Un nouveau modèle murin de endovasculaire anévrisme de l'aorte réparation

Summary

Modifications histologiques et biochimiques après anévrisme exclusion d'endoprothèse sont encore mal connues. Nous décrivons un nouveau modèle d'implantation d'une endoprothèse anévrisme murin. Grâce à l'analyse thrombus avec et sans circulation persistante interface de flux sanguin, et nouvelle évaluation des biomatériaux endovasculaire, ce modèle permettra de mieux comprendre endovasculaire anévrisme exclusion pathobiology.

Abstract

Exclusion d'anévrisme endovasculaire est une technique validée pour éviter une rupture d'anévrisme. Les résultats à long terme mettent en évidence les limites de la technique et de nouveaux aspects de l'aorte abdominale anévrisme (AAA) physiopathologie. Il n'y a pas anévrisme de l'aorte endograft modèle d'exclusion abdominale pas cher et reproductible, ce qui permettrait investigations profondes de AAA avant et après traitement. Nous décrivons par la présente comment provoquer, pour ensuite exclure avec une endoprothèse coronaire couverte d'un anévrisme de l'aorte abdominale chez un rat. Le modèle AAA induite par l'élastase bien connu a été signalé en 1990 ¹ chez le rat, puis décrit chez la souris ^2. L'élastine dégradation conduit à une dilatation de l'aorte à l'infiltration inflammatoire de la paroi abdominale et le thrombus luminal intra, correspondant à AAA humain. Exclusion endovasculaire avec petit endoprothèse couverte est ensuite réalisée, à l'exclusion des interactions entre le sang circulant et les thrombus d'anévrisme. Exclusion appropriée et la perméabilité de endoprothèse estconfirmé avant l'euthanasie par une angiographie pensée de l'artère carotide gauche. Le contrôle de la diffusion partielle élastase rend la forme d'un anévrisme différente pour chaque animal. Il est difficile de créer une rupture d'anévrisme, ce qui permettra une longueur appropriée de l'aorte au-dessous de l'anévrisme pour une introduction d'endoprothèse facile, et avec collet proximal et distal suffisant pour empêcher endofuites. Beaucoup de défaillance peut entraîner l'introduction endoprothèse qui conduisent parfois à la déchirure de l'aorte avec la douleur et les troubles à point, et des lésions endothéliales avec le post op aorte thrombose. Donner l'aspirine à des rats avant l'implantation endoprothèse diminue le taux d'échec sans hémorragie majeure. Temps de serrage active neutrophiles, l'endothélium et les plaquettes, et peut interférer avec l'analyse biologique.

Introduction

Compétences endovasculaires ont progressé depuis le premier traitement endovasculaire de l'anévrisme aortique (EVAR) par Parodi en 1991 ^3, près de la moitié de tous les anévrismes abdominaux sont maintenant traités par EVAR ^4. Contrairement à la chirurgie, EVAR quitte le thrombus, excluant de circulation sanguine systémique. Les anévrismes sont caractérisées par un taux d'hémoglobine riches thrombus multicouche, des médias minces, et une adventice fibrosées et enflammées. Le rôle crucial de la protéolyse ⁵ dans la progression de l'anévrisme a été démontrée il ya trente ans ^{6, 7:} anévrisme sac thrombus est associée à une paroi mince de l'aorte, la lyse de l'élastine, la faible densité de cellules musculaires lisses dans les médias, et un niveau élevé de l'immuno -inflammatoire réaction adventitielle ^8,9. Ces modifications montrent que l'activité enzymatique protéolytique se produit dans le thrombus, et non pas directement dans la paroi de l'aorte.

En outre, la couche luminale du thrombus est riche en rouge sang agglutiné CElls libération de l'hémoglobine. Ils sont principalement impliquées dans la formation de fibrine, l'activation des plaquettes et induire la formation de thrombine. Enfin, thrombus induit également du t-PA et du plasminogène rétention, qui sont impliqués dans la fibrinolyse et le recrutement des leucocytes, principalement des neutrophiles. Ce sont 12 fois plus importantes dans les thrombus que dans le sang ^10. Leur présence est associée à un taux élevé de matrice métalloprotéinase de type 8 (MMP-8), MMP-9 et l'élastase: ils libèrent des sérine-protéases granulaires et des agents pro oxydatif conduisant à la dégradation de la matrice fibrillaire, et la paroi aortique rupture finalement ^{9,11 -13.}

Intervention élective de l'anévrisme vise à prévenir la rupture. EVAR quitte la fois paroi de l'anévrisme et thrombus intact. Ainsi, les anévrismes aortiques perfusion par des collatéraux (artères lombaires, l'artère mésentérique inférieure …), est nommé endofuite, et est une complication spécifique du traitement endovasculaire ^14,15, ce qui conduit parfois à la rupture veilleN avec endoleaks basse pression. En outre, chez certains patients, il n'existe aucune augmentation du diamètre de l'anévrisme ^16. Interaction entre le sang circulant et la paroi anévrismale maintient l'activité biologique thrombus luminal intra-dessus. Par conséquent, endofuites de type V, définie comme l'expansion du sac de l'anévrisme sans endofuite identifiés, pourraient s'expliquer par l'activité enzymatique dans les thrombus d'anévrisme.

Imagerie ni radiologique (18 FDG-TEP, scintigraphie activation plaquettaire, oxyde de fer contraste MRI17) ni prélèvement de sang périphérique (MMP-9, des microparticules dérivées de plaquettes, la plasmine / anti-plasmine) utilisés pour explorer l'impact endovasculaire sur anévrismes de l'aorte chez les humains directement évaluer les voies biochimiques.

A notre connaissance, il n'existe pas de modèles animaux exclusion anévrisme expérimentales reproductibles et pas cher. Celui-ci permet anévrisme exclusion modifications pré et post biologiques et histologiques à être explorées.

Protocol

Méthodes Le protocole a été approuvé par le comité d'éthique Bichat-Debré (N ° 2012-15/698-0074). Le modèle de perfusion élastase a été d'abord décrit par Anidjar en 1990 1: anévrisme de l'aorte abdominale est induite par la perfusion d'élastase chez les rats mâles Wistar, âgés de 8 à 9 semaines, 250-300 g. Deux à 4 semaines plus tard, une nouvelle laparotomie est effectuée, et un diamètre de 3 mm recouvert endoproth?…

Representative Results

Anévrisme est fixé dans une solution de paraformaldéhyde 4% pendant 24 heures, puis dans une solution saline tamponnée phosphate jusqu'à fixation dans un bloc de résine. Nous utilisons une HPS (hématoxyline Phloxine Safran) (Figure 1), montrant la coloration des cellules prolifératives de guérison à travers le PTFE (figure 2). Les cellules mésenchymateuses sont ensuite caractérisés par une coloration α-actine (Figure 3). <p class="jove_conten…

Discussion

Deux modèles de AAA ont déjà été décrits dans notre laboratoire: xénogreffe ¹⁹ et modèles induits par l'élastase ¹ modèle de l'élastase est le plus semblable à anévrismes aortiques humaines:. Une grande thrombus intraluminal périphérique est alors exclue par la réparation endovasculaire de l'anévrisme.

Endofuites sont une complication habituelle de EVAR ^14,15. Beaucoup de questions demeurent non résolus: rupture de l'AAA ont …

Materials

			Animals
Wistar rats			aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g
			Instruments
Isoflurane anesthesic system			4,5% at the beginning, then 2%
Penthobarbital	Ceva sante animale, Libourne, France
Dissection stereomicroscope
Steriles gloves
Microsurgical Steriles instruments	Moria, Antony, France		Needle holder, Forceps, Scissors,Gilbert approximator o 3 Micro clamps
N°40 Silk string
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon, Johnson & Johnson, Auneau, France
Heat-tapered polyethylene tubing	PE 10
Syringe infusion pump
Porcine pancreatic elastase	Sigma, St. Louis, Mo., USA		550 μl of salin is mixed with 175 μl of elastase
Indeflator
9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft	Abbott, Abbott Park, Illinois, USA
C-Arm OEC 9800	GE Medical Systems, Milwaukee, WI
Aspegic 1000 mg	Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France
			Reagent
Aerane isoflurane 100ML	Baxter	Aerane
Penthobarbital	Centravet	053pen203
Silk Suture 4-0	Fine Science	18020-40
Microsurgical steriles instruments	Moria	9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A
Prolen 9-0 and 10-0	Ethicon	W2829 – NS2850
Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10	Bioseb	MRE-010
Infusion pump	World precision instrument	AL-1000
Porcine pancreatic elastase	Sigma	E1250-100MG
Indeflator	Longreal	KY025 25 100
Aspegic 1000mg (Aspirin)	Sanofi-Aventis	3400931898191
C-Arm OEC 9800	General electric.	OEC 9800
Stentgraft : Jostent	Abbott	210CG1230 210CG1630