwaardig muizen modellen zijn alleen nauwelijks beschreven en hebben aangetoond moeite met stenose van de fistel. Een gevestigde muizenmodel zal de studie van niet alleen pathofysiologie, maar ook de potentiële genetische therapieën voor deze cerebrovasculaire ziekten mogelijk.

We geven een voorbeeld van arterioveneuze fistels die een duurzaam intracraniële veneuze hypertensie produceert de muis. Microchirurgische anastomose of de muizen CCA en EJV moeilijk kan te wijten zijn aan verkleinwoord anatomie en vaak resulteren in een niet-patent fistel. In deze stap voor stap protocol richten we alle belangrijke uitdagingen die tijdens deze procedure. Te hoge terugtrekken van de ader tijdens de belichting, met 11-0 hechtingen plaats van 10-0 en maken een zorgvuldig geplande end-to-side anastomose zijn enkele cruciale stappen. Hoewel deze methode vereist geavanceerde microchirurgische vaardigheden en een langere leercurve het equivalent in de rat, kan consequent worden ontwikkeld.

Deze nieuwe model is ontworpen om transgene muizen technieken integreren met een eerder gevestigde experimentele systeem dat nuttig hersenen AVM en durale AVFs studie is gebleken. Door het openen van de mogelijkheid om transgene muizen, kan een breder spectrum van geldige modellen worden verwezenlijkt en genetische behandelingen kunnen ook getest. De experimentele construct kan verder worden aangepast aan de studie van othaar cerebrovasculaire ziekten die verband houden met veneuze hypertensie zoals migraine, voorbijgaande globale amnesie, voorbijgaande monoculaire blindheid, enz.

Introduction

Diermodellen van cerebrale veneuze hypertensie hebben bewezen een belangrijk instrument in het begrip van de pathofysiologie van hersenen arterioveneuze misvormingen en arterioveneuze fistels 1-7 zijn. De meest gebruikte is het rattenmodel gemaakt door een kunstmatige fistel tussen de halsslagader (CCA) en de uitwendige halsader (EJV), die een consistente cerebrale veneuze hypertensie (CVH) in de rat 1,8-10 veroorzaakt. Equivalent muizen modellen, door het openen van de mogelijkheid om verschillende transgene muizenstammen, zou verdere studie niet alleen pathofysiologie, maar ook de potentiële genetische therapieën voor deze cerebrovasculaire ziekten mogelijk. Bovendien is de experimentele construct kan ook verder aangepast aan de studie van andere cerebrovasculaire aandoeningen gerelateerd aan veneuze hypertensie zoals migraine, Algemeen geheugenverlies, voorbijgaande monoculaire blindheid, etc. 11 Echter, eerdere pogingen construeren deze muizen modellen have aangetoond dat de problemen met de doorgankelijkheid van de fistel als gevolg van het verkleinwoord anatomie 5,12. Hier beschrijven we stap voor stap protocol voor een succesvolle anastomose van de muizen CCA en EJV die zich vertaalt in een langdurige octrooi fistel en een duurzame veneuze hypertensie bij de muis.

Protocol

1. Voorbereiding van de muis Induceren algemene anesthesie in de muis met isofluraan gas. Injecteren 0,15 ml intraperitoneale brupenorphine voor pijnbestrijding. Voordat u verder gaat, controleer dan of de anesthesie niveau bevredigend is door een prik poten van de muis. Plaats de muis dorsale decubitus met de vier door plakband vast ledematen. Verwijder het haar van de hals en de borst met een schaar. Subcutaan toedienen 0,2-0,4 ml 0,9% zoutoplossing om de muis gehydrateerd tijdens de chirurgische …

Representative Results

Een succesvolle uitkomst van het model is een octrooi arterioveneuze fistel dat veneuze hypertensie induceert in de muizen hersenen. Om het model te valideren we aanvankelijk gemeten intracraniale veneuze druk in het sagittale sinus van de muizen op 2, 3 en 4 weken na de operatie. 6 verschillende muizen werden toegewezen aan elke tijdsvariant. De sinus druk was 8,8 ± 1,2 mmHg in de groep gemeten twee weken na de operatie. In de 6 muizen gemeten 3 weken na de operatie, de sinus druk was 4,7 ± 1,4 mmHg. Tenslotte, de 6 …

Discussion

Aanhoudende cerebrale veneuze hypertensie is nauw verwant met meer ernstige klinische manifestaties en slechte prognose bij patiënten met durale AVFs en hersenen AVM 3. Deze effecten van CVH zijn uitgebreid bestudeerd in rat modellen 1,2,8. Een equivalent model in de muis is het gebruik van genetisch gemodificeerde dieren die uiteindelijk zou de analyse van moleculaire wegen betrokken bij de pathogenese van veneuze hypertensie en de relatie met durale AVF en hersenen AVM mogelijk.

<p class="jo…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dit project wordt gedeeltelijk ondersteund door NIH T32 GM008440 om Espen Walker, R01 NS27713 aan William L.Young, P01 NS44155 aan William L.Young en Hua Su, R21 NS070153 naar Hua SU en door de American Heart Association AHA 10GRNT3130004 naar Hua Su. Dr Ana Rodríguez-Hernández wordt ondersteund door een subsidie ​​van "Obra Social La Caixa"

Materials

10-0 Sterile Microsuture Arosurgical Ic. VT5A010Q10
11-0 Sterile Microsuture Arosurgical Ic VT4A00N07
DUROTIP Scissors Aesculap BC210R
Micro-Adson Tissue Forceps Aesculap BD510R
Microscissors Aesculap OC496R
Micro Forceps #5 Jewelers Aesculap BD331R
Angled Jewelers Forceps Aesculap BD329R
Micro Suture Forceps Aesculap BD338R
DUROGRIP Needle Holder Aesculap BM009R

Riferimenti

  1. Bederson, J. B., Wiestler, O. D., Brüstle, O., Roth, P., Frick, R., Yaşargil, M. G. Intracranial venous hypertension and the effects of venous outflow obstruction in a rat model of arteriovenous fistula. Neurosurgery. 29, 341-350 (1991).
  2. Gao, P., Zhu, Y., Ling, F., Shen, F., Lee, B., Gabriel, R. A., Hao, Q., Yang, G. Y., Su, H., Young, W. L. Nonischemic cerebral venous hypertension promotes a pro-angiogenic stage through HIF-1 downstream genes and leukocyte-derived MMP-9. J. Cereb. Blood Flow Metab. 29, 1482-1490 (2009).
  3. Kim, H., Su, H., Weinsheimer, S., Pawlikowska, L., Brain Young, W. L. arteriovenous malformation pathogenesis: a response-to-injury paradigm. Acta Neurochir. Suppl. 111, 83-92 (2011).
  4. Lawton, M. T., Arnold, C. M., Kim, Y. J., Bogarin, E. A., Stewart, C. L., Wulfstat, A. A., Derugin, N., Deen, D., Young, W. L. Radiation arteriopathy in the transgenic arteriovenous fistula model. Neurosurgery. 62, 1129-1138 (2008).
  5. Lawton, M. T., Stewart, C. L., Wulfstat, A. A., Derugin, N., Hashimoto, T., Young, W. L. The transgenic arteriovenous fistula in the rat: an experimental model of gene therapy for brain arteriovenous malformations. Neurosurgery. 54, 1463-1471 (2004).
  6. Schaller, B., Graf, R., Sanada, Y., Tolnay, M., Rosner, G., Wienhard, K., Heiss, W., D, Hemodynamic changes after occlusion of the posterior superior sagittal sinus: an experimental PET study in cats. AJNR Am J Neuroradiol. 24, 1876-1880 (2003).
  7. Zhu, Y., Lawton, M. T., Du, R., Shwe, Y., Chen, Y., Shen, F., Young, W. L., Yang, G. Y. Expression of hypoxia-inducible factor-1 and vascular endothelial growth factor in response to venous hypertension. Neurosurgery. 59, 687-696 (2006).
  8. Herman, J. M., Spetzler, R. F., Bederson, J. B., Kurbat, J. M., Zabramski, J. M. Genesis of a dural arteriovenous malformation in a rat model. J. Neurosurg. 83, 539-545 (1995).
  9. Terada, T., Higashida, R. T., Halbach, V. V., Dowd, C. F., Tsuura, M., Komai, N., Wilson, C. B., Hieshima, G. B. Development of acquired arteriovenous fistulas in rats due to venous hypertension. J. Neurosurg. 80, 884-889 (1994).
  10. Yassari, R., Sayama, T., Jahromi, B. S., Aihara, Y., Stoodley, M., Macdonald, R. L. Angiographic, hemodynamic and histological characterization of an arteriovenous fistula in rats. Acta Neurochir (Wien). 146, 495-504 (2004).
  11. Solheim, O., Skeidsvoll, T. Transient global amnesia may be caused by cerebral vein thrombosis. Med. Hypotheses. 65, 1142-1149 (2005).
  12. Yang, B., Shergill, U., Fu, A. A., Knudsen, B., Misra, S. The mouse arteriovenous fistula model. J Vasc Interv Radiol. 20, 946-950 (2009).
  13. Choi, E. J., Choi, E. J., Walker, E. J., Shen, F., Oh, S. P., Arthur, H. M., Young, W. L., Su, H. Minimal Homozygous Endothelial Deletion of Eng with VEGF Stimulation Is Sufficient to Cause Cerebrovascular Dysplasia in the Adult Mouse. Cerebrovascular diseases. 33, 540-547 (2012).
  14. Hao, Q., Su, H., Marchuk, D. A., Rola, R., Wang, Y., Liu, W., Young, W. L., Yang, G. Y. Increased tissue perfusion promotes capillary dysplasia in the ALK1-deficient mouse brain following VEGF stimulation. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 295, H2250-H2256 (2008).
  15. Su, H., Hao, Q., Shen, F., Zhu, Y., Lee, C. Z., Young, W. L., Yang, G. Y. Development of a cerebral microvascular dysplasia model in rodents. Acta Neurochir. Suppl. 105, 185-189 (2008).
  16. Walker, E. J., Su, H., Shen, F., Degos, V., Jun, K., Young, W. L. Bevacizumab Attenuates VEGF-Induced Angiogenesis and Vascular Malformations in the Adult Mouse Brain. Stroke; a journal of cerebral circulation. , (2012).
check_url/it/50472?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Yang, S., Rodriguez-Hernandez, A., Walker, E. J., Young, W. L., Su, H., Lawton, M. T. Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.. J. Vis. Exp. (95), e50472, doi:10.3791/50472 (2015).

View Video