Summary

수정 커프 기술을 사용하여 쥐의 자궁 심장 이식 모델

Published: October 12, 2014
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Summary

뮤린 자궁 심장 이식 모델은, 면역뿐만 아니라 허혈 재관류 손상 연구에 매우 적합하다. 우리는 비 봉합 커프 기술을 사용하여 절차를 수정이 방법으로 1,000 개 이상의 성공적인 이식을 수행 하였다.

여기서, 우리는 비디오를 보충하기위한이 기술의 추가 정보를 제공합니다.

Abstract

마우스 모델은 단일 클론 항체의 다양한 이후 연구에 특별한 관심의 상업적 근친 정의 녹아웃 균주의 생체 내 (in vivo) 연구 기계적인 수행 할 수 있습니다. 봉합 기술을 사용하여 심장 이식 모델을 처음 성공적으로 쥐에서 개발 된 반면, 동일하게 널리 사용되는 쥐의 동등한로 번역이 미세 절차의 기술적 복잡성으로 인해 실현되지 않았습니다. 대조적으로, 또한, 쥐의 초기 개발 비 봉합 커프 기술들이 성공적으로 생쥐 1-3에서 사용하기에 적합 하였다. 혈관 재 형성을위한이 기술은 폴리에틸렌 커프 위에받는 용기 everting 개의 주요 단계 I)을 포함한다; II) 이전 everted받는 용기를 통해 기증자 용기를 당기고 원주 넥타이와 장소에 들고. 이것은 내피 층, 짧은 동작 시간 및 매우 높은 개존율 (4)의 연속성을 보장한다.

t는 "> 혈관 문합을 위해이 기술을 사용하여 우리는 경동맥 유입 동맥를 들어. 95 %의 성공률로 1,000 명 이상의 자궁 심장 이식을 수행 근위 대동맥 궁은​​ 이식 된 심장의 역행 관류의 결과로 문합 하였다. 정맥 배수 이식의 폐동맥받는 사람 (5)의 외부 경정맥과 문합 하였다.

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Introduction

심장 이식은 다른 말기 심장 질환으로 고생하고있는 환자들을위한 선택의 치료를 나타냅니다. 수술 기법, 감염의 더 효과적인 예방 및 새로운 면역 억제 요법의 발전은 장기 이식 6에서 현저하게 향상된 결과를 초래. 그러나, 장기 이식 생존율은 지난 7 년 동안 엄격하게 개선되지 않았습니다. 이식 동맥 경화에 의해 특징 만성 거부, 장기 이식 생존 8-11에 큰 장애물이되고 있습니다.

생쥐 이소성 심장 이식 모델은 급성 동안 면역 학적 메커니즘의 분석을위한 중요하고 유효한 도구뿐만 아니라 만성 거부 반응 12-15을 제공합니다.

현재까지 가장 흔한 이식 모델은 봉합 기술을 사용하여 복부 마우스 심장 이식은 여전히​​있다. 기증자 심장의 대동맥이에 문합된다bdominal 대동맥과 폐동맥받는 사람의 하대 정맥에 문합된다. 봉합 모델 미세 어려움의 대부분은 16, 17을 봉합 용기의 작은 크기에 기초한다.

봉합 모델 달리 심장 외부 경정맥은 폐동맥 및 경동맥 기증자의 대동맥에 문합되는 수신자의 목 영역에 배치된다.

커프 기술을 사용하여 자궁 심장 이식 모델의 개발의 이론적 근거는이 모델의 광범위한 응용을 허용 기본적인 미세 기술로 높은 성공률을 달성 할 수 있도록 동물 모델을 가지고 있었다. 이 방법의 주요 이점은 봉합 모델 (18)에 비해 출혈 및 혈전증과 같은 합병증을 관련 현저히 적게 발생 문합이다.

Protocol

동물은 장벽 무균 시설에서 보관되어 있습니다. 모든 동물은 국가에 의해 의료 연구를위한 국가 사회 "및"국립 과학 아카데미에 의해 제조 실험 동물 "의 관리 및 사용을위한 설명서에 의해 공식화 및 출판"실험 동물 관리의 주체 "을 준수하여 인간의 서비스를받을 수 보건원 (NIH 공개 NO. 86-23은 1985 년 개정). 모든 실험은 교육 과학 문화의 오스트리아 교육부에 의해 승인됩니다. …

Representative Results

그림 2는 완전히 MHC 일치하지 않는 C57BL / 6받는 사람에 이식 후 BALB / C의 기증자로부터 심장 이식을 대표하는 생존 데이터를 보여줍니다. 마음은 이식 후 일 7 ± 1에 거부됩니다. 이식 된 동종의 손가락 촉진은 동종 이식 거부 반응의 시간 의존적 과정을 감지하는 중요한 방법이다. 우리의 시리즈에서 수행되는 모든 동계 심장 이식 무기한 생존 (> 1백50일). <p class="jove_content" fo:keep-t…

Discussion

혈관 이식의 거부는 충분히 체외 모델에서 사용하여 평가 될 수있는 다른 단계의 과다를 수반한다. 받는 사람의 감작 항원 처리 이차 림프 기관에서뿐만 아니라 면역 능력 세포의 분화 및 증식 같은 현상은 생체 내에서 특성화 수 있습니다. 동물 모델함으로써 중개 연구 (16)을위한 이상적인 도구입니다. 마우스 모델은 여전히 형질 전환 유전자 녹아웃 마우스의 넓은 범위 때?…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors declare that they have no competing financial interests.

Materials

Yasargil Clip Mini Permanent 7mm Aesculap FE720K
Micro vessel clip S & T B1 00396 V
Microscissor FST 14075-11
Vesseldilatator S & T D-5a.2 00125
Microforceps FST Dumont 11271- 30
Clipapplicator S & T CAF-4 00072
Microvessel clip S & T B1 00396 V

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Citazione di questo articolo
Oberhuber, R., Cardini, B., Kofler, M., Ritschl, P., Oellinger, R., Aigner, F., Sucher, R., Schneeberger, S., Pratschke, J., Brandacher, G., Maglione, M. Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique. J. Vis. Exp. (92), e50753, doi:10.3791/50753 (2014).

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