Summary

자유롭게 마우스를 동작에 문제가있는 Perforant 통로 - 치아 이랑 (dentate gyrus) 시냅스의 장기 강화 작용

Published: November 29, 2013
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Summary

신경 질환의 유전자 변형과 녹아웃 마우스 모델은 정상 및 비정상 신경 생리학에있는 유전자의 역할을 공부하는 데 유용합니다. 이 문서는 장기 상승 작용, 유전자 변형에, 학습과 기억의 기초 및 신경 병리학의 마우스 모델을 행동 자유롭게 녹아웃 수있는 세포 메커니즘을 연구하는 데 사용할 수있는 방법에 대해 설명합니다.

Abstract

시냅스 효능의 장기 상승 작용의 연구는 잠재적 인 세포 메커니즘을 기본 학습 및 정보 저장 등이 매력적 특성을 갖는 활동에 의존하는 시냅스 현상은 오래 해마, 편도체의 다양한 신경 회로의 생리를 규명하는 데 사용되었습니다 및 기타 변연계와 대뇌 피질의 구조. 이 염두에두고, 신경 질환의 유전자 변형 마우스 모델은 학습, 감정과 정보에 관련된 신경 네트워크의 정상 및 비정상 시냅스 통신 유전자의 역할에 대한 이해를 개발하는 장기 potentiation (LTP) 연구를 수행하는 데 유용 플랫폼을 나타냅니다 처리. 이 문서는 안정적으로 자유롭게 행동 마우스에서 LTP를 유도하는 방법을 설명합니다. 이러한 방법은 유전자 도입의 연구에 사용될 수 있고 자유롭게 신경 퇴행성 질환의 마우스 모델을 행동 녹아웃.

Introduction

유전자를 조작 할 수있는 기술의 개발은 거의 모든 신경 변성 및 신경 질환의 유전자 녹아웃 마우스 모델을 생산하고있다. 이것은 이전에 마우스 동물 모델에 큰 설치류에 사용되는 전기 생리학 연구 기법의 번역을 필요하게되었다. 하나의 신경 생리 학적 조사 기술은 여러 가지 신경 병리학 적 질환과 관련된 신경 세포의 네트워크 내에서 시냅스 연결의 효능을 테스트하기 위해 사용하는 장기 potentiation (LTP)입니다. 이 프로토콜은 자유롭게 마우스를 행동에 LTP의 믿을 수있는 전기 생리학 연구에 대한 기술에 대해 설명합니다. 기타 이상이 프로​​토콜의 장점은 간단하고 구현하기 쉬운이며 그것이 고가의 컴퓨터 제어 마이크로 드라이브 시스템 또는 이용 전계 효과 트랜지스터 headstages의 이용도를 요구하지 않는 한도 적은 비용이다하고, 우리의 지식, 만성 전기 생리 레코딩의 t의 첫번째 비디오 프로토콜O 자유롭게 마우스를 행동에 LTP를 공부합니다. 이를 위해, 우리는이 문서에서 자유롭게 행동 생쥐의 장기 상승 작용을 연구하기위한 간단한 방법을 설명합니다. 이 방법은 쉽게 신경 병리학 적 질환의 유전자 녹아웃 마우스 모델로 번역 할 수 있습니다.

Protocol

이 프로토콜은 3, 18 세 30 ~ 50 g을 대략 체중 개월)의 마우스에 적합합니다. 마우스는 잭슨 연구소 (바 하버, ME)에서 얻을 수 있습니다. 모든 수술 및 실험 프로토콜은 트리니티 대학 동물 케어 및 사용위원회에 의해 승인 및 실험 동물의 관리 및 사용에 대한 NIH 가이드에 따라되었습니다했다. 1. 동물 준비 및 외과 적 치료 케타민 (25 ㎎ / ㎖), 자일 라진 (2.5 ㎎ / ㎖) 및 아세 프로 마진 (0….

Representative Results

. 표 1은이 프로토콜에서 사용되는 DG와 MPP의 좌표 그림 1A는 두개골의 대상 구조의 표시를 보여줍니다 보여준다. 또한 접지 전극과 기준 전극의 위치는 제시된 그림 1B는 담당자가 응답을 추적 모두 사전 되살려줍니다 와 같은 동물에서 posttetanization. posttetanization가 응답.도 1c는 응답 진폭을 정량화하는 데 사용되는 방법을 도시 LTP 유도 2 ?…

Discussion

이 프로토콜에서는, 우리는 자유롭게 행동 마우스에 DG에서 LTP 공부를위한 안정적이고 간단한 방법을 증명하고있다. 깨어있는 쥐에서 LTP의 많은 연구가 3,4를 수행하는 동안, 거의가 주로 생쥐의 제한 두개골 부동산 및 평균 체중을 기준으로 전극 headstages의 무게에 의해 제기 된 기술적 인 복잡성에 깨어 마우스에서 수행되었다 마우스 5. 자유롭게 마이크로 드라이브 전극 시스템 ?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

박사 조셉 Bronzino 박사 카 미스 아부 Hassaballah 씨 RJ 오스틴 LaFrance 및 양 제시카 Koranda : 저자는 다음을 인정하고 싶습니다.

Materials

Ketamine (100 mg/ml) Henry Schein 10177
Xylazine (20 mg/ml) Henry Schein 33197
Acepromazine (10 mg/ml) Henry Schein 2177
Dental acrylic powder Lang Dental Manufacturing Co. 1330CLR
Dental acrylic liquid Lang Dental Manufacturing Co. 1306CLR
Tungsten wire (0.127 mm) World Precision Instruments TGW0515
Stainless Steel Hypodermic Tubing (0.286 mm) World Precision Instruments 832400
Flunixin (50 mg/ml) Henry Schein 14165
Epoxilyte Superior Essex EP 6001-M
Stainless steel wire insert (0.2 mm) World Precision Instruments 792900
Stereotaxic frame apparatus Kopf Instruments Model 902
Ear cuffs (ear cups) Kopf Instruments Model 921 
Electrophysiological stimulator Astro-Med, Inc. S88
Digital oscilloscope B & K Precision Corp. 2542
Current isolation unit Astro-Med, Inc. PSIU-6
Differential amplifier World Precision Instruments, Inc. DAM-50
Commutator Plastics One SLC6
Dental drill Stoelting 58650

Riferimenti

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Citazione di questo articolo
Blaise, J. H. Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice. J. Vis. Exp. (81), e50642, doi:10.3791/50642 (2013).

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