En ny musemodel af Endovaskulær aortaaneurisme Repair

Summary

Histologiske og biokemiske ændringer efter aneurisme endograft udelukkelse er stadig uklart. Vi beskriver en ny model for endograft implantation på et murint aneurisme. Gennem blodprop analyser med og uden persistente cirkulerende blod stream interface, og nye endovaskulær biomaterialer evaluering, vil denne model bidrage til bedre at forstå endovaskulær aneurisme udstødelse Sygdomsbiologi.

Abstract

Endovaskulær aneurisme udstødelse er en valideret teknik til at undgå aneurismebrud. Langsigtede resultater fremhæve teknik begrænsninger og nye aspekter af abdominalt aortaaneurisme (AAA) patofysiologi. Der er ingen abdominalt aortaaneurisme endograft udelukkelse model billig og reproducerbar, hvilket ville tillade dybe undersøgelser af AAA før og efter behandlingen. Vi hermed beskrive, hvordan at fremkalde og derefter at udelukke med en overdækket koronar stentgraft et abdominalt aortaaneurisme i en rotte. Den velkendte elastase induceret AAA model blev først rapporteret i 1990 ¹ i en rotte, så beskrevet i mus ^2. Elastin nedbrydning fører til dilatation af aorta med inflammatorisk infiltration af bugvæggen og intra luminale trombe, der matcher med humant AAA. Endovaskulær udelukkelse med lille overdækket stentgraft udføres derefter, eksklusive eventuelle interaktioner mellem cirkulerende blod og aneurisme blodprop. Passende udstødelse og stentgraft patency erbekræftet før eutanasi af en angiografi troede venstre halspulsåre. Delvis kontrol elastase diffusion gør aneurisme form forskellig for hvert dyr. Det er vanskeligt at skabe en aneurisme, som vil give en passende længde af aorta under aneurismet for en nem stentgraft introduktion og med tilstrækkelig proksimal og distal hals for at forhindre endolækager. Masser af fejl kan føre til stentgraft introduktion, der til tider føre til aorta tåre med smerter og problemer at sy det, og endotel skade med posten op aorta trombose. Give aspirin til rotter før stentgraft implantation nedsætter fejlrate uden større blødning. Fastspænding tiden aktiverer neutrofile, endotel og blodplader, og kan interferere med biologisk analyse.

Introduction

Endovaskulære færdigheder har gjort fremskridt siden den første endovaskulær aortaaneurisme reparation (EVAR) ved at Parodi i 1991 ^3, næsten halvdelen af alle abdominale aneurismer behandles nu af EVAR ^4.. I modsætning kirurgi efterlader EVAR tromben, at udelukke det fra systemisk blodbanen. Aneurismer er kendetegnet ved en hæmoglobinkoncentration rige flere lag trombe, en tynd medier og en fibrosed og betændt adventitia. Den afgørende rolle for proteolyse ⁵ i aneurismet progression er påvist tredive år siden ^{6, 7:} aneurismesækken trombe er forbundet med en tynd aortavæg, lysering af elastin, lav densitet af glatte muskelceller i medierne, og et højt niveau af immuno -inflammatorisk adventitiale reaktion ^8,9. Disse ændringer tyder på, at proteolytisk enzymatisk aktivitet forekommer i tromben, snarere end direkte i aortavæggen.

Desuden er det luminale lag af tromben rig på agglutinerede røde blodlegemer ceLLS frigiver hæmoglobin. De er primært involveret i dannelse af fibrin, blodpladeaktivering og inducere thrombin dannelse. Endelig trombe inducerer også t-PA og plasminogen fastholdelse, der er involveret i fibrinolyse og rekruttering leukocytter, primært neutrofile. Det er 12 gange mere vigtigt i blodprop end i blodet ^10.. Deres tilstedeværelse er forbundet med en høj grad af matrixmetalloproteinase type 8 (MMP-8), MMP-9 og elastase: de frigiver granulære serinproteaser og pro oxidative midler fører til nedbrydning af fibrillære matrix, og i sidste ende aortavæggen briste ^{9,11 -13.}

Valgfag aneurisme indgreb har til formål at forhindre brud. EVAR efterlader både aneurisme væg og trombe intakt. Således er aneurisme perfusion af aorta sikkerheder (lumbal arterier, ringere mesenterialarterie …), opkaldt endolækage, og er en specifik komplikation af endovaskulær behandling ^14,15, undertiden fører til brud EveN med lavt tryk endolækager. I visse patienter, er der ingen stigning i aneurisme diameter ^16. Interaktion mellem cirkulerende blod og aneurismal væg opretholder den nævnte intra luminale trombe biologisk aktivitet. Derfor, type V endolækager, defineret som udvidelse af aneurismesækken uden identificeret endolækage, kunne forklares ved enzymatisk aktivitet inde i aneurisme trombe.

Hverken radiologisk billeddannelse (18FDG-PET scanning, blodpladeaktivering scintigrafi, jern oxyde kontrast MRI17) eller perifere blod prøvetagning (MMP-9, blodpladeafledte mikropartikler, plasmin / anti-plasmin kompleks), der bruges til at udforske den endovaskulære indvirkning på aortaaneurismer i mennesker direkte evaluere biokemiske veje.

I vores viden, er der ingen nogen reproducerbare og billig eksperimentelle aneurisme udstødelse dyremodeller. Denne ene giver før og efter aneurisme udstødelse biologiske og histologiske ændringer, der skal udforskes.

Protocol

Metoder Protokollen er blevet godkendt af Bichat-Debré Etik udvalg (N ° 2012-15/698-0074). Den elastase perfusion model er første gang beskrevet af Anidjar i 1990 1: abdominalt aortaaneurisme er foranlediget af elastase perfusion i Wistar rotter i alderen 8 til 9 uger 250-300 g. To til fire uger senere, er en re-laparotomi udføres, og en diameter på 3 mm dækket koronar stentgraft bruges til at udelukke aneurismen. Transplantatet, indsættes gennem e…

Representative Results

Aneurisme er fastgjort i en paraformaldehydet 4% opløsning i løbet af 24 timer, og derefter ind i en phosphatbufret saltvandsopløsning indtil fiksering i en harpiks blok. Vi bruger en HPS (Hæmatoxylin Phloxin Safran) (Figur 1) farvning, viser healing proliferative celler omkring PTFE (Figur 2). Mesenchymceller derefter karakteriseret ved α-actin-farvning (figur 3). <img src="/files/ftp_upload/5…

Discussion

To modeller af AAA er allerede blevet beskrevet i vores lab: xenograft ¹⁹ og elastase inducerede modeller ¹ Elastase model er den mest ligner menneskelige aortaaneurismer:. En stor omkredsen intraluminal blodprop derefter udelukkes ved endovaskulær aneurisme reparation.

Endolækager er en sædvanlig komplikation af EVAR ^14,15. Masser af spørgsmål forbliver uløste: AAA brud er blevet beskrevet med lave endolækager, og undertiden uden aneurismesækken udvi…

Materials

			Animals
Wistar rats			aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g
			Instruments
Isoflurane anesthesic system			4,5% at the beginning, then 2%
Penthobarbital	Ceva sante animale, Libourne, France
Dissection stereomicroscope
Steriles gloves
Microsurgical Steriles instruments	Moria, Antony, France		Needle holder, Forceps, Scissors,Gilbert approximator o 3 Micro clamps
N°40 Silk string
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon, Johnson & Johnson, Auneau, France
Heat-tapered polyethylene tubing	PE 10
Syringe infusion pump
Porcine pancreatic elastase	Sigma, St. Louis, Mo., USA		550 μl of salin is mixed with 175 μl of elastase
Indeflator
9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft	Abbott, Abbott Park, Illinois, USA
C-Arm OEC 9800	GE Medical Systems, Milwaukee, WI
Aspegic 1000 mg	Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France
			Reagent
Aerane isoflurane 100ML	Baxter	Aerane
Penthobarbital	Centravet	053pen203
Silk Suture 4-0	Fine Science	18020-40
Microsurgical steriles instruments	Moria	9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon	W2829 – NS2850
Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10	Bioseb	MRE-010
Infusion pump	World precision instrument	AL-1000
Porcine pancreatic elastase	Sigma	E1250-100MG
Indeflator	Longreal	KY025 25 100
Aspegic 1000mg (Aspirin)	Sanofi-Aventis	3400931898191
C-Arm OEC 9800	General electric.	OEC 9800
Stentgraft : Jostent	Abbott	210CG1230 210CG1630