Rivista
/
Biologia
/
Protein Purification-libera Metodo di Binding Affinity Determinazione Thermophoresis microscala
JoVE Journal
Biologia
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Biologia
Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Protein Purification-libera Metodo di Binding Affinity Determinazione Thermophoresis microscala

DOI:
10.3791/50541-v

•

10:22 min

•

August 15, 2013

•

, , , , , ,
1Cancer and Inflammation Program,National Cancer Institute, 2Basic Science Program,SAIC-Frederick, Inc., 3Departments of Oncology and Radiation Medicine,Georgetown University Medical Center, 4Structural Biophysics Laboratory,National Cancer Institute

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:43Preparation of Cell Lysate
  • 03:20Determination of Optimal Lysate Dilution
  • 04:02Microscale Thermophoresis Binding Studies
  • 07:05Microscale Thermophoresis Data Analysis
  • 08:25Results: Measuring the Affinity of Non-phosphorylated STAT3 Protein Binding to Oligonucleotides
  • 09:40Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Thermophoresis microscala (MST) può essere ampiamente usato per la determinazione di affinità di legame senza purificazione della proteina bersaglio da lisati cellulari. Il protocollo prevede sovraespressione della proteina GFP-fusa, lisi cellulare in condizioni non denaturanti, e la rilevazione di segnale MST in presenza di concentrazioni variabili di ligando.

Tags

Protein PurificationMicroscale ThermophoresisBinding AffinityKD DeterminationGFP-fused ProteinSTAT3Cell LysateNon-denaturing ConditionsDrug DiscoveryProtein Interactions

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/50541?article_type=v

Microvolumi Concentrazione Determinazione delle proteine ​​con il NanoDrop 2000c Spettrofotometro
check_url/it/50541?article_type=v

L'importanza della concentrazione della proteina corretta per Cinetica e determinazione affinità nella struttura-funzione di analisi
check_url/it/50541?article_type=v

Isolamento di Labile Multi-proteina complessi da In vivo Controllato Cellular Cross-Linking e Immuno-magnetica Cromatografia di affinità
check_url/it/50541?article_type=v

PAR-Clip - un metodo per identificare trascrittoma livello i siti di legame delle proteine ​​RNA binding
check_url/it/50541?article_type=v

Vescicole lipidiche-mediata Cromatografia di affinità mediante Magnetic separazione delle cellule attivate (LIMACS): un nuovo metodo per l'analisi delle interazioni proteina-lipide
check_url/it/50541?article_type=v

Purificazione delle proteine ​​ortogonali Facilitato da una piastrina Affinity Bispecific
check_url/it/50541?article_type=v

Individuazione di partner proteine ​​interagenti mediante Tandem Affinity Purification
check_url/it/50541?article_type=v

Analisi in tempo reale di Trasporti retinolo da parte del recettore di membrana di proteine ​​plasmatiche Retinol Binding
check_url/it/50541?article_type=v

Un metodo di quantificazione sensibile e specifico per la determinazione del siero miosina cardiaca Binding Protein-C da elettrochemiluminescenza immunoenzimatico
check_url/it/50541?article_type=v

Identificare proteina-proteina interazione in<em> Drosophila</em> Adult capi di Tandem Affinity Purification (TAP)

Read Article