Summary

Microfabrication של דפוסי זהב Nanoporous לסלולרי מהותי מחקרי אינטראקציה

Published: July 15, 2013
doi:

Summary

אנו מדווחים על טכניקות לסרטים באמצעות הדפסת סטנסיל וphotolithography, כמו גם שיטות לתאי תרבות על דפוסי microfabricated הדקים זהב nanoporous micropattern. בנוסף, אנו מתארים שיטות ניתוח תמונה למאפיינות מורפולוגיה של החומר ואת התאים בתרבית באמצעות אלקטרונים סורקים וטכניקות מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

Abstract

חומרי Nanostructured עם גדלי תכונה בעשרות ננומטרים הגבירו את הביצועים של מספר טכנולוגיות, כולל תאי דלק, biosensors, ציפויי מכשיר ביו, וכלים אספקת סמים. זהב Nanoporous (NP-Au), המיוצר על ידי תהליך הרכבה עצמית בקנה מידה ננו, הוא חומר חדש יחסית שמציג שטח גדול משטח יעיל, מוליכות חשמלית גבוהות, ופעילות קטליטית. מאפיינים אלו הפכו את NP-Au חומר אטרקטיבי לקהילה מדעית. רוב המחקרים על NP-Au להעסיק דגימות מאקרו בקנה מידה ולהתמקד במדע בסיסי של החומר והיישומים קטליטיים וחיישן שלה. דגימות מאקרו בקנה המידה להגביל את הפוטנציאל של NP-Au במערכות מיניאטורי, כולל התקנים ביו. על מנת לטפל בבעיות אלה, אנחנו בהתחלה לתאר בשתי שיטות שונות לסרטים דקים micropattern NP-Au על מצעים נוקשים. השיטה הראשונה מעסיקה מסכות סטנסיל ידני המיוצרים ליצירת דפוסי NP-Au מילימטר בקנה מידה, whilדואר השיטה השנייה משתמשת photolithography המראה לדפוסים תת מילימטר בקנה מידת דפוס. ככל שהסרטים הדקים NP-Au מתקבלים על ידי תהליך גמגום בתצהיר, שהם בקנה אחד עם טכניקות microfabrication קונבנציונליות, ובכך המתאימים לשילוב קליל למיקרוסיסטמס. מערכות אלה כוללות פלטפורמות biosensor חשמליים-מיעון שנהנים מאזור הגבוה יעיל פני השטח, מוליכות חשמליות, ומשטח bioconjugation מבוסס זהב תיאול. אנו מתארים תרבית תאים, immunostaining, וטכניקות עיבוד תמונה לכמת האינטראקציה של NP-Au עם תאי יונקים, וזה פרמטר חשוב לביצועים מסוימים biosensors. אנו צופים כי בטכניקות מאוירות כאן יסייעו שילוב של NP-Au בפלטפורמות באורך סולמות שונים וביישומים רבים, כוללים חיישנים ביולוגיים, מערכות אחסון אנרגיה, וזרזים.

Introduction

<p class="jove_content"> חומרים בעלי תכונות בקנה מידה ננו הראו הבטחה בשיפור יישומים שונים, כולל תאי דלק<sup> 1</sup>, חיישנים<sup> 2,3</sup> והתקנים, ביו<sup> 4,5</sup>. חומר חדש יחסית הוא זהב nanoporous (NP-Au), אשר מופק על ידי תהליך הרכבה עצמית בקנה מידה ננו. מבשר על NP-Au הוא סגסוגת זהב שמורכב בדרך כלל מכסף ב -60% עד 80% על ידי אחוז האטומי. בקצרה, nanostructure הפתוחה הנקבובית האופיינית היא התוצאה של סידור מחדש של אטומי זהב באשכולות כמו כסף הוא נמס על ידי חומצה חזקה (<em> לדוגמה:</em> חומצה חנקתית 70%) או מתחת לפוטנציאל אלקטרוכימי<sup> 6-8</sup>. יתרונות NP-Au מכמה תכונות רצויות, כולל שטח פנים יעילים גדולים, מוליכות חשמליות גבוהות, טכניקות functionalization משטח מבוססות היטב, biocompatibility<sup> 9</sup>. למרות שחלה התרחבות מהירה של מחקרים בNP-Au, רובם מתמקדים בתכונות מכאניות של NP-Au<sup> 10,11</sup> פעילות הקטליטית<sup> 12</sup>, וביצועי חישת biomolecular<sup> 13-15</sup>. בעוד שהתכונות הרצויות הן שימושיות ביותר עבור מספר כלים ביו<sup> 16,17</sup>, את היישומים בתחום זה היו מוגבלים. סיבה אפשרית אחת לכך היא שרוב המחקרים השתמשו בעיקר דגימות מאקרו בקנה מידה (<em> לדוגמה:</em> גיליונות, foils, ומטילים) ואת הטכניקות לשילוב NP-Au במערכות מיניאטורי נשארו בינוני. למעשה יש רק קומץ דוגמאות של שימוש בטכניקות microfabrication קונבנציונליים המעסיקות סרטי NP-Au<sup> 16-20</sup>. עם כניסתו של טכנולוגיית מזעור וצורך בכלים ביו רומן, זה הפך להיות חיוני כדי להיות מסוגל לשלב חומרים חדשים למכשירים. זה בדרך כלל דורש שניתן להפקיד את החומרים ועם דפס של טכניקות microfabrication קונבנציונליות. בנוסף, כימות מהירה של אינטראקציות תא מהותיות נחוצה בדרך כלל כדי להעריך את ההתאמה הביולוגית של חומר חדש. המטרה של מאמר זה היא להדגים טכניקות בסיסיות לסרטי NP-Au micropattern ולכמת גם nanostructure ואינטראקציות תא חומר דרך עיבוד תמונה דיגיטלי.</p>

Protocol

1. ייצור זהב Nanoporous מצעים נקיים בפתרון Piranha הוסף 25 מ"ל מי חמצן (30%) לחומצה גופרתית 100 מ"ל (96%) בצלחת גיבוש ומחמם את התערובת עד 65 מעלות צלזיוס על פלטה חמה. התראה: הנוזלים הם…

Representative Results

איור 1 מתאר את הצעדים פרוצדורליים הגדולים, כולל יצירת הדפוסים NP-Au, תאי culturing, כימות nanostructure, ואפיון מורפולוגיות סלולריים. סטנסיל אלסטומר שמוצג באיור 2 א (עליון) משמש ליצירת דפוסי NP-Au המוצגים בתמונות שמתחת. איור 2b הוא תצלום של סירת הפורצלן לדגי?…

Discussion

אנו מדגימים שתי טכניקות שונות לסרטי NP-Au micropattern להרחבת שימוש בסרטים האלה במיקרוסיסטמס ומחקרים ביולוגיים. זהב גמגום ציפוי וכסף הוא שיטה תכליתית ליצור דפוסי NP-Au, כמקרטע תואם את תהליכי microfabrication קונבנציונליים וסגסוגת בהרכב והעובי ניתן לשלוט בקלות על ידי שינוי סמכויות הא…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

א 'וד' Kurtulus Dimlioglu נתמך על ידי אוניברסיטת קליפורניה מעבדה אגרות פרס תכנית מחקר 12-LR-237,197. פ Daggumati נתמך על ידי אוניברסיטת קליפורניה דיוויס השקעות מחקר בפרס המדעים והנדסה (עלייה). CA צ'פמן נתמך על ידי מחלקה לחינוך לתארים מתקדמים תחומי סיוע של מלגת צורך הלאומית. עבודה זו נתמכה על ידי תכנית UC מעבדת מחקר עמלות, עליית דייוויס UC, וUC Davis המכללה אקדמי להנדסת סטארט כספים.

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Gold target Lesker EJTAUXX403A2 Precursor to alloy for producing np-Au
Chrome target Lesker EJTCRXX353A2 Adhesive layer
Silver target Lesker EJTAGXX403A2 Precursor to alloy for producing np-Au
Porcelain boat Thomas Scientific 8542E40 Used for processing small samples
Nitric acid Sigma-Aldrich 43873 Used at 70% for dealloying
Sulfuric acid J.T Baker 7664-93-9 Used at 96% for piranha cleaning
Hydrogen peroxide J.T Baker 7722-84-1 Used at 30% for piranha cleaning
Biopsy punches Ted Pella 150xx Available in several sizes
Silicone elastomer sheets Rogers Corporation HT 6240 Available in several thicknesses
Hexamethyldisilazane Sigma-Aldrich 440191-100ML Used as adhesion promoter for positive resist
Microposit MF CD26 Shipley 38490 Positive photoresist developer
PRS 3000 J.T Baker JT6403-5 Positive photoresist stripper
Circular glass coverslips (12 mm) Ted Pella 26023 Used as substrate for metal patterns and cell culture
Glass slides (1 x 3 inch) Ted Pella 26007 Used as substrate for metal patterns
Kapton polyimide tape VWR 82030-950 Used for securing elastomer
Transparency masks Output City Used in photolithography http://www.outputcity.com/
Plasma cleaner Harrick Plasma PDC-32G Used for activating glass surfaces
Sputtering machine Kurt J. Lesker LAB18 Used for depositing metals

Riferimenti

  1. Arico, A. S., Bruce, P., Scrosati, B., Tarascon, J. M., Van Schalkwijk, W. Nanostructured materials for advanced energy conversion and storage devices. Nature Materials. 4, 366-377 (2005).
  2. Roy, S., Gao, Z. Nanostructure-based electrical biosensors. Nano Today. 4, 318-334 (2009).
  3. Chen, C. L., et al. DNA-decorated carbon-nanotube-based chemical sensors on complementary metal oxide semiconductor circuitry. Nanotechnology. 21, 095504 (2010).
  4. Lu, J., Rao, M. P., MacDonald, N. C., Khang, D., Webster, T. J. Improved endothelial cell adhesion and proliferation on patterned titanium surfaces with rationally designed, micrometer to nanometer features. Acta Biomaterialia. 4, 192-201 (2008).
  5. Wagner, V., Dullaart, A., Bock, A. K., Zweck, A. The emerging nanomedicine landscape. Nat. Biotechnol. 24, 1211-1218 (2006).
  6. Weissmüller, J., Newman, R., Jin, H., Hodge, A., Kysar, J. Theme Article – Nanoporous Metals by Alloy Corrosion: Formation and Mechanical Properties. Materials Research Society Bulletin. 34, 577-586 (2009).
  7. Erlebacher, J., Aziz, M., Karma, A., Dimitrov, N., Sieradzki, K. Evolution of nanoporosity in dealloying. Nature. 410, 450-453 (2001).
  8. Okman, O., Lee, D., Kysar, J. W. Fabrication of crack-free nanoporous gold blanket thin films by potentiostatic dealloying. Scripta Mater. 63, 1005-1008 (2010).
  9. Seker, E., Reed, M., Begley, M. Nanoporous Gold: Fabrication, Characterization, and Applications. Materials. 2, 2188-2215 (2009).
  10. Biener, J., et al. Size effects on the mechanical behavior of nanoporous Au. Nano Lett. 6, 2379-2382 (2006).
  11. Senior, N., Newman, R. Synthesis of tough nanoporous metals by controlled electrolytic dealloying. Nanotechnology. 17, 2311-2316 (2006).
  12. Zielasek, V., et al. Gold catalysts: Nanoporous gold foams. Angew. Chem. Int. Ed. 45, 8241-8244 (2006).
  13. Wittstock, A., Biener, J., Bäumer, M. Nanoporous gold: a new material for catalytic and sensor applications. PCCP. 12, 12919-12930 (2010).
  14. Shulga, O., et al. Preparation and characterization of porous gold and its application as a platform for immobilization of acetylcholine esterase. Chem. Mater. 19, 3902 (2007).
  15. Shulga, O., Zhou, D., Demchenko, A., Stine, K. Detection of free prostate specific antigen (fPSA) on a nanoporous gold platform. The Analyst. 133, 319-322 (2008).
  16. Seker, E., et al. The fabrication of low-impedance nanoporous gold multiple-electrode arrays for neural electrophysiology studies. Nanotechnology. 21, 125504 (2010).
  17. Seker, E., Berdichevsky, Y., Staley, K. J., Yarmush, M. L. Microfabrication-Compatible Nanoporous Gold Foams as Biomaterials for Drug Delivery. Advanced Healthcare Materials. 1, 172-176 (2012).
  18. Okman, O., Kysar, J. W. Microfabrication of Nanoporous Gold. Nanoporous Gold: From an Ancient Technology to a High-Tech Material. 22, 69 (2012).
  19. Lee, D., et al. Microfabrication and mechanical properties of nanoporous gold at the nanoscale. Scripta Mater. 56, 437-440 (2007).
  20. Seker, E., et al. The effects of post-fabrication annealing on the mechanical properties of freestanding nanoporous gold structures. Acta Mater. 55, 4593-4602 (2007).
  21. Parida, S., et al. Volume change during the formation of nanoporous gold by dealloying. Phys. Rev. Lett. 97, 35504-35506 (2006).

Play Video

Citazione di questo articolo
Daggumati, P., Kurtulus, O., Chapman, C. A. R., Dimlioglu, D., Seker, E. Microfabrication of Nanoporous Gold Patterns for Cell-material Interaction Studies. J. Vis. Exp. (77), e50678, doi:10.3791/50678 (2013).

View Video