Adult Mouse venøs hypertensjon Modell: arteria carotis communis til ekstern jugularvenen Anastomose.

Summary

Vi beskriver en metode for å lage en pålitelig modell for cerebral venøs hypertensjon hos voksne mus. Denne modellen er blitt omfattende beskrevet og testet i rotte. Denne nye motstykke i mus åpner muligheten for å bruke genetisk modifiserte dyr og derved utvider anvendelser av modellen.

Abstract

Forståelsen av patofysiologien av hjerne arteriovenøse misdannelser og arteriovenøse fistler har forbedret takket være dyremodeller. En rottemodell skape en kunstig fistel mellom den felles karotidarterie (CCA) og den ytre halsvenen (EJV) er blitt omfattende beskrevet og vist seg å være teknisk mulig. Denne konstruksjonen provoserer en konsistent cerebral venøs hypertensjon (CVH), og derfor har hjulpet studere bidraget av venøs hypertensjon til formasjon, kliniske symptomer, og prognose av hjerne AVMs og dural AVFs. Tilsvarende mus modeller har blitt bare knapt beskrevet og har vist problemer med stenose i fistel. En etablert murine modell ville tillate studiet av ikke bare patofysiologi men også potensielle genetiske terapi for disse cerebrovaskulære sykdommer.

Vi presenterer en modell av arteriovenøs fistel som gir en holdbar intrakranial venøs hypertensjon hos mus. Mikrokirurgisk anastomose of den murine CCA og EJV kan være vanskelig på grunn av minimale anatomi og ofte resultere i en ikke-patent fistel. I denne steg-for-steg-protokollen tar vi alle de viktige utfordringene som oppstår i løpet av denne prosedyren. Unngå for sterk tilbaketrekning av venen under eksponeringen, ved hjelp av 11-0 suturer i stedet for 10-0, og gjør et nøye planlagt ende-til-side anastomose er noen av de kritiske trinn. Selv om denne fremgangsmåten krever avanserte mikroevner og en lengre lærekurve som tilsvarer hos rotte, kan den gjennomgående utvikles.

Denne romanen modellen er designet for å integrere transgene mus teknikker med en tidligere veletablert eksperimentelt system som har vist seg nyttig å studere hjerne AVMs og dural AVFs. Ved å åpne muligheten for bruk av transgene mus, kan oppnås et bredere spektrum av gyldige modeller og genetiske behandlinger kan også bli testet. Den eksperimentelle konstruksjonen kan også bli ytterligere tilpasset til studiet av othennes cerebrovaskulære sykdommer relatert med venøs hypertensjon som migrene, forbigående global amnesi, forbigående monocular blindhet, etc.

Introduction

Dyremodeller av cerebral venøs hypertensjon har vist seg å være et viktig verktøy i forståelsen av patofysiologien av hjerne arteriovenøse misdannelser og arteriovenøse fistler ^1-7. Den mest brukte er rottemodell opprettet gjennom en kunstig fistel mellom den felles karotidarterie (CCA) og den ytre halsvenen (EJV), som provoserer en konsistent cerebral venøs hypertensjon (CVH) i rotte ^1,8-10. Tilsvarende mus modeller, ved å åpne muligheten for å bruke forskjellige transgen musestammer, ville tillate videre studier på ikke bare patofysiologi men også potensielle genetiske behandlingsformer for disse cerebrovaskulære sykdommer. Videre eksperimentell konstruksjon kan også bli ytterligere tilpasset til studiet av andre cerebrovaskulære sykdommer relatert med venøs hypertensjon som migrene, forbigående global amnesi, forbigående monocular blindhet, etc. ¹¹ Men tidligere forsøk på å konstruere disse mus modeller have demonstrerte vanskelighetene med åpenheten til det fistel på grunn av den bittelille anatomi ^5,12. Her beskriver vi vår trinn-for-trinn-protokollen for en vellykket anastomose i muse CCA og EJV som oversetter i et langsiktig patent fistel og en holdbar venøs hypertensjon hos mus.

Protocol

1. Klar Mouse Indusere narkose i musen med isofluran gass. Injisere 0,15 ml intraperitoneal brupenorphine for smertebehandling. Før du fortsetter, sjekk om anestesi nivået er tilfredsstillende ved stikk musens poter. Sette musen i ryggleie, med de fire lemmer fastsatt av teip. Fjerne hår av halsen og den øvre del av brystet med en saks. Via subkutan injeksjon administreres 0,2 til 0,4 ml av 0,9% saltløsning for å holde musen hydrert i løpet av den kirurgiske prosedyren. Klargjør op…

Representative Results

Et vellykket resultat av modellen er et patent arteriovenøs fistel som induserer venøs hypertensjon hos murine hjernen. Å validere modellen vi først målte intrakranielt venetrykk i sagital sinus av musene på to, tre og fire uker etter operasjonen. 6 forskjellige mus ble tildelt hver gang gruppen. Sinus Trykket var 8,8 ± 1,2 mmHg i gruppen målt to uker etter operasjonen. I de seks mus målte tre uker etter operasjonen, sinus press var 4,7 ± 1,4 mmHg. Til slutt måles de 6 mus fire uker etter operasjonen hadde en…

Discussion

Vedvarende cerebral venøs hypertensjon er nært beslektet med mer alvorlige kliniske manifestasjoner og dårlig prognose hos pasienter med dural AVFs og hjerne AVMs ^tre. Disse effektene av CVH har vært mye studert i rottemodeller ^1,2,8. En tilsvarende modell i musen ville tillate bruk av genmodifiserte dyr som til slutt ville tillate analyse av molekylære stier involvert på patogenesen av venøs hypertensjon og dens forhold til dural AVF og hjerne AVM.

Her rapporter…

Materials

10-0 Sterile Microsuture	Arosurgical Ic.	VT5A010Q10
11-0 Sterile Microsuture	Arosurgical Ic	VT4A00N07
DUROTIP Scissors	Aesculap	BC210R
Micro-Adson Tissue Forceps	Aesculap	BD510R
Microscissors	Aesculap	OC496R
Micro Forceps #5 Jewelers	Aesculap	BD331R
Angled Jewelers Forceps	Aesculap	BD329R
Micro Suture Forceps	Aesculap	BD338R
DUROGRIP Needle Holder	Aesculap	BM009R