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Medicina

筋皮虚血再灌流傷害のラットモデル： 現場横腹直筋皮フラップで

Published: June 08, 2013
doi:
10.3791/50473
, ,
1Department of Surgery,Royal Infirmary of Edinburgh, 2Department of Nephrology,Royal Infirmary of Edinburgh

Summary

全組織転送が広く腫瘍切除および外傷後の形態および機能を回復させる再建手術で使用される。手術前に、この組織を前処理すると、結果を改善することがあります。この記事では説明し<em>その場で</emコンディショニング戦略をテストするための手段として、ラットの>横腹直筋皮弁（TRAM）。

Abstract

無料組織転送はローカルオプションまたはそれらを必要と複合組織に従順ではない複雑な欠陥を修復する再建手術のゴールドスタンダードです。虚血再灌流障害（IRI）が部分的自由フラップ故障の既知の原因であり、有効な治療法がありません。この傷害の実験モデルを確立することは、コストのかかる証明両方の大型哺乳類は、従来使用され、専門知識でこれらの手順の技術的な難しさで必要とされる財政的に一般的に経験豊かなマイクロ手術の専門医を採用する必要がありますすることができます。この出版物とビデオ顕微専門知識を必要としないラットのIRIのモデルの効果的な使用方法を示しています。この手順は、非外傷性クランプは、この手術に伴う虚血再灌流障害を再現するために利用される横方向の腹筋皮（TRAM）フラップの in situモデルである。レーザードップラーイメージング（LDI）スキャナはフラップ灌流と画像処理ソフト制を評価するために採用されている再、傷害の主要評価項目としてパーセンテージエリア皮膚の生存を評価するための画像J。

Introduction

このプロトコルの目的は、インターベンショナル戦略を調査することを可能にするフリー組織転送で観察された虚血再灌流障害の信頼性と再現性のあるモデルを実証することである。

無料組織転送は、受信者のサイトでネイティブ血管にフラップの切開血管の吻合でその組織の自家移植に続いて組織の孤立したブロックの血管の剥離として定義されています。手順は、FTT、自由フラップと呼ばれる転送される組織として知られています。

無料組織転送はローカルオプションが不適切、または使用できない複雑な、複合欠陥の補正のための金の標準的なアプローチではありません。1-4虚血再灌流障害（IRI）は、自由に組織の転送では避けられない失敗5,6フラップに貢献していない効果的な治療。無料のフラップ手術の選択科目性質はpharmacologiの管理を可能にIRIに対する前提条件にCALエージェント。

内皮活性化と代謝機能不全により微小循環を通じ障害フローにおけるIRIの結果は、7は毛細血管の透過性とその後の間質浮腫7、炎症細胞の流入、炎症性メディエーターの8リリース、活性酸素種9および補沈着を増加させた。10低酸素症のこの複雑なプロセスおよびその後の再潅流傷害、最終的に細胞死につながる。筋皮IRIのモデルが評価される臨床転帰に戦略を前処理の効果を可能にします。最近の研究は、ヒト対象と既存の動物データで観察された分子の変化を比較することにより、ヒトIRIの代理としてIRI研究の動物モデルの使用を検証した。10,11

ラット横腹直筋皮（TRAM）フラップはドイツ語12で、1993年に1987年に記載された英語で13。このモデルでは、無料のティッシュ転送に関連付けられたIRIを減らすために異なる戦略を調査するために安価な、堅牢なモデルとして幅広い人気を獲得した13-25。14,17-22これらの研究の大半は深い基づいunipedicled TRAMフラップとして設計され、劣った、 。とフォローアップ術後の異なる長さ（2から10日間） -これらの研究からのデータの腹部血管茎15-18,20-22比較は、異なる大きさの皮膚の島（31 cm 2と 10.5）を使用することによって複雑になる。これらの研究の対照群の平均総パーセンテージ面積フラップ壊死は69±6.2％（平均±SEM）である。それは、これらの6つの論文がすべての血管茎のキャリアとして腹直筋を採用しますが、分割して血管をmicroanastomoseまたはクランプ、公開しないことに注意すべきである。 Zhang ら 23女に優れ腹部血管に基づいて真の自由ラットTRAMフラップを記載している周は、隆起した血管が分割され、筋皮フラップが転送され、脚の付け根の血管にmicroanastomosedた。の0.5mm口径船 – この難しいテクニックは0.45のmicroanastomosisを必要とした。唯一の15が実行され、これらの67％生存した。23 Zhang らによって記述されたモデル。それは本当にFTT中に発生した怪我をミラーとして23は 、人間の自由TRAMフラップのための優れたモデルです。たラットTRAMフラップの他の発行されたモデルは、より正確に人間の有茎TRAM中に発生した傷害を反映するが、血管茎として再灌流に続いて虚血期間を経ていない、これらのフラップがクランプしないまたは分割んとして正確にIRIを反映していないとmicroanastomosis、実行。このプロトコルとビデオ​​はIRIがmicroclampsを使用して複製されているラットTRAMを使用して自由に組織移転の新モデルを記述する。これは、より忠実に茎TRAMの前任者よりIRI複製しかしperformiよりも技術的には簡単ですNG microanastomosis。 Microclamps広く固形臓器移植に関連付けられたIRIを再作成するために移植の研究で採用されてきた26-33しかし、これは、それがラットTRAMフラップに記載されているのは初めてです。

Protocol

すべての手術は、英国のホームオフィスやエジンバラの獣医サービス部の大学が定めるガイドラインに従って行われる。 1。外科手術のセットアップメモクリーン手術スクラブ、ガウン、スクラブキャップとマスクに変更します。 70％イソプロピルアルコール2％クロルヘキシジンを備えた機器を含む手術室の全表面を清掃してください。 手術に先立ち、す…

Representative Results

ラットモデルは、大型動物モデルよりも経済的であり、36は、本質的に病害抵抗性であり、遺伝的に操作することができる。げっ歯類として緩い肌の動物は、例えば、ヒトおよびブタのような固定された肌の動物と比較して皮膚の血液供給の異なる配置を有すると考えられていた。緩い皮動物では、皮膚は主にこれとは対照的に覆っている皮膚（ 図4）に脂肪皮下を通過?…

Discussion

修正やトラブルシューティング

ここで紹介するプロトコルは、そのプロセスの更なる理解を可能にする実験系においてフリー組織転送に見られるIRIを再生し、IRIを改善し、結果を改善する手段を調査する手段を提供する。それは、非支配に基づいてされた場合、これは簡単に、より深刻な傷害を生成するように変更することができ、深い、下腹茎または虚血時間場合が増加…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作品は、医学研究評議会助成G1000299によって賄われていた。

対応する著者は、手術中に支援するためのゲイリー·ボースウィック、エジンバラ大学に感謝したいと思います。

著者は、ヘレン·ダグラスとイアン·マッケイからアドバイスを認識し、私たちは彼らのディープ下腹（ディエップ）フラップ手順（Canniesburn整形外科ユニット、グラスゴー王立診療所、84キャッスルストリート、グラスゴーG4 0SF、英国）を観察することができるようにしたいと思います。

著者はまた、この記事のためのビデオを製造する彼の助けのためにエディンバラ大学のゲイリーブラッキーに感謝したいと思います。

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Moor LD12 laser doppler imaging scanner http://gb.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8
Complete homeothermic blanket system with flexible probe. Small. 230 VAC, 50 Hz 507221F www.harvardapparatus.com
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved 11052-10 2, http://www.finescience.de
Acland clamps 00398 V B-1 ‘V’ pattern clamps used on both artery and vein. http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf
Clamp applicator CAF-4 http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf
Gemini cautery unit 726067 www.harvardapparatus.com
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 D-5a.2 http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 JFA-5b http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 JF-5 http://www.merciansurgical.com
Acland Single Clamps B-1V (Pair) 396 http://www.merciansurgical.com
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight 67 http://www.merciansurgical.com
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT EA7613-11 http://www.merciansurgical.com
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT EA7652-14 http://www.merciansurgical.com
Derf Needle Holders 12 cm TC 703DE12 http://www.merciansurgical.com
Ethilon 5-0 W1618 http://www.farlamedical.co.uk/
Vicryl rapide 6-0 W9913 http://www.millermedicalsupplies.com/
Instrapac – Adson Toothed Forceps (Extra Fine) 7973 http://www.millermedicalsupplies.com/
Castroviejo needle holders 12565-14 http://s-and-t.ne
Heat Lamp http://www.chicken-house.co.uk
Silicone sheeting 0.3 mm translucent http://www.silex.co.uk/
Image J software http://rsbweb.nih.gov/ij/
Zeiss OPMI pico http://www.zeiss.co.uk/
Operating microscope
Vet tech solution isofluorane rig http://www.vet-tech.co.uk/
Vet tech solution isofluorane rig http://www.vet-tech.co.uk/
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Keywords: In Situ TRAM FlapRat ModelIschemia-reperfusion InjuryReconstructive SurgeryLaser Doppler ImagingImage JMicrosurgery
check_url/it/50473?article_type=t

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Edmunds, M., Wigmore, S., Kluth, D. In situ Transverse Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A Rat Model of Myocutaneous Ischemia Reperfusion Injury. J. Vis. Exp. (76), e50473, doi:10.3791/50473 (2013).
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