Adulte souris veineuse Modèle d'hypertension: l'artère carotide commune à externe Veine jugulaire anastomose.

Summary

Nous décrivons un procédé pour créer un modèle fiable de l'hypertension veineuse cérébrale chez la souris adulte. Ce modèle a été largement décrits et testés chez le rat. Ce nouvel homologue de la souris ouvre la possibilité d'utiliser des animaux génétiques modifiés et élargit ainsi les applications du modèle.

Abstract

La compréhension de la physiopathologie de malformations artério-veineuses cérébrales et fistules artério-veineuses se est améliorée grâce à des modèles animaux. Un modèle de rat créant une fistule artificielle entre l'artère carotide commune (CCA) et la veine jugulaire externe (CPA) a été largement décrit et prouvé techniquement possible. Cette construction provoque une hypertension veineuse cérébrale cohérente (CVH), et a donc contribué à l'étude de la contribution de l'hypertension veineuse à la formation, les symptômes cliniques, et le pronostic de MAV cérébrales et FAV durale. Modèles de souris ont été équivalentes ne décrit guère et ont montré des problèmes avec une sténose de la fistule. Un modèle murin établie permettrait l'étude de la physiopathologie non seulement mais aussi des thérapies génétiques potentiels pour ces maladies cérébrovasculaires.

Nous présentons un modèle de fistule artério-veineuse qui produit une hypertension veineuse intracrânienne durable chez la souris. Microsurgical anastomose of murin CCA et EJV peut être difficile en raison de l'anatomie diminutif et entraîner fréquemment dans une fistule non-brevet. Dans ce protocole, étape par étape, nous adressons à tous les défis importants rencontrés au cours de cette procédure. Éviter la rétraction excessive de la veine lors de l'exposition, en utilisant 11-0 au lieu de 10-0 sutures, et de faire une anastomose soigneusement planifiée fin à côte sont quelques-unes des étapes critiques. Bien que cette méthode nécessite des compétences de microchirurgie de pointe et une courbe d'apprentissage plus que l'équivalent chez le rat, il peut être constamment développé.

Ce modèle de roman a été conçu pour intégrer les techniques de souris transgéniques avec un système expérimental déjà bien établie qui se est avéré utile d'étudier les MAV cérébrales et FAV durale. En ouvrant la possibilité d'utiliser des souris transgéniques, un plus large éventail de modèles valides peut être réalisée et les traitements génétiques peut également être testée. Construction expérimentale pourrait également être adapté à l'étude des otses maladies cérébro-vasculaires liés à l'hypertension veineuse comme la migraine, l'amnésie globale transitoire, la cécité monoculaire transitoire, etc.

Introduction

Les modèles animaux d'hypertension veineuse cérébrale se sont révélés être un outil essentiel dans la compréhension de la physiopathologie de malformations artério-veineuses cérébrales et fistules artério-veineuses ^1-7. Le plus utilisé est le modèle de rat créée par une fistule artificielle entre l'artère carotide commune (CCA) et la veine jugulaire externe (CPA), qui provoque une hypertension veineuse cérébrale cohérente (CVH) chez le rat ^1,8-10. Modèles de souris équivalent, en ouvrant la possibilité d'utiliser différentes souches de souris transgéniques, permettrait une étude plus approfondie non seulement sur la physiopathologie, mais aussi des thérapies génétiques potentiels pour ces maladies cérébrovasculaires. En outre, le produit d'assemblage expérimentale pourrait également être adapté à l'étude d'autres maladies cérébro-vasculaires liées à l'hypertension veineuse telles que la migraine, amnésie globale transitoire, la cécité monoculaire transitoire, etc. ¹¹ Cependant, les tentatives antérieures pour construire ces modèles de souris have démontré les difficultés avec la perméabilité de la fistule en raison de l'anatomie diminutif ^5,12. Ici, nous décrivons notre protocole étape par étape pour une anastomose succès de la CCA et EJV murin qui se traduit à long terme de la fistule de brevet et un hypertension veineuse durable chez la souris.

Protocol

1. Préparation de la souris Induire une anesthésie générale chez la souris avec le gaz isoflurane. Injecter 0,15 ml de brupenorphine intrapéritonéale pour la gestion de la douleur. Avant de commencer, vérifiez si le niveau d'anesthésie est satisfaisante en piquant les pattes de la souris. Mettez la souris en décubitus dorsal avec les quatre membres fixées par un ruban adhésif. Enlever les poils du cou et la poitrine avec des ciseaux. Par injection sous-cutanée, administrer 0,2 à 0,4…

Representative Results

Le succès du modèle est une fistule artério-veineuse de brevet qui induit l'hypertension veineuse dans le cerveau de souris. Pour valider le modèle nous avons d'abord mesuré la pression veineuse intracrânienne dans le sinus sagittal de la souris à 2, 3 et 4 semaines après la chirurgie. 6 souris ont été affectés à différents chaque groupe de temps. La pression des sinus était de 8,8 ± 1,2 mmHg dans le groupe mesurés deux semaines après la chirurgie. Dans les 6 souris mesurées 3 semaines après l…

Discussion

Hypertension veineuse cérébrale soutenue a été étroitement liée à des manifestations cliniques plus graves et mauvais pronostic chez les patients atteints FAV durale et MAV cérébrales ^3. Ces effets de CVH ont été largement étudiés dans des modèles de rats ^1,2,8. Un modèle équivalent chez la souris permettrait l'utilisation d'animaux génétiquement modifiés qui finirait par permettre l'analyse des voies moléculaires impliquées sur la pathogenèse de l'hypertension…

Materials

10-0 Sterile Microsuture	Arosurgical Ic.	VT5A010Q10
11-0 Sterile Microsuture	Arosurgical Ic	VT4A00N07
DUROTIP Scissors	Aesculap	BC210R
Micro-Adson Tissue Forceps	Aesculap	BD510R
Microscissors	Aesculap	OC496R
Micro Forceps #5 Jewelers	Aesculap	BD331R
Angled Jewelers Forceps	Aesculap	BD329R
Micro Suture Forceps	Aesculap	BD338R
DUROGRIP Needle Holder	Aesculap	BM009R