En ny murine modell av Endovascular aortaaneurisme Repair

Summary

Histologiske og biokjemiske endringer etter aneurisme endograft utelukkelse er fortsatt uklart. Vi beskriver en ny modell av endograft implantasjon på en murine aneurisme. Gjennom trombe analyse med og uten vedvarende sirkulerende blodet grensesnitt, og ny endovaskulær biomaterialer evaluering, vil denne modellen bidra til å bedre forstå endovaskulær aneurisme utelukkelse patobiologi.

Abstract

Endovaskulær aneurisme ekskludering er en validert metode for å hindre aneurisme ruptur. Langsiktige resultater markere teknikk begrensninger og nye aspekter ved abdominal aortaaneurisme (AAA) patofysiologi. Det er ingen abdominal aortaaneurisme endograft utelukkelse modell billig og reproduserbare, noe som ville tillate dype undersøkelser av AAA før og etter behandling. Vi herved beskrive hvordan å indusere, og deretter å utelukke med en overbygd koronar stentgraft en abdominal aortaaneurisme i en rotte. Den velkjente elastase indusert AAA modellen ble først rapportert i 1990 ¹ i en rotte, og deretter som beskrevet i mus ^2. Elastin degradering fører til utvidelse av aorta med inflammatorisk infiltrasjon av bukveggen og intra luminal trombe, matchende med menneskelig AAA. Endovaskulær ekskludering med liten overbygd stentgraft utføres deretter, med unntak av eventuelle interaksjoner mellom sirkulerende blod og aneurisme trombe. Passende eksklusjon og stentgraft patency erbekreftes før avlivning av en angiografi tenkte venstre halspulsåren. Delvis kontroll av elastase diffusjon gjør aneurisme form forskjellig for hvert dyr. Det er vanskelig å lage en aneurisme, noe som vil føre til at en passende lengde av aorta under aneurismen for en enkel stentgraft innledning, og med tilstrekkelig proksimale og distale hals for å forhindre endolekkasjer. Mange feil kan føre til stentgraft introduksjon som noen ganger føre til aorta rive med smerter og problemer å sy det, og endotelskade med postoperativ aorta trombose. Å gi aspirin til rotter før stentgraft implantering reduserer strykprosent uten større blødninger. Klemming tid aktiverer nøytrofile, endotelet og blodplater, og kan forstyrre biologisk analyse.

Introduction

Endovaskulær ferdigheter har kommet siden den første endovaskulær aortaaneurisme reparasjon (EVAR) av Parodi i 1991 ^tre, nesten halvparten av alle mage aneurismer behandles nå med EVAR ^fire. I motsetning til kirurgi, forlater EVAR tromben, unntatt det fra systemisk blodet. Aneurismer er preget av en hemoglobin rik flere lag trombe, en tynn medier, og en fibrosed og betent adventitia. Den sentrale rollen proteolyse ⁵ i aneurisme progresjon har blitt demonstrert tretti år siden ^{6, 7:} aneurisme sac trombe er forbundet med en tynn aorta, lysering av elastin, lav tetthet av glatte muskelceller i media, og en høy grad av immuno -inflammatorisk adventitial reaksjon ^8,9. Disse forandringer tyder på at proteolytisk enzymatisk aktivitet forekommer innenfor tromben, i stedet for direkte inn i aorta.

I tillegg er den luminale lag av tromben rik på agglutinerte røde blod ceLLS slippe hemoglobin. De er primært involvert i fibrindannelse, trombocyttaktiveringen og indusere trombin formasjon. Til slutt, induserer trombe også t-PA og plasminogen oppbevaring, som er involvert i fibrinolyse og rekruttering leukocytter, hovedsakelig nøytrofile. Dette er 12 ganger mer viktig i trombe enn i blodet ^10. Deres tilstedeværelse er forbundet med en høy forekomst av matriksmetalloproteinase type 8 (MMP-8), MMP-9 og elastase: de slipper granulære serinproteaser og Pro oksydative midler som fører til nedbrytning av fibrillær matrise, og til slutt aorta ^9,11 ruptur ^-13.

Elektiv aneurisme Tiltaket har som mål å hindre brudd. EVAR etterlater både aneurisme vegg og trombe intakt. Dermed er aneurisme perfusjon av aorta sikkerheter (lumbar arteries, mindreverdige mesenteric arterie …), oppkalt endolekkasje, og er en bestemt komplikasjon av endovaskulær behandling ^14,15, noen ganger fører til brudd even med lavt trykk endolekkasjer. Videre, i enkelte pasienter, er det ingen økning i aneurisme diameter ^16. Interaksjon mellom sirkulerende blod og aneurysmal veggen opprettholder nevnte intra luminal trombe biologisk aktivitet. Derfor type V endolekkasjer, definert som utvidelse av aneurisme sac uten identifisert Endolekkasje, kunne forklares ved enzymatisk aktivitet innenfor aneurisme trombe.

Verken radiologisk imaging (18FDG-PET scan, trombocyttaktiveringen scintigrafi, jern oksid kontrast MRI17) eller perifert blod prøvetaking (MMP-9, blodplater avledet mikropartikler, Plasmin / anti-plasmin komplekse) som brukes til å utforske endovaskulær innvirkning på aortaaneurismer hos mennesker direkte evaluere biokjemiske mekanismer.

I vår kunnskap, er det ingen noen reproduserbare og billig eksperimentelle aneurisme eksklusjon dyremodeller. Dette lar før og etter aneurisme eksklusjon biologiske og histologiske endringer for å bli utforsket.

Protocol

Metoder Protokollen er godkjent av Bichat-Debré Ethic komité (N ° 2012-15/698-0074). Den elastase perfusjon modellen er først beskrevet av Anidjar i 1990 en: abdominal aortaaneurisme er indusert av elastase perfusjon i Wistar rotter, i alderen 8 til 9 uker, 250-300 g. To til fire uker senere, er et re-laparotomi utført, og en 3 mm diameter dekket koronar stentgraft brukes for å utelukke aneurismen. Pode, inn gjennom en distal aortotomy, er deployert…

Representative Results

Aneurisme er festet i en 4% para-formaldehyd-løsning i løpet av 24 timer, deretter inn i en fosfatbufret saltløsning før fiksering i en harpiks blokk. Vi bruker en HPS (Hematoxylin Phloxin Safran) (figur 1) flekker, viser helbredende proliferativ cellene rundt PTFE (figur 2). Mesenchymale celler er da karakterisert ved α-aktin farging (figur 3). <img src="/files/ftp_upload/50740/50740fig1.jpg" …

Discussion

To modeller av AAA allerede er beskrevet i vårt laboratorium: xenograft ¹⁹ og elastase induserte modeller ^en Elastase modellen er den mest ligner menneskelige aortaaneurismer:. En stor omkrets intraluminal trombe er da ekskludert av endovaskulær aneurisme reparasjon.

Endolekkasjer er en vanlig komplikasjon av EVAR ^14,15. Mange spørsmål gjenstår uløste: AAA ruptur har blitt beskrevet med lave endolekkasjer, og noen ganger uten aneurisme sac utvidelse <su…

Materials

			Animals
Wistar rats			aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g
			Instruments
Isoflurane anesthesic system			4,5% at the beginning, then 2%
Penthobarbital	Ceva sante animale, Libourne, France
Dissection stereomicroscope
Steriles gloves
Microsurgical Steriles instruments	Moria, Antony, France		Needle holder, Forceps, Scissors,Gilbert approximator o 3 Micro clamps
N°40 Silk string
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon, Johnson & Johnson, Auneau, France
Heat-tapered polyethylene tubing	PE 10
Syringe infusion pump
Porcine pancreatic elastase	Sigma, St. Louis, Mo., USA		550 μl of salin is mixed with 175 μl of elastase
Indeflator
9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft	Abbott, Abbott Park, Illinois, USA
C-Arm OEC 9800	GE Medical Systems, Milwaukee, WI
Aspegic 1000 mg	Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France
			Reagent
Aerane isoflurane 100ML	Baxter	Aerane
Penthobarbital	Centravet	053pen203
Silk Suture 4-0	Fine Science	18020-40
Microsurgical steriles instruments	Moria	9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon	W2829 – NS2850
Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10	Bioseb	MRE-010
Infusion pump	World precision instrument	AL-1000
Porcine pancreatic elastase	Sigma	E1250-100MG
Indeflator	Longreal	KY025 25 100
Aspegic 1000mg (Aspirin)	Sanofi-Aventis	3400931898191
C-Arm OEC 9800	General electric.	OEC 9800
Stentgraft : Jostent	Abbott	210CG1230 210CG1630