Murint Cervical hjertetransplantasjon Model Ved hjelp av en modifisert Cuff Technique
Summary
Den murine cervical hjertetransplantasjonsmodell er godt egnet for immunologiske, så vel som iskemi reperfusjonsskade studier. Vi endret prosedyren ved hjelp av en ikke-sutur cuff teknikk og utført mer enn 1000 vellykkede transplantasjoner med denne tilnærmingen.
Heri, gir vi flere detaljer om denne teknikken for å supplere video.
Abstract
Muse modeller er av spesiell interesse i forskning siden et bredt utvalg av monoklonale antistoffer og kommersielt definert innavlet og knockout-stammer er tilgjengelige for å utføre mekanistisk in vivo studier. Mens hjertetransplantasjon modeller ved hjelp av en sutur teknikk ble først hell utviklet hos rotter, ble oversettelse til en like utbredt brukt murine tilsvar aldri oppnådd på grunn av den tekniske kompleksiteten av mikrokirurgisk prosedyre. I motsetning til dette ble det ikke-sutur cuff teknikker, også utviklet opprinnelig hos rotter, med hell tilpasset for bruk i mus 1-3. Denne teknikken for revaskularisering involverer to store skritt I) ever mottakeren fartøy over en polyetylen mansjett; II) trekker donor fartøy over tidligere everted mottakeren fartøy og holde den på plass med en omkrets slips. Dette sikrer kontinuitet i endothelial laget, kort driftstid og svært høye patency priser fire.
t "> Ved hjelp av denne teknikken for vaskulær anastomose vi utført mer enn 1000 livmorhalshjertetransplantasjoner med en samlet suksessrate på 95%. For arteriell tilsig felles halspulsåren og den proksimale aortabue ble anastomoseres resulterer i en retrograd blodgjennomstrømming i transplantert hjerte. For venøs drenering lungearterien av graftet ble anastomoseres med ytre halsvenen til mottakeren fem.Heri, gir vi flere detaljer om denne teknikken for å supplere video.
Introduction
Hjertetransplantasjon representerer behandling av valg for pasienter som lider av ulike end-stage hjertesykdommer. Fremskritt innen kirurgiske teknikker, mer effektiv profylakse mot infeksjoner, og romanen immunsuppressive regimer resulterte i markant forbedret utfallet av organtransplantasjon seks. Imidlertid har langsiktig pode overlevelse ikke bedret strengt de siste årene 7. Kronisk avvisning, preget av transplantasjon arteriosklerose fortsetter å være et stort hinder for langsiktig pode overlevelse 8-11.
Modellen av heterotop hjertetransplantasjon hos mus gir en viktig og gyldig verktøy for analyse av immunologisk mekanisme under akutt så vel som kronisk avvisning 12-15.
Til dags dato den hyppigste transplantasjon modellen er fortsatt magemusehjertetransplantasjon ved hjelp av sutur teknikk. Den stigende aorta til donorhjerte er anastomosert til enbdominal aorta og lungearterien er anastomoseres til mottakerens vena cava inferior. Mye av mikro vanskelighetsgrad sutur modellen er basert på den lille størrelsen på skipene, som er suturerte 16,17.
I motsetning til sutur-modellen hjertet er plassert i halsregionen for mottakeren, hvor den ytre halsvenen er anastomosert til lungearterien og den felles karotidarterie aorta av donor.
Begrunnelsen for utvikling av livmorhalshjertetransplantasjon modellen ved hjelp av mansjetten teknikken var å ha en dyremodell, som gjør det mulig å oppnå høy suksessrate med grunnleggende mikro ferdigheter som vil tillate bred anvendelse av denne modellen. De viktigste fordeler med denne fremgangsmåte er betydelig mindre forekommende anastomose relaterte komplikasjoner som blødning og trombose i forhold til sutur-modellen 18.
Protocol
Representative Results
Discussion
Avvisning av vascularized allografts innebærer en mengde ulike trinnene som bare kan være utilstrekkelig vurderes ved hjelp av in vitro-modeller. Fenomener som sensibilisering av mottakere, antigen prosessering i sekundære lymfoide organer, men også i differensiering og proliferasjon av immunkompetente celler er bedre karakterisert ved vivo. Dyremodeller er dermed det ideelle verktøy for translasjonell forskning 16. Musemodeller fortsatt representerer gullstandarden i grunnlegg…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors declare that they have no competing financial interests.
Materials
| Yasargil Clip Mini Permanent 7mm | Aesculap | FE720K | |
| Micro vessel clip | S & T | B1 00396 V | |
| Microscissor | FST | 14075-11 | |
| Vesseldilatator | S & T | D-5a.2 00125 | |
| Microforceps | FST | Dumont 11271- 30 | |
| Clipapplicator | S & T | CAF-4 00072 | |
| Microvessel clip | S & T | B1 00396 V |
References
- Brandacher, G., et al. Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity. Transplantation. 81, 583-589 (2006).
- Schneeberger, S., et al. The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation. Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).
- Sucher, R., et al. IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival. JImmunol. 188, 37-46 (2012).
- Yamashita, K., et al. Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs. FASEB J. 20, 776-778 (2006).
- Kienzl, K., et al. Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection. Transplantation. 88, 553-560 (2009).
- Aurora, P., et al. Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report–2007. J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).
- Häyry, P. Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development. Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).
- Hosenpud, J. D. Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update. Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).
- Libby, P., Pober, J. S. Chronic rejection. Immunity. 14, 387-397 (2001).
- Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine. Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).
- Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction. Transpl Int. 13, 385-401 (2000).
- Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
- Huang, X., Chen, D., Chen, L. [A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research]. Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).
- Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).
- Wang, C. Y., et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105, 1609-1614 (2002).
- Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51, 896-898 (1991).
- Tomita, Y., et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).
- Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
- Zimmermann, F. A., et al. Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts. Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).
- Maglione, M., et al. Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model. Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).
- Heron, I. A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats. Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).
