Summary

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Published: October 12, 2014
doi:

Summary

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.

Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Abstract

Fare model monoklonal antikorların çeşitli beri araştırılmaktadır özel ilgi ve ticari olarak doğuştan tanımlandığı gibidir ve boşaltma suşları in vivo çalışmalar mekanik gerçekleştirmek için kullanılabilir. Bir dikiş tekniği kullanılarak kalp nakli modeller ilk kez başarıyla sıçanlarda geliştirilen iken, aynı derecede yaygın kullanılan kemirgen eşdeğer içine çeviri mikrocerrahi işlemin teknik karmaşıklığı nedeniyle elde değildi. Buna karşılık olarak, aynı zamanda, farelerde geliştirilmişken olmayan dikiş manşet teknikleri, farelerde başarılı bir şekilde 1-3 kullanılmak üzere adapte edilmiştir. Revaskülarizasyon için bu teknik bir polietilen manşet alıcı gemiyi tersine çevrilmesi iki önemli adım I) içerir; II) eski everte alıcı geminin üzerinde donör gemiyi çekerek ve çevresel bir kravat ile yerde tutuyor. Bu endotel tabakası, kısa çalışma süresi ve çok yüksek açıklık oranlarının 4 bir sürekliliğini sağlar.

t "> vasküler anastomoz için bu tekniği kullanarak biz karotis arter girişi arteriyel için.% 95 genel başarı oranı ile 1.000 'den fazla servikal kalp nakli gerçekleştirilen ve proksimal aort arkı nakledilen kalbin bir retrograd perfüzyon sonuçlanan anastomoz edildi. venöz drenaj için greft pulmoner arter alıcının 5 eksternal juguler ven ile anastomoz edildi.

Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Introduction

Kalp transplantasyonu farklı son dönem kalp hastalıklardan muzdarip hastalar için tercih tedaviyi temsil eder. Cerrahi tekniklerin, enfeksiyonların daha etkili profilaksi, ve yeni immunsupresif rejimler ilerlemeler organ nakli 6 belirgin geliştirilmiş sonucunu sonuçlandı. Ancak, uzun dönem greft sağkalım son yıllarda üzerinde 7 titizlikle geliştirilmiş değil. Nakli damar sertliği ile karakterize kronik rejeksiyon, uzun dönem greft sağkalım 8-11 önemli bir engel olmaya devam etmektedir.

Farelerde heterotopik kalp nakli modeli akut dönemde immünolojik mekanizma analizi için önemli ve geçerli bir araç yanı sıra kronik rejeksiyon 12-15 sağlar.

Bugüne kadar en sık nakli modeli dikiş tekniği kullanılarak karın fare kalp nakli hala. Donör kalbin çıkan aort a anastomoz edilirbdominal aort ve pulmoner arter alıcının vena kava anastomoz edilir. Sütür modelin mikrocerrahi zorluk çoğu 16,17 dikilir gemilerin, küçük boyutuna bağlıdır.

Dikiş modelinin aksine kalp eksternal juguler ven pulmoner arter ve karotis arter donörün aort anastomoz edilir alıcının boyun bölgesinde yerleştirilir.

Manşet tekniği kullanılarak servikal kalp nakli modelinin gelişim mantığı bu modelin geniş uygulamasını sağlayacak temel mikrocerrahi becerileri ile yüksek başarı oranları elde sağlayan bir hayvan modeli, sahip oldu. Bu yöntemin önemli bir avantajı dikiş modeli 18 ile karşılaştırıldığında kanama ve tromboz gibi komplikasyonları ile ilgili önemli ölçüde daha az meydana anastomoz bulunmaktadır.

Protocol

Hayvanlar, bariyer patojenden ari bir yere yerleştirilmiştir. Bütün hayvanlar Ulusal tarafından Tıbbi Araştırmalar Ulusal Derneği "ve" Ulusal Bilimler Akademisi tarafından hazırlanan Laboratuvar Hayvanları "Bakımı ve Kullanımı Kılavuzuna tarafından formüle yayınlanan" Laboratuar Hayvan Bakımı Esasları "uyarınca insan bakım almak Sağlık Enstitüleri (NIH Yayın yok. 86-23, 1985 revize). Tüm deneyler Eğitim, Bilim ve Kültür Avusturya Maliye Bakanlığı tarafından o…

Representative Results

Şekil 2 tam MHC uyumsuz C57BL / 6 alıcılarının içine naklinden sonra BALB / c vericilerden kalp allogreftlerinin temsili sağkalım verileri gösterir. Kalpler nakli sonrası günde 7 ± 1 reddedilir. Nakledilen allogreftin parmak palpasyonu allogreft reddinin zamana bağlı ders tespit etmek için hassas bir yöntemdir. Dizimizin yapılan tüm singenik kalp nakilleri süresiz atlattı (> 150 gün). <img alt="Şekil 1" src="/file…

Discussion

Vaskülarize allogreft reddi sadece yetersiz m vitro modeller kullanılarak değerlendirilebilir farklı adımları bir bolluk gerektirir. Alıcıların sensitizasyon, antijen işleme ikincil lenfoid organlarda değil, aynı zamanda, bağışıklık yetkin hücrelerin farklılaşması ve proliferasyonu gibi in vivo fenomen daha iyi karakterize edilmiş bulunmaktadır. Hayvan modelleri böylece translasyonel araştırma 16 için ideal bir araçtır. Fare modelleri hala transgenik ve gen nakav…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors declare that they have no competing financial interests.

Materials

Yasargil Clip Mini Permanent 7mm Aesculap FE720K
Micro vessel clip S & T B1 00396 V
Microscissor FST 14075-11
Vesseldilatator S & T D-5a.2 00125
Microforceps FST Dumont 11271- 30
Clipapplicator S & T CAF-4 00072
Microvessel clip S & T B1 00396 V

Riferimenti

  1. Brandacher, G., et al. Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity. Transplantation. 81, 583-589 (2006).
  2. Schneeberger, S., et al. The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation. Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).
  3. Sucher, R., et al. IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival. JImmunol. 188, 37-46 (2012).
  4. Yamashita, K., et al. Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs. FASEB J. 20, 776-778 (2006).
  5. Kienzl, K., et al. Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection. Transplantation. 88, 553-560 (2009).
  6. Aurora, P., et al. Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report–2007. J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).
  7. Häyry, P. Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development. Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).
  8. Hosenpud, J. D. Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update. Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).
  9. Libby, P., Pober, J. S. Chronic rejection. Immunity. 14, 387-397 (2001).
  10. Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine. Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).
  11. Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction. Transpl Int. 13, 385-401 (2000).
  12. Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
  13. Huang, X., Chen, D., Chen, L. [A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research]. Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).
  14. Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).
  15. Wang, C. Y., et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105, 1609-1614 (2002).
  16. Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51, 896-898 (1991).
  17. Tomita, Y., et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).
  18. Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).
  19. Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
  20. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  21. Zimmermann, F. A., et al. Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts. Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).
  22. Maglione, M., et al. Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model. Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).
  23. Heron, I. A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats. Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).
check_url/it/50753?article_type=t

Play Video

Citazione di questo articolo
Oberhuber, R., Cardini, B., Kofler, M., Ritschl, P., Oellinger, R., Aigner, F., Sucher, R., Schneeberger, S., Pratschke, J., Brandacher, G., Maglione, M. Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique. J. Vis. Exp. (92), e50753, doi:10.3791/50753 (2014).

View Video