Murino cervicale Cuore trapianto Modello utilizzando una tecnica Cuff Modificato
Summary
Il modello murino di trapianto di cuore cervicale è adatto per immunologica nonché studi danno da ischemia riperfusione. Abbiamo modificato la procedura utilizzando una tecnica bracciale non sutura ed eseguito più di 1.000 trapianti di successo con questo approccio.
Qui, forniamo ulteriori dettagli di questa tecnica per integrare il video.
Abstract
Modelli murini sono di particolare interesse per la ricerca in quanto una grande varietà di anticorpi monoclonali e commercialmente definiti inbred e ceppi di eliminazione diretta sono a disposizione per effettuare meccanicistico studi in vivo. Mentre i modelli di trapianto di cuore utilizzando una tecnica di sutura sono stati sviluppati con successo nei ratti, la traduzione in un altrettanto diffuso equivalente murino usato non è mai stata raggiunta a causa della complessità tecnica del procedimento microchirurgico. Al contrario, le tecniche di gemelli non sutura, anche sviluppati inizialmente nei ratti, sono stati adattati con successo per l'utilizzo nei topi 1-3. Questa tecnica di rivascolarizzazione prevede due fasi principali I) eversione della nave ricevente su un bracciale in polietilene; II) tirando la nave cedente sopra la nave ricevente precedentemente estroflesso e tenendolo in posizione con un pareggio circonferenziale. Ciò garantisce una continuità dello strato endoteliale, tempo di funzionamento breve e molto elevati tassi di pervietà 4.
t "> Utilizzando questa tecnica di anastomosi vascolare abbiamo effettuato più di 1.000 trapianti di cuore cervicale con un tasso di successo complessivo del 95%. Per afflusso arterioso l'arteria carotide comune e l'arco aortico prossimale sono stati anastomizzata conseguente perfusione retrograda del cuore trapiantato. Per il drenaggio venoso polmonare dell'innesto è stata anastomizzata con la vena giugulare esterna del destinatario 5.Qui, forniamo ulteriori dettagli di questa tecnica per integrare il video.
Introduction
Il trapianto cardiaco rappresenta la terapia di scelta per i pazienti affetti da diverse malattie di cuore allo stadio terminale. I progressi nelle tecniche chirurgiche, più efficace profilassi delle infezioni, e nuovi regimi immunosoppressivi determinato marcatamente migliore risultato del trapianto di organi 6. Tuttavia, la sopravvivenza del trapianto a lungo termine non è migliorata con rigore negli ultimi anni 7. Rigetto cronico, caratterizzata da trapianto arteriosclerosi continua ad essere un grave ostacolo per la sopravvivenza del trapianto a lungo termine 8-11.
Il modello di trapianto cardiaco eterotopico nei topi fornisce uno strumento importante e valido per l'analisi del meccanismo immunologico durante acuta e rigetto cronico 12-15.
Ad oggi il modello di trapianto più frequente è ancora il trapianto di cuore del mouse addominale utilizzando la tecnica di sutura. L'aorta ascendente del cuore del donatore viene anastomizzato alla unbdominal aorta e l'arteria polmonare è anastomizzati alla vena cava inferiore del destinatario. Gran parte delle difficoltà microchirurgico del modello di sutura si basa sulla piccola dimensione dei vasi, che vengono suturate 16,17.
In contrasto con il modello sutura cuore è posto nella regione del collo del recipiente in cui la vena giugulare esterna è anastomizzato l'arteria polmonare e l'arteria carotide comune l'aorta del donatore.
La logica dello sviluppo del modello di trapianto di cuore cervicale con la tecnica bracciale era di avere un modello animale, che permette di ottenere alte percentuali di successo con le abilità di microchirurgia di base che permetteranno un'ampia applicazione di questo modello. I principali vantaggi di questo metodo sono l'anastomosi significativamente meno che si verificano complicazioni come emorragie e trombosi correlata rispetto al modello di sutura 18.
Protocol
Representative Results
Discussion
Rifiuto di trapianti vascolarizzati comporta una pletora di diverse fasi che possono essere non sufficientemente valutati solo con modelli in vitro. Fenomeni come la sensibilizzazione dei destinatari, trasformazione antigeni negli organi linfoidi secondari, ma anche la differenziazione e la proliferazione delle cellule immuno-competenti sono meglio caratterizzati in vivo. I modelli animali sono quindi lo strumento ideale per la ricerca traslazionale 16. Modelli murini rappresentano ancora il…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors declare that they have no competing financial interests.
Materials
| Yasargil Clip Mini Permanent 7mm | Aesculap | FE720K | |
| Micro vessel clip | S & T | B1 00396 V | |
| Microscissor | FST | 14075-11 | |
| Vesseldilatator | S & T | D-5a.2 00125 | |
| Microforceps | FST | Dumont 11271- 30 | |
| Clipapplicator | S & T | CAF-4 00072 | |
| Microvessel clip | S & T | B1 00396 V |
Riferimenti
- Brandacher, G., et al. Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity. Transplantation. 81, 583-589 (2006).
- Schneeberger, S., et al. The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation. Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).
- Sucher, R., et al. IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival. JImmunol. 188, 37-46 (2012).
- Yamashita, K., et al. Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs. FASEB J. 20, 776-778 (2006).
- Kienzl, K., et al. Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection. Transplantation. 88, 553-560 (2009).
- Aurora, P., et al. Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report–2007. J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).
- Häyry, P. Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development. Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).
- Hosenpud, J. D. Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update. Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).
- Libby, P., Pober, J. S. Chronic rejection. Immunity. 14, 387-397 (2001).
- Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine. Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).
- Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction. Transpl Int. 13, 385-401 (2000).
- Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
- Huang, X., Chen, D., Chen, L. [A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research]. Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).
- Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).
- Wang, C. Y., et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105, 1609-1614 (2002).
- Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51, 896-898 (1991).
- Tomita, Y., et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).
- Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
- Zimmermann, F. A., et al. Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts. Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).
- Maglione, M., et al. Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model. Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).
- Heron, I. A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats. Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).
