Adulto Rato venoso Hipertensão Modelo: artéria carótida comum para External Jugular Vein anastomose.

Summary

Descreve-se um método para a criação de um modelo de confiança de hipertensão venosa cerebral no rato adulto. Este modelo tem sido amplamente descrita e testada em ratos. Este novo homólogo nos ratinhos abre a possibilidade de utilização de animais geneticamente modificados e, assim, alarga a aplicação do modelo.

Abstract

O entendimento da fisiopatologia das malformações arteriovenosas cerebrais e fístulas arteriovenosas melhorou graças a modelos animais. Um modelo de rato criando uma fístula artificial entre a artéria carótida comum (ACC) e da veia jugular externa (EJV) tem sido amplamente descrita e comprovada tecnicamente viável. Esta construção provoca uma hipertensão venosa cerebral consistente (CVH), e, portanto, tem ajudado a estudar a contribuição de hipertensão venosa para a formação, os sintomas clínicos, e prognóstico de MAVs cerebrais e FAV dural. Modelos de ratos equivalentes foram apenas pouco descrita e têm mostrado problemas com estenose da fístula. Um modelo murino estabelecida permitirá o estudo da fisiopatologia, não só mas também terapias genéticas potenciais para estas doenças cerebrovasculares.

Nós apresentamos um modelo de fístula arteriovenosa, que produz uma hipertensão venosa intracraniana durável no mouse. Microsurgical anastomose of o murino CCA e EJV pode ser difícil devido à anatomia diminuto e freqüentemente resultam em uma fístula não-patente. Neste protocolo passo-a-passo que enfrentar todos os desafios importantes encontrados durante este procedimento. Evitando a retracção excessiva da veia durante a exposição, utilizando suturas 11-0 10-0 em vez de, e fazendo uma anastomose cuidadosamente planeada extremo-a-lado são alguns dos passos críticos. Embora este método requer técnicas de microcirurgia avançada e uma curva de aprendizagem mais longo que o equivalente no rato, ele pode ser desenvolvido de forma consistente.

Este romance modelo foi concebido para integrar técnicas de camundongos transgênicos com um sistema experimental previamente bem estabelecida, que tem se mostrado útil para estudar AVMs cerebrais e FAV dural. Ao abrir a possibilidade de utilizar ratinhos transgénicos, um espectro mais amplo de modelos válidos, podem ser alcançados e tratamentos genéticos podem também ser testados. A construção experimental também pode ser ainda adaptado para o estudo de otsuas doenças cerebrovasculares relacionados com hipertensão venosa, como enxaqueca, a amnésia global transitória, cegueira monocular transitória, etc.

Introduction

Os modelos animais de hipertensão venosa cerebral provaram ser um instrumento fundamental para a compreensão da fisiopatologia das malformações arteriovenosas cerebrais e fístulas arteriovenosas ^1-7. O mais utilizado é o modelo de rato criado através de uma fístula artificial entre a artéria carótida comum (ACC) e a veia jugular externa (EJV), o que provoca uma hipertensão venosa cerebral consistente (CVH) no rato ^1,8-10. Modelos de ratos equivalentes, abrindo a possibilidade de utilizar diferentes estirpes de ratinhos transgénicos, que permitiria o estudo adicional sobre patofisiologia não só mas também terapias genéticas potenciais para estas doenças cerebrovasculares. Além disso, a construção do experimento, podem também ser ainda adaptado para o estudo de outras doenças cerebrovasculares relacionadas com a hipertensão venosa, tais como enxaqueca, amnésia global transitória, cegueira monocular transiente, etc. ¹¹ No entanto, tentativas anteriores para construir estes modelos de ratos hav demonstrou as dificuldades com a permeabilidade da fístula devido à anatomia diminutivo ^5,12. Aqui, descrevemos nosso protocolo passo-a-passo para a anastomose bem sucedida do murino CCA e EJV que se traduz em uma fístula patente a longo prazo e uma hipertensão venosa durável no mouse.

Protocol

1. Preparar o mouse Induzir a anestesia geral no rato com gás isoflurano. Administrar 0,15 ml de brupenorphine intraperitoneal para controle da dor. Antes de prosseguir, verifique se o nível de anestesia é satisfatória através da punção patas do rato. Coloque o mouse em decúbito dorsal, com os quatro membros fixos por fita adesiva. Remover o cabelo do pescoço e parte superior do tórax, com uma tesoura. Por meio de injecção subcutânea, administrar 0,2-0,4 ml de solução salina a 0,9% pa…

Representative Results

Um resultado positivo do modelo é uma fístula arteriovenosa patente que induz hipertensão venosa no cérebro murino. Para validar o modelo, inicialmente medido a pressão venosa intracraniana no seio sagital dos ratos em 2, 3 e 4 semanas após a cirurgia. 6 ratinhos foram atribuídos diferentes para cada grupo de tempo. A pressão do seio foi de 8,8 ± 1,2 mm Hg no grupo medido de duas semanas após a cirurgia. Nos 6 ratos medidos 3 semanas após a cirurgia, a pressão do seio foi de 4,7 ± 1,4 mmHg. Finalmente, os r…

Discussion

Hipertensão venosa cerebral sustentada foi intimamente relacionada com as manifestações clínicas mais graves e mau prognóstico em pacientes com FAV dural e MAVs cerebrais ^3. Estes efeitos da CVH têm sido amplamente estudado em modelos de ratos ^1,2,8. Um modelo equivalente no rato permitiria o uso de animais geneticamente modificados que acabaria por permitir a análise das vias moleculares envolvidas na patogênese da hipertensão venosa e sua relação com a FAV dural e AVM cérebro.

<p …

Materials

10-0 Sterile Microsuture	Arosurgical Ic.	VT5A010Q10
11-0 Sterile Microsuture	Arosurgical Ic	VT4A00N07
DUROTIP Scissors	Aesculap	BC210R
Micro-Adson Tissue Forceps	Aesculap	BD510R
Microscissors	Aesculap	OC496R
Micro Forceps #5 Jewelers	Aesculap	BD331R
Angled Jewelers Forceps	Aesculap	BD329R
Micro Suture Forceps	Aesculap	BD338R
DUROGRIP Needle Holder	Aesculap	BM009R